唐红星
- 作品数：21 被引量：61H指数：5
- 供职机构：湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 核酸探针技术用于mRNA检测的研究
- 实时获取RNA合成、转运、表达、定位的信息对分子生物学、病理生理学、药物的开发及疾病的诊断等研究都具有重要的推动作用。核酸荧光分子探针为RNA研究提供了一种强有力的工具,已为我们提供了大量有关RNA的基本信息。但是,如何...
- 唐红星
- 关键词：分子信标MRNA单碱基突变活细胞成像
- 文献传递
- 基于分子信标荧光增强速率检测活细胞内p21 mRNA表达被引量：1
- 2007年
- 根据肿瘤抑制基因p21序列设计合成分子信标,通过显微操作将其注入p21表达水平存在差异的两种鼻咽癌细胞内,以活细胞成像方式动态检测了分子信标进入鼻咽癌细胞后荧光信号的变化.p21分子信标注入两种细胞后,荧光信号均逐渐增强,约15min后达到最大值;注入细胞后4min内,细胞间荧光增强速率存在明显差异,该差异反映了p21mRNA表达水平的变化趋势,与常规逆转录PCR(RT-PCR)结果相符.在使用分子信标进行活细胞内mRNA表达水平的研究中,通过分析荧光增强速率的变化,可有效降低细胞内的酶的影响,提高检测结果的准确性.
- 唐红星羊小海王柯敏谭蔚泓刘斌何丽芳王炜
- 关键词：分子信标P21鼻咽癌细胞活细胞成像
- 分子信标用于p53 mRNA的体外定量检测被引量：9
- 2006年
- 根据p53基因的序列设计并合成了能特异性检测p53mRNA的分子信标(MB),发展了一种快速定量测定细胞内总RNA提取物中p53mRNA的方法.采用鼻咽癌(CNE2)细胞系和经RNA干扰技术降低p53基因表达的CNE2-p53RNAi细胞系,抽提总RNA并用MB检测,验证了MB的检测对象是p53mRNA.将该方法应用于多种肿瘤细胞内p53基因表达水平的分析,表达变化趋势与经典的mRNA分析方法RT-PCR检测结果相符.在此基础上,用MB对5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理的肺腺癌细胞(A549)进行了p53mRNA的体外定量检测,结果表明采用MB能够快速地获知该药物对细胞内p53mRNA表达影响的信息.
- 何丽芳唐红星王柯敏谭蔚泓刘斌孟祥贤李军王炜
- 关键词：分子信标P53RNA干扰5-氟尿嘧啶
- 分子信标荧光探针快速检测p21mRNA的新方法
- 2005年
- 1996年美国科学家首次设计并合成了一种新型荧光探针--分子信标(MB)[1],它是一种同时带有荧光基团和熄灭基团的发夹型单链DNA分子,能对目标DNA或RNA分子产生特异性的识别.由于具备了良好的检测性能,并且杂交以后无须分离多余的未杂交探针,MB在生物医学中得到了广泛的应用,如基因芯片的制备、痕量核酸的分离、活体细胞中mRNA的监测等[2].目前,检测mRNA的手段主要依靠RT-PCR,但是从反转录到PCR以及再次扩增是一个较麻烦的过程,实验成本高、周期长,也常出现假阳性和假阴性问题,影响了其准确性.
- 王炜李军王柯敏刘斌唐红星何丽芳
- 关键词：分子信标荧光探针生物医学
- 硫代修饰分子信标用于活细胞内mRNA的检测被引量：2
- 2008年
- 采用细胞成像的方式,使用硫代修饰分子信标对转染GFP基因前后活细胞内靶GFP mRNA进行了实时检测.结果表明,硫代修饰既可保持分子信标高选择性、高灵敏度以及无需对多余探针洗脱的优点,同时也可提高其抵御核酸酶降解的能力.因此,分子信标进行细胞内mRNA研究时,硫代修饰可有效消除假阳性信号的产生,提高检测结果的准确性。
- 唐红星羊小海王柯敏谭蔚泓李伟
- 关键词：分子信标细胞成像MRNA
- p33^(ING1b)对鼻咽癌细胞HNE1增殖的影响被引量：3
- 2007年
- 背景与目的:作为ING1的一种主要表达产物,p33ING1b蛋白结合和稳定p53后诱导肿瘤细胞周期阻断或引起细胞凋亡。本研究通过建立高表达p33ING1b的鼻咽癌细胞HNE1模型,探讨p33ING1b对鼻咽癌细胞增殖影响及分子作用机制。方法:利用脂质体介导转染HNE1细胞,RT-PCR法筛选p33ING1b高表达的阳性克隆,绘制生长曲线检测细胞增殖速度,免疫组化法检测细胞中p53的表达分布,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测p53、p21、Stat3、C-myc和Cyclin D1蛋白水平。结果:转染ING1后p33ING1b表达水平显著升高,HNE1细胞增殖能力受到抑制,出现G0/G1期的阻滞、S期比例下降。细胞中Stat3、C-myc和CyclinD1表达水平显著降低,p53与p21表达水平上升。结论:p33ING1b可能通过促进HNE1细胞中p53和阻断Stat3两种不同信号传导通路抑制鼻咽癌细胞的增殖。
- 刘斌王柯敏谭蔚泓唐红星羊小海
- 关键词：P33^ING1BSTAT3HNE1
- 颌面部血管瘤^(90)锶敷贴治疗疗效观察被引量：1
- 2005年
- 目的 应用90 锶敷贴器治疗婴幼儿颌面部血管瘤疗效的研究。方法 采用多次小剂量对 10 6例婴幼儿颌面部血管瘤皮肤敷贴治疗。结果 总有效率达 98.11%。结论 皮肤敷贴治疗是治疗婴幼儿颌面部血管瘤的一种理想方法 ,其操作简单、安全 ,合并症少 ,疗效满意。
- 唐红星杨竹梅程光亮孙俊杰
- 关键词：颌面部血管瘤敷贴治疗^90锶疗效观察
- p53及p21^(waf1)蛋白表达与人舌癌细胞多药耐药性的关系被引量：6
- 2006年
- 目的探讨p53及p21waf1蛋白表达与人舌癌细胞系Tca8113多药耐药性(MDR)的关系。方法采用脂质体介导的转染技术,将野生型p53(wt-p53)基因导入人舌癌耐药细胞系Tca8113/BLM;分子信标(Molecular Beacon)法检测人舌癌细胞系Tca8113及其耐药细胞系Tca8113/BLM中p53基因的mRNA水平;W estern blot检测亲本、耐药细胞和转染细胞中p53、p21waf1、P-gp和MRP蛋白的表达变化;MTT法检测不同细胞的药物敏感性,流式细胞仪检测细胞周期的改变,激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡。结果在人舌癌耐药细胞系Tca8113/BLM中p53基因的表达明显下调,并且未检测到p21waf1蛋白的表达;转染了wt-p53的耐药细胞Tca8113/BLM/p53中p53和p21waf1蛋白表达均显著上调,而P-gp和MRP的蛋白表达则明显下调,其对药物BLM的敏感性增加10.1倍(P<0.01);转染细胞的周期也发生改变,G2期细胞增加,G1和S期细胞减少,转染细胞明显出现凋亡。结论人舌癌耐药细胞系Tca8113/BLM多药耐药性的产生,可能通过p53和p21waf1的表达下调使得多药耐药性相关蛋白P-gp和MRP表达上调来实现。
- 何春梅刘斌王柯敏唐红星何丽芳李惠敏
- 关键词：舌肿瘤蛋白质P53
- 基于分子信标对肿瘤细胞ING1转录水平调控的定量检测被引量：1
- 2006年
- 利用分子信标检测技术,结合建立的ING1分子信标／cRNA杂交标准曲线,定量检测了药物处理,基因转染和p53 RNA干扰(RNAi)等对肿瘤细胞ING1 mRNA表达水平的影响．结果发现:在低表达ING1的肿瘤细胞系MCF-7中,5-FU处理和ING1基因稳定转染均能诱导细胞中ING1 mRNA表达水平升高;在ING1表达水平正常的CNE2肿瘤细胞中,利用RNAi沉默p53表达引起ING1 mRNA表达水平降低．这些细胞中ING1 mRNA表达水平在7．7×10-16-53．4×10-16mol／μg总RNA．该方法不仅能从转录水平上为基因表达调控效果提供定量依据,而且有望用于信号通路途径中多基因转录水平的相互调节研究．
- 刘斌王柯敏肖志强王炜谭蔚泓孙懿唐红星羊小海
- 关键词：分子信标ING1RT-PCR
- 小鼠腔前卵泡体外发育和体外排卵的研究被引量：5
- 2001年
- 为探明小鼠腔前卵泡体外发育及体外排卵的特征和规律性 ,为利用卵巢资源奠定基础 ,采用机械方法分离未成熟小鼠腔前卵泡进行体外培养 .以 α- MEM加亚硒酸钠、维生素 C,L-谷氨酰胺、丙酮酸钠为基础培养液 ,分组添加 10 %的 2种不同来源的血清和 1μg/ m L FSH.在多卵泡培养体系中 ,培养 9～ 10 d,每天观察其体外发育情况 ,测定卵泡和卵母细胞大小 .培养结束时 ,用 h CG进行体外诱导排卵 .结果表明 :体外培养过程中 ,腔前卵泡贴附培养皿底 ,相互聚集粘附形成团状结构 ,在细胞铺层微滴培养中 ,卵泡呈单个生长 ,并发育形成卵泡腔或腔样结构 ;经9d体外培养 ,小鼠腔前卵泡达到排卵前大小 (>40 0 μm) ,卵母细胞从开始时的 5 3.2 μm生长到 6 8.0～ 70 .8μm,总存活率为 6 1.0 % ;卵母细胞的大小及存活率在不同的血清添加组间差异不显著 ;用 h CG可诱导体外排卵 ,发生卵泡破裂 ,卵母细胞排出 ,卵丘细胞扩展 ,卵母细胞生化泡破裂 ,放出第一极体 .总排卵率达 5 9.5 % .因此 ,采用多卵泡培养体系 ,小鼠腔前卵泡能够发育至成熟排卵 .
- 袁安文薛立群向建洲唐红星王水莲
- 关键词：小鼠腔前卵泡体外发育
