庄文欣
- 作品数：45 被引量：139H指数：7
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省高等学校科技计划项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 血管活性肠肽对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元存活及小胶质细胞功能的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:观察血管活性肠肽(VIP)对帕金森病(PD)大鼠黑质多巴胺(DA)能神经元存活和小胶质细胞活化的影响。方法:采用脑立体定位术将6-羟多巴胺注射至纹状体,制备大鼠PD模型。将PD大鼠随机分为VIP组和模型组,VIP组大鼠腹腔注射VIP 1 ml(20 ng/ml)。另10只正常大鼠为对照组。采用免疫组织化学和RT-PCR方法观测各组大鼠黑质DA能(酪氨酸羟化酶(TH)阳性)神经元数量、小胶质细胞(CD11b阳性)的数量和形态变化以及肿瘤坏死因子(TNF-α)和环氧酶-2(COX-2)的表达及相关分子mRNA水平达变化。结果:PD大鼠损毁侧黑质TH阳性神经元数量较对照组明显减少(P<0.05),小胶质细胞(CD11b阳性细胞)数量显著增加(P<0.05),并呈"阿米巴"样改变,TNF-α和COX-2阳性细胞数量明显增加(P<0.05);VIP组大鼠与模型组相比,黑质TH阳性神经元数量明显增加(P<0.05),CD11b阳性细胞数量明显减少(P<0.05),TNF-α和COX-2的阳性细胞数量显著减少(P<0.05)。RT-PCR检测结果可见,模型组大鼠黑质TH mRNA较对照组显著降低,而VIP组TH mRNA较模型组显著升高(P<0.05),模型组CD11b mRNA、TNF-αmRNA表达明显高于对照组,而VIP组大鼠CD11b mRNA、TNF-αmRNA表达显著低于模型组。结论:VIP对6-OHDA所致PD大鼠DA能神经元具有保护作用,并且可以抑制黑质内小胶质细胞活化及相关炎性因子的表达。
- 刘宗昱庄文欣王晓晓刘金城李锋杰付文玉
- 关键词：血管活性肠肽帕金森病小胶质细胞
- 真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1的构建及鉴定
- 2014年
- 目的:构建带有增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP及目的基因Nurr1的真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1,并检测其在293T细胞中的表达。方法:采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从大鼠黑质中获取Nurrl基因,连接T载体测序正确后与真核空载体pIRES2-EGFP一起,经Nhe1和Xho1双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pIRES2-EGFP-Nurr1;真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1测序正确后采用脂质体法将其转染293T细胞,倒置荧光显微镜下观察转染效率,PCR检测Nurr1基因mRNA水平的表达情况,免疫印迹试验(Western Blot)检测Nurr1蛋白的表达水平。结果:酶切及测序鉴定证实成功构建了重组真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1;293T细胞转染pIRES2-EGFP-Nurr1后可以高度表达绿色荧光,有效转录Nurr1基因并正确的高表达Nurr1蛋白。结论:成功构建Nurr1真核表达载体且在293T细胞中高水平表达,为进一步转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),基因治疗帕金森病奠定基础。
- 王晓晓付文玉郭军堂庄文欣林志娟
- 关键词：真核表达载体
- 帕金森病大鼠中缝背核5-羟色胺、神经肽Y、P物质蛋白及mRNA的表达变化被引量：4
- 2014年
- 目的：检测帕金森病（PD）大鼠中缝背核与抑郁相关神经内分泌激素5-羟色胺（5-HT）、神经肽Y（NPY）、P物质（SP）蛋白及其mRNA的表达变化，探讨PD与抑郁的关系。方法：雄性SD大鼠单侧微量注射6-OHDA制备PD大鼠模型，将制模成功的10只雄性大鼠作为模型组，另10只正常大鼠作为对照组，采用免疫组织化学显色观察正常大鼠与PD大鼠中缝背核神经内分泌激素5-HT、NPY、SP阳性细胞的分布、形态及数量变化，采用RT-PCR方法在mRNA水平检测正常大鼠与PD大鼠中缝背核5-HT合成的限速酶-色氨酸羟化酶2（TPH2）、NPY和SP的表达变化。结果：免疫组织化学结果显示，模型组大鼠中缝背核5-HT、NPY免疫反应阳性神经元数量明显少于对照组，而模型组大鼠中缝背核SP免疫反应阳性神经元数量明显多于对照组。RT-PCR检测显示模型组大鼠中缝背核TPH2mRNA和NPYmRNA表达明显低于对照组，而模型组大鼠中缝背核SPmRNA表达明显高于对照组。结论：PD大鼠中缝背核与抑郁相关神经内分泌激素发生明显表达变化。
- 栾守婧付文玉庄文欣刘长山马璐璐王晓晓
- 关键词：帕金森病中缝背核5-羟色胺P物质
- 帕金森病大鼠黑质致密部IgG蛋白的表达变化被引量：1
- 2014年
- 目的研究帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质致密部免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)的表达变化,探讨其在PD发病中的作用。方法经单侧微量注射神经毒素6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)制备PD大鼠模型。采用免疫组化方法检测对照组大鼠双侧、模型组大鼠健侧及损毁侧黑质致密部酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元、IgG阳性细胞数目及积分光密度值(integrated option density,IOD)比值的变化。结果模型组PD大鼠损毁侧TH阳性神经元数量较健侧明显减少(P<0.01),正常组大鼠和模型组大鼠黑质致密部均有IgG阳性细胞存在,但是模型组大鼠损毁侧致密部IgG阳性细胞数量明显增加(P<0.01),染色深。结论 PD大鼠黑质致密部细胞IgG蛋白表达增加,表明IgG参与了PD的发生。
- 汪明玉刘志辉付文玉庄文欣孙杨杨同王欣刘宗昱王晓晓马璐璐
- 关键词：帕金森病酪氨酸单氧化酶免疫球蛋白G黑质
- HLA-I在乳腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2013年
- 目的研究人类白细胞抗原-I类分子(HLA-I)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测271例接受乳腺癌手术患者的乳腺癌组织中HLA-I的表达,并分析HLA-I的表达与乳腺癌临床病理特征及其预后的关系。结果 271例患者中有92例(33.9%)乳腺癌组织中HLA-I呈强阳性表达,而179例(66.1%)的HLA-I表达下调;乳腺癌组织中HLA-I的表达与腋窝淋巴结转移、TNM分期、其他淋巴结转移及血管侵犯均相关(P<0.05)。HLA-I表达阳性患者的无病生存率明显高于HLA-I表达下调者(P<0.05)。结论检测乳腺癌组织中HLA-I的表达情况,对于预测肿瘤进展情况及其预后具有重要意义。
- 李林卿庄文欣李鹏程孙学军
- 关键词：HLA-I类分子T细胞免疫抗癌活性乳腺癌
- 慢病毒介导核受体相关因子1基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病模型大鼠被引量：6
- 2015年
- 目的探讨慢病毒介导核受体相关因子1(Nurrl)基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植至帕金森病(PD)模型大鼠纹状体后对PD大鼠的治疗作用。方法采用神经毒素6-羟多巴胺(6-OHDA)纹状体注射成功制备PD大鼠模型18只,将携带绿色荧光的慢病毒GV287-Nurr1感染大鼠BMSCs,然后随机移植入6只PD模型大鼠的纹状体内(实验组),设生理盐水组(假移植组)6只及感染空慢病毒GV287的BMSCs组(对照组)6只;术后第1、2、4周观察大鼠的行为改善情况;免疫组织化学染色法检测纹状体及黑质中Nurrl和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的表达变化;RT-PCR法检测黑质Nurrl mRNA和TH mRNA的表达变化。结果慢病毒感染后的BMSCs及上清中均检测到Nurr1蛋白;对照组与实验组大鼠在移植后第1、2、4周的旋转行为较假移植组均有所改善,且实验组比对照组改善更明显;实验组纹状体Nurr1阳性细胞有效存活并沿胼胝体向皮质及对侧脑组织迁移;实验组纹状体及黑质损毁侧Nurrl和TH蛋白及mRNA的表达较假移植组和对照组明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导Nurr1基因修饰大鼠BMSCs移植治疗PD大鼠,能有效地改善PD模型大鼠的行为学症状,增加大鼠脑内纹状体和黑质区Nurr1和TH的表达。
- 王晓晓付文玉庄文欣李锋杰王倩刘金城
- 关键词：慢病毒酪氨酸羟化酶帕金森病
- 移植间充质干细胞治疗帕金森病大鼠被引量：2
- 2010年
- 目的移植骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗大鼠帕金森病(PD)。方法将BrdU标记的MSCs移植到单侧注射6-OHDA制备的PD大鼠模型损毁侧纹状体内,由阿朴吗啡诱导大鼠的旋转行为,用免疫组化和免疫荧光法检测大鼠黑质TH的表达和移植细胞的存活、迁移和分化,用1H-MRS检测大鼠双侧纹状体N-乙酰门冬氨酸(NAA)、胆碱类化合物(Cho)、肌酸(Cr)的信号强度。结果骨髓MSCs定向移植术后8周,PD大鼠的旋转行为较术前明显改善,损毁侧黑质TH阳性细胞数较术前增加;BrdU阳性细胞散在分布于移植侧脑组织内,可表达神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和微管相关蛋白2(MAP-2);PD大鼠损毁侧纹状体NAA/Cr较术前升高(P<0.05),Cho/Cr下降(P<0.05)。结论植入纹状体内骨髓MSCs能够存活并对PD模型大鼠有治疗作用。
- 付文玉郑志娟吕娥庄文欣孙西河吕翠杨丽
- 关键词：间充质干细胞骨髓帕金森病磁共振波谱
- 医学院校实验动物伦理学问题的思考被引量：14
- 2014年
- 动物实验是医学研究中必不可少的手段,因此实验动物对于医学的发展有着重要作用。随着社会的日益发展和人类的进步,实验动物伦理问题也受到人们的广泛关注,关注的焦点主要聚集在实验动物伦理问题的发展、现状、存在问题、立法状况、实施的必要性等方面,如何正确认识和对待实验动物的生命,如何科学、合理而人道地使用实验动物进行科学研究等方面。医学院校作为医学生迈入医学大门的第一步,在医学院校进行相关实验教学和研究是必不可少的,而动物实验在医学教育及研究中更是具有十分重要的意义,故针对医学院动物实验的现状及对待动物实验的看法等问题,并分析其引发的伦理学问题,从而探讨医学院医学研究中实验动物伦理学相关的问题。
- 庄文欣刘宗昱付文玉王晓晓马璐璐
- 关键词：医学院校实验动物伦理问题
- 胚胎期接触双酚A对雄鼠睾丸内PCNA和p53表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究胚胎期接触双酚A(Bisphenol A,BPA)对雄性胎鼠睾丸发育的影响及睾丸内增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)和p53表达的影响。方法母鼠怀孕后第2天对其灌服双酚A(剂量5,50,100 mg/ml/day),一直持续分娩,F1代雄性小鼠饲养至75日龄,观察BPA对仔鼠成年后睾丸结构和PCNA和p53表达的影响。结果发现BPA处理组睾丸发育受到抑制,曲细精管直径和管腔直径变小(P<0.05),管腔内出现大量胞质残余体,部分管腔出现潴留管腔液,支持细胞生长受到抑制,生精细胞排列紊乱,细胞质出现空泡化。免疫组织化学结果显示在BPA处理组,PCNA除了在精原细胞大量表达外,在初级精母细胞中表达量明显升高(P<0.05,P<0.01),免疫荧光结果显示胚胎期接触BPA导致成年后睾丸内p53蛋白表达量显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论胚胎期接触BPA对雄鼠睾丸发育有着长期的不良影响,可能源于BPA引起细胞的异常增殖和凋亡。
- 解美娜庄文欣丁保清赵惠
- 关键词：双酚A胚胎期睾丸PCNA
- 血管活性肠肽在MPTP帕金森病模型小鼠的抗氧化应激作用被引量：2
- 2017年
- 目的:研究血管活性肠肽(VIP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠发挥抗氧化应激和神经保护作用。方法:雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组和MPTP+VIP组。Elisa法检测纹状体丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的变化;免疫组织化学法观察中脑黑质纹状体系统酪氨酸羟化酶(TH)、星形胶质细胞特异性标记物胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞标志物离子钙结合蛋白(Iba-1)的表达变化;透射电子显微镜观察中脑黑质多巴胺能神经元的超微结构变化。结果:MPTP组与对照组相比,MDA水平显著增高,SOD和CAT的表达显著降低;给予VIP可显著抑制MDA的水平(P<0.01),增强SOD和CAT的表达(P<0.05)。与对照组相比,MPTP组小鼠GFAP和Iba-1的表达明显上升,TH表达明显下降;给予VIP可显著降低GFAP和Iba-1的表达(P<0.05),而TH表达明显增强。透射电镜观察显示:NS组神经细胞和细胞器结构清晰完整;MPTP组神经细胞核膜内陷,线粒体空泡样变;MPTP+VIP组神经细胞和细胞器结构基本正常。结论:VIP能够抑制MPTP诱导PD小鼠中脑黑质星形胶质细胞和小胶质细胞的活化,对抗氧化应激,发挥神经保护作用。
- 吕娥庄文欣李晓健刘飞战同霞付文玉
- 关键词：帕金森病血管活性肠肽氧化应激小鼠
