周大炜
- 作品数:25 被引量:81H指数:6
- 供职机构:南开大学生命科学学院分子微生物学与技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生理学生物学化学工程更多>>
- 药物-蛋白结合作用的HPCE和HPLC法研究
- 该论文进行了平衡条件下测定药物-蛋白混合溶液中游离药物浓度的高效毛细管电泳和高效液相色谱分析方法研究.其目的是为新药研究和治疗药物监测中研究药物-蛋白结合作用提供简单、耐用、易操作和可行的方法.一、药物-蛋白结合作用的高...
- 周大炜
- 关键词:人血清白蛋白高效毛细管电泳蛋白结合
- 文献传递
- dTDP-L-鼠李糖生物合成路径的电喷雾多级串联质谱法表征
- 2016年
- 本研究以2’-脱氧胸苷-5’-二磷酸-L-鼠李糖(dTDP-L-Rha)生物合成路径涉及的系列酶促反应产物为研究对象,建立了电喷雾碰撞诱导解离串联质谱(CID-ESI-MSn)对罕见单糖生物合成路径的表征方法。该方法首先通过ESI-MS技术分析2’-脱氧胸苷-5’-二磷酸-D-葡萄糖-4,6-脱氢酶(RmlB)、2’-脱氧胸苷-5’-二磷酸-4-酮-6-脱氧-葡萄糖-3,5异构酶(RmlC)和2’-脱氧胸苷-5’-二磷酸-4-酮-鼠李糖还原酶(RmlD)酶活产物的形成,随后应用CID-ESI-MSn技术对酶促反应终产物L-鼠李糖(dTDP-L-Rha)的结构进行表征。结果表明:dTDP-L-Rha的生物合成始于2’-脱氧胸苷-5’-二磷酸-D-葡萄糖(dTDP-DGlc),依次涉及RmlB、RmlC和RmlD三个酶的参与。这与传统的高效液相色谱法(HPLC)监测、纯化制备,核磁共振(NMR)及ESI-MS结构表征的分析结果一致。该方法简单、灵敏、快速,适用于重要罕见单糖生物合成路径的表征。
- 许莹莹董晨影周大炜
- 普罗威登斯菌O30中dTDP-D-Qui4Nfo生物合成路径的质谱鉴定
- 随着越来越多的细菌表面多糖抗原的结构被鉴定,越来越多的罕见单糖成分被发现,表明罕见单糖在O抗原多样性的形成中占有非常重要的地位。例如L-鼠李糖对于某些细菌的毒性是必须的,该合成路径并未在人类中发现。由于含有罕见单糖的抗原...
- 周大炜刘斌韩艳芳徐艳丽齐源远吴俊丽
- 关键词:质谱鉴定
- 药物间置换相互作用的毛细管电泳迎头分析法研究被引量:3
- 2005年
- 将 18 甲基炔诺酮加到人血清白蛋白 酮洛芬平衡溶液中,室温孵育达平衡后应用毛细管电泳 迎头分析法研究了 18 甲基炔诺酮和酮洛芬在人血清白蛋白分子上的置换相互作用。一大体积样品虹吸进样至未涂层毛细管(65cm×50μmi d ,有效长度 35cm),进样时间 80s,毛细管两端高度差 11cm,工作电压 10kV,运行缓冲液为67mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7 4),游离酮洛芬浓度由前沿峰的高度直接测定。当酮洛芬样品溶液中酮洛芬的总浓度分别为 100μmol/L和 200μmol/L时,随着 18 甲基炔诺酮加入量的增加 (18 甲基炔诺酮的浓度由 0增至 200μmol/L),游离酮洛芬的浓度分别从 22 4增至 26 4μmol/L和从 82 1增至 106 2μmol/L。由上面的结果可推论:高浓度的 18 甲基炔诺酮可将酮洛芬从它的第二类结合位点上置换出来。
- 周大炜王怀锋李发美
- 关键词:人血清白蛋白
- orf7罕见单糖合成酶基因功能的毛细管电泳法鉴定
- 随着越来越多的细菌表面多糖抗原的结构被鉴定,越来越多的罕见单糖成分被发现,表明罕见单糖在O抗原多样性的形成中占有非常重要的地位。本文通过破译大肠杆菌O抗原基因簇,运用生物信息学方法预测了一种罕见单糖的合成途径,该合成途径...
- 周大炜刘斌李丹吴俊丽徐艳丽韩艳芳
- 关键词:毛细管电泳质谱分析基因功能
- 文献传递
- 盐酸丙咪嗪-人血清白蛋白结合作用的毛细管区带电泳测定法被引量:10
- 2003年
- 采用毛细管区带电泳(CZE)技术,研究了抗抑郁三环类碱性药物盐酸丙咪嗪与人血清白蛋白(HSA)的结合作用。通过经典方法(超滤法)对该方法进行了方法学确证。该法适宜于水溶性良好的碱性药物(迁移时间足够短,且与蛋白质形成的复合物较稳定) 蛋白系统中分子间相互作用的定量考察。应用SAS统计软件中非线性回归分析平台自编程序,求得了丙咪嗪与HSA的结合常数和结合位点数:K=0 18L/μmol;n=2 2。实验证明:该法可靠、简单、高效、低耗。
- 周大炜李发美
- 关键词:毛细管区带电泳人血清白蛋白抗抑郁药物药物动力学
- 药物-蛋白结合作用的分析方法研究被引量:33
- 2004年
- 综述了定性和定量研究药物 蛋白结合作用的部分方法,包括色谱、毛细管电泳、核磁共振光谱、质谱等方法及一些传统方法如平衡透析、超滤等方法,并讨论了各自的优点和局限性。
- 周大炜李乐道李发美
- 关键词:分析方法色谱毛细管电泳核磁共振光谱质谱药理学
- 糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测被引量:2
- 2011年
- 以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的糖基转移酶监测方法。该方法首先直接用质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速检测。研究结果表明,CID MALDI-TOF MS平台适用于新建克隆的糖基转移酶酶活反应的监测,与现有的高通量方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势。
- 周大炜刘斌吴俊丽胡波齐源远
- 关键词:脂寡糖糖基转移酶
- 富烯与有机锂反应研究----大取代茂过渡金属化合物的合成及催化研究
- 周大炜
- 微生物代谢组学的样品前处理被引量:9
- 2008年
- 微生物代谢组学是指全面分析(定性和定量)细胞生长或生产周期某一时刻细胞内和细胞周围的所有低分子量代谢物。微生物代谢组学研究需要可靠和重现地分析细胞内较宽动力学浓度范围(nmol^mmol)、化学功能各异的代谢产物,因此,需要对从生物量培养、灭活和代谢产物的提取到代谢物的定量分析这整个实验过程提出耐用、可重现和可靠的实验方案。本文介绍了灭活过程中细胞内代谢产物泄漏的处理方法,较为详细地论述了通过灭活草案捕获代谢反应活性方法和代谢物提取方法的优化,并对微生物代谢组学样品前处理的目前发展趋势提出初步见解。
- 周大炜朱之燕
- 关键词:微生物代谢组学灭活