唐先春
- 作品数：14 被引量：155H指数：8
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划湖北省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 应用双重PCR检测产毒素多杀性巴氏杆菌被引量：9
- 2005年
- 参照有关文献设计了2对引物,分别扩增多杀性巴氏杆菌的Kmt及toxA基因,以使同时检测并区分产毒素与非产毒素多杀性巴氏杆菌。该PCR能检出103cfu菌量的模板。特异性试验表明,这2对引物都不能从猪的其他6种常见病原菌扩出特异性的带。对扩增的2个PCR产物测序结果表明,2序列都有很高的保守性,从而进一步证明了该PCR方法的特异性及灵敏性。临床应用,从386份病料分离出66株多杀性巴氏杆菌,其中有8株均能同时扩出457bp和864bp的片段,而其他54株只能扩出457bp的片段。
- 唐先春吴斌刘国平刘建杰王大鹏陈焕春
- 关键词：产毒多杀性巴氏杆菌PCR
- 猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达被引量：8
- 2006年
- 皮肤坏死毒素(Dermonecrotictoxin,DNT)是产毒素多杀性巴氏杆菌(ToxigenicPasteurellamultocida,T+Pm)的主要毒力因子和保护性抗原。以猪源D型T+Pm的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到了编码DNT的toxA全基因编码序列,共4019bp。将其克隆到pMD18-T载体并测序,结果表明,toxA基因序列与GenBank已报道的5个toxA基因序列的同源性达99.8%以上。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-KG的GST基因下游,转化BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导表达,获得大小约173000的融合蛋白。Westernblot结果表明,该融合蛋白具有良好的反应原性。动物试验表明,该重组蛋白可以诱导小鼠产生高水平的抗体,并可抵抗致死剂量的天然DNT毒素攻击。
- 王大鹏吴斌周锐唐先春陈焕春
- 关键词：克隆
- 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立被引量：23
- 2004年
- 根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87～ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为抗原包被酶标板 ,建立了检测毒素I血清抗体的ELISA方法。临床应用表明 。
- 刘建杰何启盖陈焕春吴斌徐晓娟刘军发唐先春贝为成
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌毒素ELISA检测
- 猪多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2004年
- 设计了一对用以检测猪多杀性巴氏杆菌的引物.对临床送检的有肺炎症状或萎缩性鼻炎症状的发病猪的病料进行细菌培养,然后挑菌做PCR,同时对可疑菌落纯化培养后做生化鉴定.结果,从不同省(市)送检的病料中分离鉴定出66株多杀性巴氏杆菌,PCR检测结果与生化鉴定结果完全符合;该引物对其他6种猪的常见呼吸道病原菌扩增均为阴性;该PCR检测方法能检测出cfu为103的巴氏杆菌模板.
- 唐先春吴斌陈焕春
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCR检测生化鉴定
- 致仔猪水肿病大肠杆菌的分离、鉴定及生物学特性研究
- 1938年shanks首先报道了猪水肿病(Edema Disease Of Swine,ED)。Sojka(1965)认为仔猪在断乳后很短一段时间内发生水肿病是由某种血清型的E.coli引起的。后来,世界各地都有发病的报...
- 刘国平吴斌刘梦元何启盖唐先春郭黎明黄晓东陈焕春
- 文献传递
- 致仔猪水肿病大肠杆菌的分离、鉴定及生物学特性被引量：29
- 2005年
- 从不同省份发生水肿病的仔猪的脏器中分离到 7株细菌 ,通过菌体形态、菌落形态、革兰氏染色特性、生化特性、血清型等一系列的鉴定 ,确认为大肠埃希氏菌。动物致病性试验表明 ,该菌对小鼠有较强的致病性 ,可引起小鼠死亡。肉汤培养物无菌滤液能致死小鼠且剖检见相关脏器水肿 ,引起 Vero细胞死亡。对主要毒力基因 SL T- Ile及 F18进行扩增 ,SL T- Ile全部阳性 ,5株 F18为阳性 ,对 L T1及 ST1扩增则全为阴性。药敏试验证明 ,各菌株的耐药谱不同。各菌株攻毒于断奶仔猪 。
- 刘国平吴斌刘梦元何启盖唐先春郭黎明黄晓东陈焕春
- 关键词：脏器SLT耐药谱仔猪水肿病生物学特性致病性试验
- 猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
- 用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66株多杀性巴氏杆菌(pasteurela multocida,...
- 唐先春吴斌索绪峰王大林陈焕春尹争艳
- 关键词：多杀性巴氏杆菌产毒多杀性巴氏杆菌PCR药敏试验
- 文献传递
- 产毒多杀性巴氏杆菌研究进展被引量：15
- 2003年
- 产毒多杀性巴氏杆菌 (T+ Pm)是引起猪传染性萎缩性鼻炎的主要病原菌。对 T+ Pm的检出及高效疫苗的研制是根除猪传染性萎缩性鼻炎的关键。产毒多杀性巴氏杆菌毒素是一种皮肤坏死毒素 ,也是一种活性很强的有丝分裂原 ,单独就可引起细胞 DNA的合成及分裂。基于此毒素的特性 ,已经建立了诸如豚鼠皮肤坏死实验、小鼠致死实验、细胞促生长实验、胎牛肺细胞毒性实验、EL ISA及 PCR等方法来检测产毒多杀性巴氏杆菌。随着人们对产毒多杀性巴氏杆菌毒素活性的研究 ,猪传染性萎缩性鼻炎的疫苗也逐渐向更安全、有效的毒素疫苗发展。文章主要对 T+ Pm的检测方法。
- 唐先春吴斌陈焕春
- 关键词：产毒多杀性巴氏杆菌传染性萎缩性鼻炎疫苗毒素生物学活性
- 致仔猪水肿病大肠杆菌的分离、鉴定及生物学特性研究
- 本文对致仔猪水肿病的大肠杆菌进行了分离与鉴定,并研究了该菌的生物学特性,提出了研制有效的疫苗是防治大肠杆菌的有效措施.
- 刘国平吴斌刘梦元何启盖唐先春郭黎明黄晓东陈焕春
- 关键词：猪水肿病大肠杆菌生物学特性
- 文献传递
- 猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
- 多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种重要的病原菌,按产毒素与否,可将其分为非产毒素多杀性巴氏杆菌(Non-toxingenic Pasteurella multocida,T<->Pm...
- 唐先春
- 关键词：多杀性巴氏杆菌产毒素多杀性巴氏杆菌药敏实验毒素检测
- 文献传递
