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日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗在小鼠诱生的保护性免疫力被引量：13: 1999年; 目的：研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗免疫Ｃ５７ＢＬ／６及ＢＡＬＢ／ｃ小鼠诱生的保护性免疫力。方法：将构建的日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗（ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７）经后腿胫前肌免疫Ｃ５７ＢＬ／６及ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，共免疫３次，每次间隔３ｗｋ。末次免疫后３ｗｋ以血吸虫尾蚴攻击感染，６ｗｋ后计数成虫负荷及肝、脾、肠组织虫卵数。设不含ＳｊＣ９７编码基因的空载体质粒免疫组为对照组。结果：ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠主要诱生ＩｇＧ２ａ和ＩｇＧ２ｂ亚类，而免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠除诱生ＩｇＧ２ａ和ＩｇＧ２ｂ亚类外，还诱生ＩｇＧ１。ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱生较明显的减虫率（３５．５％～４１．１％）和减卵率（肝、脾及肠组织减卵率分别为４４．５％～５９．６％、５６．７％～８２．４％及５７．９％），而对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠未诱生保护性。结论：ｐＣＭＶ－ＳｊＣ９７核酸疫苗能对Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱生较明显保护性免疫力，而对ＢＡＬＢ／ｃ; 周生华刘述先宋光承徐裕信孙文宇; 关键词：日本血吸虫副肌球蛋白核酸疫苗保护性免疫力

肝片吸虫和猪蛔虫谷胱甘肽S转移酶免疫小鼠对日本血吸虫尾蚴攻击感染的保护力被引量：1: 2000年; [目的 ]观察天然肝片吸虫谷胱甘肽转移酶 (FhGST)和猪蛔虫谷胱甘肽转移酶 (AsGST)免疫的小鼠对日本血吸虫大陆株尾蚴攻击感染的保护力。[方法 ]从肝片吸虫和猪蛔虫中提取天然谷胱甘肽转移酶 (GST) ,免疫 3次 ,间隔时间为 14d和 7d。第 3次免疫后 5d经腹部皮肤攻击感染大陆株日本血吸虫尾蚴 30条鼠。感染6wk后用肝门静脉灌注法收集成虫 ,分别计数肝脏、脾脏和大肠组织沉积虫卵数 ,并计算减虫率和减卵率。[结果 ]3个免疫组 (FhGST、AsGST和日本血吸虫rGST)分别与佐剂对照组和空白对照组比较的减虫率分别为2 7 8%、 37 9%、 33 1%和 31 3%、 41 0 %、 36 4% (P <0 0 1)。肝脏的EPG减卵率为 13 5 %～ 17 7% (佐剂对照组 ,P <0 0 5 )和 2 3 9%～ 2 7 6 % (空白对照 ,P <0 0 1)。脾脏的EPG减卵率为 30 4%～ 5 9 6 % (P <0 0 5 ) ,大肠的为 38 7%～ 6 2 3% (P <0 0 1)。 [结论 ]FhGST和AsGST具有明显抗血吸虫感染的保护力。; 孙文宇刘述先; 关键词：日本血吸虫肝片吸虫猪蛔虫 GST

血吸虫GST疫苗分子之间及与其它寄生性蠕虫GST的交叉反应被引量：1: 1998年; 血吸虫的谷胱甘肽S-转移酶(GST)是目前公认的最有前途的抗血吸虫分子疫苗,它与许多寄生性蠕虫的GST分子间存在交叉反应。对该交叉反应的阐明有助于开拓GST应用的新思路。; 孙文宇; 关键词：血吸虫蠕虫

编码肝片吸虫GST和猪蛔虫GST基因的测序及同源性分析被引量：2: 1998年; 目的：比较肝片吸虫ＧＳＴ（ＦｈＧＳＴ）、猪蛔虫ＧＳＴ（ＡｓＧＳＴ）基因与日本血吸虫２６ＧＳＴ（Ｓｊ２６ＧＳＴ）间的同源性。方法：以盐酸胍／氯化铯梯度超速离心法提取肝片吸虫和猪蛔虫的总ＲＮＡ，合成两对特异性引物，通过反转录－ＰＣＲ将所需的编码ＧＳＴ的ｃＤＮＡ扩增出来，并将ＰＣＲ产物直接测序。应用ＤＮＡＳＩＳ软件比较ＦｈＧＳＴ、ＡｓＧＳＴ基因与Ｓｊ２６ＧＳＴ间的同源性。结果：测序得到ＦｈＧＳＴ４０３ｂｐ片段和ＡｓＧＳＴ４１１ｂｐ片段。结论：ＦｈＧＳＴ和ＡｓＧＳＴ片段与Ｓｊ２６ＧＳＴ的ｃＤ－ＮＡ在核苷酸水平上的同源性分别为５９％和５４％，两片段间的同源性为５２％。; 孙文宇刘述先; 关键词：同源性肝片吸虫猪蛔虫谷胱甘肽S

杆状病毒表达载体的构建及其在疫苗研究中的应用被引量：2: 1999年; 杆状病毒表达载体已构建成功,成为疫苗研制中的一个有利的工具。本文介绍了杆状病毒表达载体的构建及其在疫苗研究中的应用。; 孙文宇刘述先; 关键词：杆状病毒病毒寄生虫疫苗

日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗诱生免疫应答的实验研究被引量：7: 1999年; 目的初步研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白核酸疫苗在C57BL／6小鼠诱生的免疫应答特征。方法利用TRIzol方法抽提日本血吸虫大陆株成虫总RNA，并通过逆转录聚合酶链反应；扩增编码日本血吸虫大陆株副肌球蛋白（SjC97）的全基因cDNA，将其克隆入质粒表达载体（pcDNA／Amp）构建成日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗（pCMV－SjC97）；将其通过后腿胫前肌免疫C57BL／6小鼠，共免疫3次，每次间隔3周；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）分析pCMV－SjC97免疫所诱生的特异性抗体IgG及IgG亚类，以及特异性抗体IgM及IgE。并初步分析了pCMV－SjC97免疫C57BL／6小鼠脾淋巴细胞抗原特异性体外增殖能力。结果pCMV－SjC97免疫能够诱生特异性抗体IgG及IgM；pCMV－SjC97诱生的抗体滴度与注射的DNA间存在一定的量-效关系；IgG亚类分析显示，pCMV-SjC97免疫主要诱生IgG2a和IgG2b亚类，未测到IgG1及IgG3亚类。PCMV-SjC97免疫能够诱导小鼠Th细胞激活。结论pCMV-SjC97核酸疫苗能够在C57BL／6小鼠诱生较强的体液免疫应答；pCMV-SjC97免疫主要诱生Th1型细胞免疫应答。; 周生华刘述先宋光承徐裕信孙文宇; 关键词：日本血吸虫原肌球蛋白疫苗核酸疫苗

日本血吸虫(大陆株)基因工程重组抗原混合疫苗的研究被引量：1: 1998年; 3年来的主要进展为：完成了重组谷胱甘肽－S－转移酶（GST）免疫兔、牛的免疫持效观察．在国内外首先进行GST基因和K99基因共表达成功．表达产物分子量50kDa，以纤毛形成存在于细菌表面，并分别具有GST和K99抗原活性，为重组GST抗原与幼畜腹泻疫苗在血吸虫病疫区联合应用打下基础．此外，还首次证明日本血吸虫GST与肝片吸虫（Fh）、猪蛔虫（As）有明星交叉保护性免疫力，并完成FhGST和AsGST基因的克隆测序及其与日本血吸虫GST基因同源性分析，对拓宽GST抗原的应用范围及价值有重要意义．天然TPI，Tropomyosin，Paramyosin免疫小鼠试验证明有明显免疫原性后，编码上述3个候选抗原基因均已克隆测序，部分表达或正在进行全基因表达的研究．血吸虫Tropomyosin的研究进展，首次证明该抗原有较强的免疫原性，可选择作为日本血吸虫基因工程混合疫苗的候选抗原之一．; 刘述先宋光承徐裕信曹建平孙文宇缪应新张威; 关键词：日本血吸虫重组抗原疫苗基因工程

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