张炜
- 作品数：35 被引量：222H指数：8
- 供职机构：南京农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省基础研究计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 农业生物学虚拟仿真实验教学资源建设被引量：24
- 2015年
- 从虚拟仿真实验教学资源整合与构建的角度,论述了南京农业大学农业生物学国家级虚拟仿真实验教学中心在植物学、动物学、动植物野外实习和现代生物技术等领域实验教学信息化建设过程中取得的初步成果,分析了虚拟仿真实验教学平台在生物学实验教学中发挥的独特优势,也提出了教学资源信息化建设和管理中存在的一些亟待解决的问题。
- 张炜崔瑾成丹
- 关键词：实验教学中心教学资源
- 高等植物液泡加工酶VPE家族的生物信息学分析被引量：4
- 2010年
- 利用已经分离的植物液泡加工酶(vacuolar processing enzyme,VPE)蛋白家族的Peptidase_C13结构域序列为检索序列,对拟南芥和水稻中的VPE家族成员进行序列分析,同时利用所有成员的氨基酸序列构建系统进化树,并对其中的保守序列以及信号肽区段和亚细胞定位进行了分析。结果表明:1)结合同源序列的搜索和结构域的鉴定,最终在拟南芥和水稻中确定了8个和13个VPE,其中2个拟南芥和11个水稻VPE成员为首次报道;2)蛋白系统进化分析表明,该基因家族的基本特征在拟南芥和水稻分离之前就已经形成;3)多序列联配以及MEME分析表明,Peptidase_C13结构域在VPE家族成员间高度保守;4)亚细胞定位分析表明,VPE成员定位于细胞中的不同特定位置,定位于液泡中的占多数。
- 修林春张炜
- 关键词：拟南芥生物信息学
- 人溶菌酶定点突变基因在毕赤酵母中的表达及活性分析被引量：3
- 2014年
- 利用PCR法将人溶菌酶(h LYZ)成熟肽与载体信号肽连接处的氨基酸残基进行定点突变,突变基因亚克隆至酵母分泌型表达载体p PICZαA,重组载体线性化后通过电击转化法转化巴斯德毕赤酵母X-33,利用含Zeocine抗生素的YPDS平板筛选高拷贝转化子。转化子酵母经甲醇诱导后取培养基离心上清液进行SDS-PAGE和活性检测。结果显示,突变体h LYZ活力和表达量较野生型均有显著提高。表明定向改变h LYZ信号肽残基性质可以提高其表达量和分泌效率。
- 陈熙陈毓齐小雨张炜
- 关键词：人溶菌酶巴斯德毕赤酵母信号肽定点突变
- 植物Remorin蛋白的研究进展被引量：5
- 2009年
- Remorin蛋白是一个新发现的与质膜/脂筏相联的植物专一性蛋白家族.综述了remorin蛋白的发现过程、物种和组织分布以及结构与功能的最新研究成果.Remorin蛋白分布广,存在于苔藓植物、裸子植物及被子植物中.它被定位于顶端组织、维管组织和胚胎组织的细胞质膜上.它的C端含有一个保守的coiled-coil模体,而N端变化较大.单体remorin可以形成纤维,可能在细胞骨架和膜骨架中发挥作用.它的另一个重要功能是参与植物抗性与发育的信号传导途径.
- 程彦伟韩建明徐晓燕张炜王平诸
- 盐胁迫及La^(3+)对不同耐盐性水稻根中抗氧化酶及质膜H^+-ATPase的影响被引量：35
- 2007年
- 用盐敏感的武运粳8号和强耐盐的韭菜青两个粳稻品种,比较了盐胁迫条件下根中抗氧化酶类和质膜H+-ATPase活性的变化以及La3+对其变化的影响。结果表明,两个品种根中SOD和APX活性无显著区别,但耐盐品种的CAT和POD活性强于盐敏感品种。盐胁迫不同程度地提高了两者抗氧化酶活性。La3+对其影响最显著的差异出现在高盐条件下(200~300mmolL-1NaCl),对耐盐品种添加La3+可以提高上述4种酶的活力,而对盐敏感品种,La3+的作用不明显。对盐敏感品种,盐胁迫导致其质膜H+-ATPase活性持续下降,添加La3+明显提高其H+-ATPase活性,而对耐盐品种,盐胁迫导致其质膜H+-ATPase活性呈现先降后升的趋势,La3+对其活性影响不大。进一步分析表明,上述H+-ATPase活性变化及La3+对其影响均发生在转录水平上。据此推测,以上2个品种可能具有完全不同的盐胁迫响应机制。
- 陈海燕崔香菊陈熙李建友张炜
- 关键词：水稻盐胁迫抗氧化酶质膜H^+-ATPASE
- 水稻根质膜蛋白质组双向电泳水化液的优化被引量：2
- 2007年
- 以水稻(Oryza sativa L.)苗期幼嫩根尖作为材料,利用葡聚糖-聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90%的质膜组分,使用4种不同的水化液溶解质膜蛋白,进行IEF/SDS-PAGE双向电泳和MALDI-TOF/TOF质谱分析.结果显示,4种水化液中,以7 mol/L Urea2、mol/L Thiourea、4%CHAPS、20 mmol/L DTE、1%ASB14的条件对膜蛋白的溶解效果和双向电泳分离效果最好;16个被鉴定蛋白中有9个为质膜相关蛋白,5个为未知蛋白,来自其它细胞器的蛋白仅有2个.研究表明,在常用水化液中添加磺基甘氨酸三甲内盐ASB14有利于植物细胞质膜蛋白质组的分析,并且该优化条件下的双向电泳适合分离水稻质膜中亲水性相对较高的膜附着蛋白.
- 王宁齐耀程徐朗莱张炜
- 关键词：水稻质膜双向电泳蛋白质组学去污剂
- 中度噬盐菌Bacillus sp.Ⅰ121的质膜蛋白质组学分析被引量：1
- 2010年
- 膜蛋白是连接细胞与外界环境的重要载体,发挥着物质转运、信号传导等作用。通过对一种新分离出来的中度噬盐菌Bacillussp.Ⅰ121进行了质膜蛋白质组学分析,盐胁迫下该菌株主要靠积累脯氨酸来维持细胞渗透压。在对Bacillussp.Ⅰ121在不同盐浓度下的生长情况进行测定的基础上,我们选取了1%,5%,10%,15%(w/v)NaCl4个盐浓度进行细胞培养,并分别提取细菌的质膜,通过5%～20%的梯度凝胶SDS-PAGE电泳将疏水的膜蛋白进行分离,随后对盐胁迫响应的8条不同的蛋白条带进行了ESI-LC-MS/MS质谱分析。将所得结果在NCBI数据库中进行比对,最终成功鉴定出10种蛋白。这些蛋白涉及物质跨膜转运,膜的生物合成以及胁迫信号转导等功能。为膜蛋白在盐胁迫响应过程中的作用方面的研究开辟了新思路。
- 姜炜李亮张炜
- 关键词：盐胁迫膜蛋白蛋白质组学
- 盐胁迫诱导水稻根尖细胞程序性死亡过程中线粒体蛋白质组分析(英文)
- 陈熙王莹李建友姜爱良程彦伟张炜
- 不同启动子在水稻悬浮细胞中诱导外源基因的表达被引量：1
- 2014年
- 为进一步提高外源基因在水稻悬浮细胞中的表达水平,以花椰菜花叶病毒(Ca MV)35S启动子为对照,克隆了玉米泛素蛋白启动子(Ubi)、水稻肌动蛋白启动子(Actin)以及水稻Oscc1启动子,以GFP为报告基因,通过启动子串联的方式,构建了10个植物表达载体:p CAMBIA 1304 35S-GFP、Ubi-GFP、Actin-GFP、Oscc1-GFP、35S/Ubi-GFP、35S/Actin-GFP、35S/Oscc1-GFP、Ubi/Actin-GFP、Ubi/Oscc1-GFP、Actin/Oscc1-GFP,采用根瘤农杆菌介导的方法,将表达载体导入日本晴胚性愈伤,经悬浮培养分别获得转基因的悬浮细胞系,利用荧光显微镜、酶标仪检测GFP荧光强度,用Western blot检测GFP蛋白质的表达水平。结果发现串联启动子明显强于单个启动子驱动的GFP蛋白质表达水平。在10个表达载体中,35S/Ubi、Ubi/Actin和Ubi/Oscc1是3种优化的启动子组合,其中Ubi/Oscc1串联启动子驱动GFP的表达水平最高,约为对照35S启动子的3倍。
- 陈兆骞陈熙张炜
- 关键词：水稻悬浮细胞系绿色荧光蛋白异源表达
- 水稻根尖质膜蛋白质组学研究方法的建立被引量：8
- 2008年
- 以徐稻3号水稻苗期幼嫩根尖为材料，利用葡聚糖／聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90％的质膜组分，使用优化的双向电泳水化液溶解质膜蛋白，通过等电聚焦／十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（IEF／SDS-PAGE）分离和基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱（MAI-DI—TOF／TOF）分析，鉴定了31个水稻质膜相关蛋白。结果表明IEF／SDSPAGE双向电泳适合分离亲水性相对较高的膜附着蛋白。进一步利用高盐和温和去污剂对纯化的质膜进行洗涤，以降低质膜组分的复杂程度，通过SDS-PAGE单向电泳分离和液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）分析，鉴定了8个质膜蛋白。经洗涤后的质膜组分复杂度显著降低，SDS-PAGE中的蛋白条带只包含1～2种蛋白，且主要为疏水性较强的穿膜蛋白，说明多种生物化学分离方法及不同质谱分析的综合运用，是解决生物膜蛋白质组学难点的有效途径。
- 齐耀程王宁程彦伟徐朗莱张炜
- 关键词：水稻质膜蛋白质组学
