史忠诚
- 作品数：20 被引量：46H指数：4
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- p16基因在肺癌中表达的研究
- 1999年
- 王柏秋高慧傅松滨李钰薛雅丽刘岸史忠诚张贵寅李璞
- 关键词：肺癌P16基因基因表达
- Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4与肿瘤被引量：4
- 2005年
- Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)为Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶中的新成员,经蛋白结构分析及实验研究推测其与肿瘤及肿瘤转移关系密切,本文就TMPRSS4的结构与功能做一综述。
- 史忠诚李钰张贵寅
- 关键词：肿瘤丝氨酸蛋白酶肿瘤转移跨膜
- 构建Neuregulin1克隆载体的实验
- 2005年
- 目的:Schwann细胞具有促进神经元再生的作用,Neuregulin1(NRG1)具有促进神经元再生和Schwann细胞增殖的效应,构建NRG1克隆载体,可为下一步建立NRG1转染的Schwann细胞系,对神经损伤模型进行Schwann细胞移植,观察其对神经损伤的修复作用提供重要实验方法。方法:实验于2003-09/2004-01在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。提取幼龄大鼠脑RNA,反转录聚合酶链反应,用XbaⅠ和EcoRⅠ对目的基因和载体质粒进行双酶切,T4连接酶连接Schwann后转化Top10感受态大肠杆菌,挑取LB(Amp+)平板生长克隆菌摇菌扩增,用菌液扩增聚合酶链反应检测目的基因,同时提取质粒与空载体并列电泳验证克隆质粒,进行克隆载体测序。结果:获得一株NRG1克隆质粒,测序结果显示为NRG1新的异构体,用基因组DNA和cDNA为模板扩增聚合酶链反应验证是NRG1新的剪切体。结论:构建的NRG1克隆异构体是大鼠NRG1基因克隆载体,可用于进一步的细胞转染、蛋白表达功能检测和细胞移植研究。
- 张际绯金连弘傅松滨史忠诚于旸
- 关键词：克隆载体SCHWANN细胞反转录聚合酶链反应聚合酶链反应检测神经元再生幼龄大鼠
- rab5a基因在肿瘤转移中的作用研究被引量：6
- 2005年
- 为研究rab5a基因在肿瘤转移机制中的作用,将该基因稳定转染至低转移肺腺癌细胞系AGZY83-a中,采用Superarray肿瘤转移相关基因微芯片分析rab5a对肿瘤转移相关基因的表达影响。共获得了5个差异表达基因,rab5a基因促进s100a4的表达,同时抑制了nm23ar、ac1、cst3、col4a2等基因的表达,并分别在RNA及蛋白水平进行验证,确认rab5a基因影响了肿瘤转移的多个途径,促进了肿瘤细胞转移能力增强。
- 史忠诚于旸李钰傅松滨
- 关键词：RAB5A基因肿瘤转移微芯片
- RAB5A基因对肺腺癌细胞微丝的影响(英文)被引量：4
- 2005年
- 为研究RAB5A基因对肺腺癌细胞中微丝的影响,通过FITC标记的鬼笔环肽对AGZY83a细胞骨架中的微丝特异染色,利用共聚焦激光扫描显微镜发现RAB5A过表达后微丝束变密。经Superarray肿瘤转移相关基因微芯片分析RAB5A对肿瘤转移相关基因的表达影响,发现了3个与细胞骨架调节相关基因表达发生变化,NM23H1与Rac1的表达受到抑制,同时S100A4的表达增加。以前有研究认为S100A4基因可抑制NM23H1基因表达,为验证NM23H1基因的表达降低是否由于S100A4表达增高所致,利用RNAi沉默AGZY83a细胞中S100A4基因的表达,发现NM23H1基因表达增高,由此推断RAB5A基因可能通过上调S100A4基因表达来抑制NM23H1基因表达。
- 史忠诚于旸李钰傅松滨
- 关键词：RAB5A基因微丝共聚焦激光扫描显微镜微芯片RNA干扰
- 重组P16蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其功能研究
- 2007年
- 目的在原核细胞中表达P16蛋白并纯化，研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响。方法构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16。IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白，通过亲和层析柱纯化目的蛋白，经Western-blot鉴定后，将P16蛋白转导入人肺腺癌细胞系A549中，利用免疫细胞化学方法对蛋白进行细胞内定位，同时绘制细胞生长曲线，并用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果所构建P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16，可在大肠杆菌中稳定表达，通过纯化获得P16融合蛋白。利用lipofectamine^TM2000转染试剂可将P16蛋白转入A549细胞中，生长曲线与流式细胞术结果显示P16蛋白可抑制肿瘤细胞增殖。结论原核细胞表达的P16蛋白经纯化，转导进入A549细胞，可影响其生长周期，抑制A549细胞的增殖。
- 江晖白静史忠诚傅松滨
- 关键词：P16融合蛋白细胞周期
- 血清饥饿法用于细胞周期同步化的方法学研究被引量：14
- 2003年
- 目的 探讨血清饥饿法进行细胞周期同步化实验的影响因素。方法 用无血清和低血清浓度培养基饥饿 Anip973和 AGZY83 -a两种人肺腺癌细胞系 ,分别在培养 48h、72 h和 5d时收集各组细胞 ,用流式细胞分析仪分析细胞周期各时相细胞百分数。结果 Anip973细胞系在含 0 .2 % FBS的 RPMI 1640培养基中培养 5d得到理想结果 ,G0 -G1期细胞百分比高达 84.19%。 AGZY83 -a在含 0 .2 % FBS的 RPMI 1640培养基中培养 48h也获得较满意的结果 ,G0 -G1期细胞百分比达 61.3 0 %。结论 细胞类型、血清浓度和饥饿时间是血清饥饿法进行细胞周期同步化实验成功与否的影响因素。可应用血清饥饿法使不同细胞系同步于 G0
- 宋春娇吕冰洁张小玲史忠诚傅松滨李璞李钰
- 关键词：血清饥饿法细胞周期流式细胞分析仪
- RAB5A蛋白G81R位点突变对其功能的影响被引量：4
- 2003年
- 为探讨G81R位点突变对RAB5A蛋白功能的影响 ,将RAB5AG81R突变体和正常RAB5A反义RNA分别插入pcDNA3 1 V5 His TOPO真核表达载体 ,并转染到Anip973细胞。用Westernblot方法检测稳定转染后细胞RAB5A蛋白的表达水平 ,通过血清饥饿法使Anip973和转染后的细胞同步化 ,停滞于G0 ～G1 期 ,再恢复血清培养使细胞从G0 ～G1 期释放 ,用流式细胞分析仪分析细胞周期各时相细胞百分比。结果显示RAB5AG81R突变体的反义RNA可完全封闭Anip973细胞中RAB5A的表达 ,正常RAB5A反义RNA部分封闭RAB5A表达。并且 ,Anip973细胞周期的长短与RAB5A的表达程度成反比。RAB5AG81R反义RNA能够有效地阻断Anip973细胞中RAB5A蛋白的表达。
- 宋春娇吕冰洁史忠诚于旸李钰李璞
- 关键词：反义RNARAB5A突变
- 人RNF181基因表达的降低可以抑制人肺癌细胞系A549的增殖
- 目的：探讨E3-泛素蛋白连接酶RNF181在肺癌中的作用。方法：利用RT-PCR在12个非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中对hRNF181基因的转录水平进行检测；采用RNAi技术，建立RNF181稳定knock-down...
- 于旸史忠诚杜玉荣刘珊珊刘芳莉傅松滨
- 关键词：非小细胞肺癌组织特异性细胞增殖
- 医学院校教师教学质量监控与评价的研究与实践被引量：4
- 2007年
- 哈尔滨医科大学遗传学教研室在几十年的教学过程中建立了各项制度：教学组织保障制度、“一帮一”师资培养制度、教学试讲制度、集体备课制度、听课制度和教学质量的评价制度等,以对教学质量的提高过程实施监控。在综合教学评价过程中与学校教学督导委员会的工作紧密配合,对每位教师的教学过程进行综合的教学评价。配合学校教务处、人事处等将教师在综合教学评价的结果,与评选优秀教师、提职、晋级和聘任等挂钩。严密的组织制度的保障和监控,综合的教学评价,全面提高了教师的教学质量。
- 陈白滨陈峰白静史忠诚傅松滨
- 关键词：医学院校教学质量
