张泷涓
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广州市医药卫生科技项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 硫化氢抑制骨肉瘤U2OS细胞的体外生长被引量：1
- 2013年
- 【目的】探讨硫化氢单独及与顺铂联用对骨肉瘤细胞生长的影响及其可能机制。【方法】分别用0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mmol/L NaHS(硫化氢载体)单独或与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,CCK-8比色法法检测细胞存活率;分别用0.4及1.0 mmol/L NaHS作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,1.0 mmol/L NaHS单独或与20 mg/L顺铂联用作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,细胞单克隆形成法检测各组单克隆数;1.0 mmol/L NaHS与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,Western-Blot法检测Bcl-2、Bax、NFκB蛋白的表达。【结果】硫化氢对U2OS细胞生长的影响:0.2、0.4、0.6、0.8 mmol/L NaHS作用U2OS细胞24 h,细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);1、2、3、4、5 mmol/L NaHS作用U2OS细胞24 h,细胞存活率分别为(90.01±7.49)%、(88.00±4.12)%、(87.26±4.05)%、(85.40±4.39)%和(82.99±4.65)%,与对照组比较,能不同程度抑制U2OS细胞的生长(P<0.05)。0.4 mmol/L NaHS组、1 mmol/L NaHS组细胞单克隆数分别为445.00±25.00、306.00±17.69,与对照组(464.33±8.32)比较,1 mmol/L NaHS组细胞单克隆数减少(P<0.01);0.4mmol/L NaHS组差异无统计学意义(P>0.05)。NaHS与顺铂联用对骨肉瘤细胞的影响:分别用0.8、1、2、3、4、5 mmol/L NaHS联合20 mg/L顺铂共同作用U2OS细胞24 h,细胞存活率分别为(54.13±4.03)%、(54.09±1.13)%、(50.37±4.56)%、(41.44±3.95)%、(40.00±4.34)%和(36.35±3.90)%,与单用顺铂组(59.76±3.15%)比较,存活率下降(P<0.05)。NaHS+顺铂组细胞单克隆数为231.00±13.52,与顺铂组(285.67±11.59)比较,细胞单克隆数下降(P<0.01);NaHS+顺铂组NFκB蛋白表达及Bcl-2/Bax蛋白表达比值较顺铂组下降。【结论】1 mmol/L浓度以上的NaHS能抑制骨肉瘤细胞的生长,0.8 mol/L浓度以上的NaHS通过减少NFκB入核,增加细胞的凋亡,从而增强顺铂对骨肉瘤细胞的抑制作用。
- 郭海华李敬春冯鉴强张泷涓雍碧城黄纲
- 关键词：硫化氢顺铂NFΚB
- 靶向沉默SPHK1基因诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡被引量：2
- 2012年
- 目的探讨用小干扰核酸(Small interfering RNA,siRNA)靶向沉默神经鞘氨酸激酶1(sphingosine kinase1,SPHK1)基因敲除后对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响。方法人工化学合成SPHK1 siRNA和对照siRNA,分别转染胃癌SGC-7901细胞。Western blot法检测SPHK1、Bcl-2和Bax蛋白的表达;流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测细胞凋亡的变化。结果 SPHK1 siRNA转染胃癌SGC-7901细胞后,SPHK1蛋白表达明显下调;与对照组相比,SPHK1 siRNA转染组Bcl-2蛋白表达下调了55%(P<0.01),Bax蛋白表达差异无统计学意义,Bcl-2/Bax比值下调54%(P<0.05);SPHK1 siRNA转染组早期凋亡细胞明显增多(P<0.01),晚期凋亡细胞无明显变化。结论 SPHK1特异性siRNA可阻断SGC-7901细胞SPHK1蛋白的表达,并通过影响Bcl-2通路诱导细胞凋亡。
- 简卫华张娈景刘龙山伍兆峰赖越元温敏杰蔡维山张泷涓夏金堂
- 关键词：小干扰RNA细胞凋亡BCL-2
- AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达被引量：1
- 2009年
- 【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK。对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子。RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61～83ku大小的特异性条带。【结论】人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功。
- 岳殿超李宝金徐辉雄张泷涓王瑛吕明德
- 关键词：AFP启动子HEPG2细胞靶向表达
- 硫化氢抑制顺铂致人骨髓间充质干细胞的损伤被引量：2
- 2011年
- 背景:在使用顺铂进行化疗时,常因造血干细胞损伤造成严重的骨髓抑制,而目前临床上还没有一种有效的化疗细胞保护剂来减轻其不良反应。目的:探讨硫化氢对顺铂致人骨髓间充质干细胞损伤的保护作用。方法:应用硫氢化钠作为硫化氢的供体,用不同浓度的硫氢化钠与顺铂同时作用于人骨髓间充质干细胞48h后,甲氮甲唑蓝法(MTT)检测细胞存活率,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白的表达。结果与结论:MTT检测发现顺铂可降低骨髓间充质干细胞的存活率,硫氢化钠可呈浓度依赖性的对抗顺铂对人骨髓间充质干细胞生长的抑制作用,0.5,1mmol/L硫氢化钠与20mg/L顺铂共同作用人骨髓间充质干细胞48h后会引起NF-κB(p65)上调和IκB-α的下调,1mmol/L硫氢化钠与20mg/L顺铂在作用6h后磷酸化蛋白激酶1/2明显上调。结果提示,硫化氢可能通过蛋白激酶-NF-κB信号通路来抑制顺铂致人骨髓间充质干细胞的损伤作用。
- 李敬春黄纲雍碧城徐名洪王姚斐张泷涓
- 关键词：人骨髓间充质干细胞硫化氢细胞保护顺铂骨髓抑制
