叶逢春
- 作品数：22 被引量：20H指数：3
- 供职机构：清华大学化学工程系生物化工研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 融合肝素酶及其编码基因
- 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性...
- 邢新会叶逢春张翀蒋培霞
- 文献传递
- 用于培养微生物表达肝素酶的培养基
- 本发明公开了一种用于培养微生物表达肝素酶的培养基。该培养基，是含有5－20g/L酵母提取物，0.5－20g/L葡萄糖，0.05mM－5.0mM钙离子的培养基。所述培养基中还含有10.0－25.0g/L Na<Sub>2<...
- 邢新会叶逢春陈银
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- 肝素黄杆菌肝素酶Ⅲ基因hepC的可溶表达体系构建及酶学性质研究被引量：2
- 2013年
- 肝素酶III(HepC)是肝素结构分析及酶法制备低分子量肝素的重要生物催化剂。为实现HepC在大肠杆菌中的可溶表达,通过PCR方法从肝素黄杆菌(Flavobacterium heparinum)的基因组中扩增得到HepC基因,采用融合蛋白方法构建了麦芽糖结合蛋白(MBP)与HepC融合的表达载体和体系,并在低温(15℃)下诱导重组大肠杆菌,显著提高了MBP-HepC重组表达的可溶性。通过摇瓶培养发酵液的HepC比酶活达到46.41 IU/mg,超过目前报道的最高水平。通过MBP与直链淀粉的亲和吸附实现了MBP-HepC的亲和分离和纯化,一步亲和纯化后蛋白的纯度即可达95%以上。该融合酶基本特性研究表明,融合肝素酶III(MBP-HepC)的最适作用pH7.3,最适作用温度为42℃-48℃。热稳定性较好,其30℃时的稳定性高于融合肝素酶I(MBP-HepA)。
- 李晔吴敬君叶逢春苏楠张翀邢新会
- 关键词：麦芽糖结合蛋白纯化酶学性质
- 多功能融合肝素酶的设计及其制备低分子量肝素工艺
- 肝素是重要的抗凝和抗栓药物,但大量使用会引起出血和诱导血小板减少等副作用,大大限制其在临床上应用。低分子量肝素(LMWH)是肝素理想替代品,其酶法制备工艺是一个理想的清洁酶工程技术应用体系,但由于肝素酶生产效率低、具有酶...
- 叶逢春
- 关键词：肝素酶低分子量肝素融合蛋白连接肽
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- 融合肝素酶及其编码基因
- 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8－1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性...
- 邢新会叶逢春张翀蒋培霞
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- 重组大肠杆菌生产肝素酶的培养基优化及酶活快速监测新方法研究
- 肝素酶Ⅰ是降解大分子肝素制备低分子量肝素(Low molecular weight heparin，LMWH)的重要生物催化剂。本研究采用大肠杆菌重组表达肝素酶Ⅰ的策略，成功地构建了由肝素酶Ⅰ（hepA）和麦芽糖结合蛋白...
- 叶逢春陈银况莹邢新会
- 关键词：麦芽糖结合蛋白可溶表达酶工程重组大肠杆菌
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- 一种融合肝素酶及其编码基因
- 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性...
- 邢新会叶逢春张翀蒋培霞
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- 一种制备低分子量肝素的方法
- 本发明公开了一种制备低分子量肝素的方法。该方法，是以肝素为底物，用麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白降解肝素，得到低分子量肝素；所述麦芽糖结合蛋白-肝素酶I融合蛋白，是具有序列表中的SEQ ID №：1的氨基酸残基序列的蛋...
- 邢新会叶逢春陈银
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- 一种表达肝素酶的方法及其专用表达载体
- 本发明公开了一种表达肝素酶的方法及其专用表达载体。本发明所提供的肝素酶表达载体，是在多克隆位点插入有由肝素酶和绿色荧光蛋白构成的融合蛋白的编码基因的原核细胞表达载体。本发明的肝素酶表达载体能够可溶表达和正确折叠，防止包涵...
- 邢新会陈银况莹叶逢春罗明芳
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- 肝素酶研究进展被引量：9
- 2007年
- 微生物肝素酶是一类作用于肝素和类肝素的多糖裂解酶,在低分子肝素的制备以及肝素类分子的结构解析等领域具有十分重要的应用前景。结合微生物基因组测序的最新进展,综述微生物肝素酶的来源,并对肝素酶的作用机理加以讨论;结合实验室研究对肝素酶的重组表达及其在低分子肝素生产应用的最新进展进行综述,并对肝素酶其它潜在的应用进行了讨论。
- 陈银叶逢春况莹邢新会
- 关键词：肝素酶肝素纯化
