张帆
- 作品数：1 被引量：9H指数：1
- 供职机构：华南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 过量表达OsUgp2基因提高紫芝多糖含量被引量：9
- 2011年
- 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)是多糖生物合成过程中重要的酶,水稻基因组中存在两个UGPase同源基因分别命名为OsUgp1和OsUgp2。构建了由构巢曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子驱动OsUgp2表达的真菌过量表达载体,并通过农杆菌介导法将OsUgp2基因转入紫芝中,获得了潮霉素抗性的转化菌株。PCR和Southern杂交结果显示OsUgp2基因成功整合到受体紫芝基因组中。半定量RT-PCR检测结果显示外源基因OsUgp2在紫芝转化菌株中有表达,且在3个独立的转化菌株中的表达量各有不同;UGPase酶活性测定结果显示:转基因菌株中UGPase酶活性或比活力均较野生型对照菌株有一定的增加,且在3个独立转化菌株中的增加趋势与RT-PCR检测结果相一致。采用恒重法和苯酚-硫酸法分别测定了转化菌株和野生型对照菌株的生物量、胞内多糖和胞外多糖的含量,结果显示:转基因菌株的生物量、胞内多糖和胞外多糖含量明显增加。采用了SPSS13.0数据统计分析软件分析了UGPase酶活力与多糖含量之间的相关性,结果表明紫芝菌丝体的多糖总量、胞内多糖含量和胞外多糖含量与UGPase的酶活力都存在高度的相关性,其中胞内多糖含量与UGPase酶活力的相关系数最高达0.98,说明过量表达的OsUgp2可能主要参与胞内多糖的合成。
- 张帆钟威穆虹李刚
- 关键词：灵芝多糖
