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IL-10在人骨髓间充质干细胞移植治疗食蟹猴脑缺血中的作用被引量：4: 2009年; 目的探讨食蟹猴脑缺血模型在人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stemcells,hBMSCs)移植后IL-10的表达及其对脑缺血损伤的保护作用。方法食蟹猴8只,在脑定位仪定位下,应用光化学法构建食蟹猴脑缺血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型组,分别在脑缺血部位附近注射高、低密度的hBMSCs和生理盐水。手术后,通过影像学、神经功能评分及组织病理学观察对hBMSC的治疗效果进行评价。并应用原位细胞凋亡检测的方法观察脑缺血周围神经细胞的凋亡情况。应用免疫组织化学、RT-PCR以及real-time PCR法检测检测脑损伤周围IL-10的表达水平。结果与模型组相比,hBMSC治疗组损伤部位周围细胞凋亡明显减少,免疫组织化学显示IL-10阳性细胞的数量及染色强度均较模型组明显升高,IL-10在mRNA水平表达也明显升高。结论hBMSCs对食蟹猴脑缺血模型具有修复作用,其治疗机制可能与促进炎症抑制因子IL-10的表达有关。; 李加美朱华刘颖李秦徐艳峰黄澜马春梅冯铭卢姗安沂华赵春华王任直秦川; 关键词：人骨髓间充质干细胞脑缺血食蟹猴 IL-10

Ferumoxide标记Flk1^+CD31^-CD34^-人骨髓间充质干细胞及其在食蟹猴脑内移植示踪观察被引量：1: 2008年; 目的探讨Ferumoxide-PLL标记Flk1+CD31-CD34-人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的方法及其在食蟹猴脑实质内移植活体示踪的可行性。方法采用Ferumoxide-PLL标记hBMSC,台盼蓝染色、普鲁士蓝染色和透射电镜扫描鉴定标记效率及细胞活力。体外磁共振成像(MRI)分别扫描标记和未标记细胞,计算T2*的弛豫时间和弛豫率(R2*)变化。通过立体定向手术将标记的hBMSC移植入食蟹猴右侧基底节区,采用MRI扫描活体示踪细胞。采用免疫组织化学、普鲁士蓝和HE染色对脑组织切片进行干细胞存活、分化及病理学研究。结果Ferumoxide-PLL标记hBMSC效率为96%,普鲁士蓝染色、电镜可显示标记hBMSC细胞质内铁颗粒。1×106和5×105两组Ferumoxide-PLL标记细胞的T2*的弛豫时间分别为68.86和79.88ms,而未标记细胞分别为12.71和15.24ms。标记细胞的R2*分别为78.68和65.61/s,分别是未标记细胞(14.52和12.52/s)的5.4和5.2倍。移植后3周MRI扫描T2WI仍可发现hBMSC呈明显的低信号。病理及免疫荧光结果显示hBMSCs在移植区大量存活,移植区有大量新生血管,但未见hBMSC向神经细胞分化。结论Ferumoxide-PLL可高效标记hBMSC,能显著增加其MRI图像对比度。MRI可活体示踪干细胞。移植入食蟹猴脑内的hBMSC可大量存活并促进新生血管形成。; 冯铭王任直朱华张楠王常郡魏俊吉卢姗李秦尹晓明韩钦马文斌秦川赵春华安沂华孔燕国; 关键词：超顺磁性氧化铁食蟹猴

一种用于人成体原始间充质干细胞体外规模化培养的培养基、方法及获得的原始间充质干细胞及其应用: 本发明涉及一种体外规模化生产制备人成体组织(骨髓)来源的原始间充质干细胞(pMSCs，细胞标记为Flk1、Nanog阳性)的方法及其制备产品，以及这种方法和制备产品在抑制肿瘤细胞增殖中的应用。通过简化磁珠分选工艺、将牛血...; 赵春华韩钦李静孙昭胡建立朱雅姝卢姗边春景; 文献传递

人脂肪源性间充质干细胞向内耳毛细胞定向诱导分化的实验研究被引量：9: 2009年; 目的验证在体外将人脂肪源性问充质干细胞（human adipose—derived mesenchymal stem cells，hAD-MSC）定向分化为内耳毛细胞的可行性。方法用特定的培养体系配合多种细胞因子定向诱导hAD—MSC向神经干／祖细胞样细胞分化，而后进一步将诱导后细胞与发育期鸡胚听泡细胞在体外进行共培养，以促使其向内耳毛细胞分化，通过免疫组化等方法对分化不同阶段的细胞特异性指标进行鉴定。结果hAD—MSC诱导后呈现神经干／祖细胞样的形态并表达其特异性标志，与发育期鸡胚听泡细胞共培养后表达内耳毛细胞特异性标志。结论hAD—MSC在体外可定向诱导分化为具有内耳毛细胞特异性标志的毛细胞样细胞。; 袁先道闫曦杨华高志强李康华韩钦卢姗陈晓巍姜鸿赵春华; 关键词：间质干细胞内耳毛细胞

人脂肪来源间充质干细胞植入受损耳蜗后定向归巢并分化为毛细胞样细胞被引量：1: 2010年; 目的:通过将人脂肪来源间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hAD-MSCs)移植到受损小鼠,探讨hAD-MSCs替代缺失/受损毛细胞的可行性。方法:将hAD-MSCs经尾静脉移植入药物致聋后的小鼠体内,用免疫染色及RT-PCR等方法检测移植后hAD-MSCs在耳蜗内的归巢和分化。结果:移植的hAD-MSCs能够定向归巢到受损耳蜗内,并至少存活2周,未观察到对移植细胞的免疫排斥反应。有少量细胞定位于耳蜗感觉上皮并表达毛细胞特异性抗体myosin 7a。结论:hAD-MSCs移植入药物性致聋小鼠后,能够定向归巢到耳蜗内,并分化为内耳毛细胞样细胞,是一种针对内耳损伤及退变性疾病治疗的潜在细胞来源。; 袁先道闫曦杨华高志强李康华韩钦卢姗陈晓巍亓放姜鸿赵春华; 关键词：耳蜗间充质干细胞耳聋异种移植

一种用于人成体原始间充质干细胞体外规模化培养的培养基、方法及获得的原始间充质干细胞及其应用: 本发明涉及一种体外规模化生产制备人成体组织(骨髓)来源的原始间充质干细胞(pMSCs，细胞标记为Flk1、Nanog阳性)的方法及其制备产品，以及这种方法和制备产品在抑制肿瘤细胞增殖中的应用。通过简化磁珠分选工艺、将牛血...; 赵春华韩钦李静孙昭胡建立朱雅姝卢姗边春景

超顺磁性氧化铁标记人Flk-1^+CD31^-CD34^-间充质干细胞对细胞增殖及向神经细胞分化的影响被引量：1: 2008年; 目的探讨磁共振增强剂超顺磁性氧化铁(SPIO)标记人Flk-1+CD31-CD34-间充质干细胞(hMSCs)对细胞增殖及向神经细胞分化的影响。方法实验组hMSCs与含SPIO50mg/L及多聚赖氨酸(PLL)1.5mg/L的培养基孵育过夜(12~18h)。通过生长曲线测定、台盼蓝染色及流式细胞仪检测评价SPIO对hMSCs增殖能力、细胞活性及细胞表面标志物的影响。经神经诱导后,通过免疫荧光法测定神经细胞特异性标志物的表达。结果连续测定7d细胞活性,活细胞率均超过90%,对照组及实验组生长曲线符合对数生长模式。两组细胞均表达CD44、CD105及Flk-1,而CD31、CD34为阴性。神经诱导后,神经特异性标志物的荧光A值在两组间无统计学差异。结论SPIO作为磁共振活体示踪剂是安全、有效的。; 王常珺卢姗冯铭韩钦魏俊吉王任直赵春华; 关键词：超顺磁性氧化铁间充质干细胞

食蟹猴脑出血骨髓间充质干细胞移植活体示踪观察被引量：2: 2008年; 目的将超顺磁性氧化铁(superparamagnetic Iron Oxide,SPIO)标记人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSC)并植入脑出血食蟹猴脑内,利用MRI技术活体示踪移植的hBMSC。方法将自体股动脉血注入食蟹猴右侧基底节区,制备脑出血模型。收集志愿者骨髓,分离培养hBMSC至第3代。脑出血模型制备后第7天,将5×106个SPIO标记的hBMSC通过立体定向手术移植入血肿对侧基底节区。移植后1d、2周、4周、6周、8周采用MRI检查示踪hBMSC。食蟹猴处死后脑组织切片行苏木精-伊红及普鲁士蓝染色。结果SPIO标记hBMSC的效率大于96%,经SPIO标记的hBMSC移植后T2加权像可发现移植区呈明显的低信号区。苏木精-伊红、普鲁士蓝染色可发现移植细胞及新生血管分布于移植区周围,与MRI信号减低区一致。结论SPIO可有效地标记hBMSC,MRI可以活体示踪食蟹猴脑出血脑内移植的经SPIO标记的hBMSC。部分hBMSC可分化为血管,并促进宿主新生血管的形成。; 冯铭朱华张楠卢姗尹晓明魏俊吉李秦韩钦李桂林窦万臣张子衡李照建马文斌孔燕国安沂华赵春华秦川王任直; 关键词：间质干细胞移植脑出血超顺磁性氧化铁

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