孙继国
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
- 供职机构:北京化工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程更多>>
- 大肠杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆与原核表达被引量:1
- 2012年
- 克隆出大肠杆菌编码葡萄糖脱氢酶(PQQGDH)的gcd基因,构建了诱导型表达载体pET28a-gcd,转化大肠杆菌E.coli BL21后获得阳性克隆菌株BL21/pET28a-gcd。IPTG诱导后,经SDS-PAGE分析表明,该工程菌PQQG-DH的表达量约为对照菌的18倍,约为18.2 mg/L,实现了高表达。此外,研究发现添加MgCl2能提高PQQGDH的表达量。
- 韩增叶孙继国葛喜珍田平芳
- 关键词:葡萄糖脱氢酶吡咯喹啉醌传感器
- 利用不同启动子在大肠杆菌与肺炎克协伯氏菌中合成PQQ的研究
- 吡咯喹啉醌(PQQ)是参与氧化还原反应的辅因子,作为许多酶的辅酶,如脱氢酶,氧化酶,水合酶与脱羧酶。PQQ含有能直接参与氧化还原反应的邻醌类结构,以上酶蛋白可以催化非磷酸化的底物发生氧化反应,如醇类,醛类和醛糖类。此外,...
- 孙继国
- 关键词:吡咯喹啉醌肺炎克雷伯氏菌葡萄糖脱氢酶蛋白表达
- 利用不同启动子在大肠杆菌与肺炎克雷伯氏菌中合成PQQ的研究
- 吡咯喹啉醌(PQQ)是参与氧化还原反应的辅因子,作为许多酶的辅酶,如脱氢酶,氧化酶,水合酶与脱羧酶。PQQ含有能直接参与氧化还原反应的邻醌类结构,以上酶蛋白可以催化非磷酸化的底物发生氧化反应,如醇类,醛类和醛糖类。此外,...
- 孙继国
- 关键词:吡咯喹啉醌肺炎克雷伯氏菌启动子葡萄糖脱氢酶蛋白表达
- 文献传递
- 基于重组大肠杆菌无细胞体系生产吡咯喹啉醌被引量:4
- 2014年
- 采用无细胞体系生产吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)。首先将肺炎克雷伯氏菌PQQ基因簇pqqABCDEF置于半乳糖苷酶启动子之下,构建表达载体,经转化筛选获得重组大肠杆菌。制备重组菌的细胞匀浆,体外反应后测定PQQ产量。结果显示,与活体重组菌相比,无细胞体系的PQQ产量提高约30%,表明胞内存在PQQ合成的限速反应,而无细胞体系可解除此限速反应。
- 孙继国韩增叶葛喜珍田平芳
- 关键词:大肠杆菌吡咯喹啉醌