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猪细小病毒1~7型全基因组遗传变异: 2024年; 猪细小病毒1型(porcine parvovirus type 1,PPV1)是母猪繁殖失败的主要病原体,即通常所称的猪细小病毒。2001—2016年,在猪体相继鉴定出了6种新型猪细小病毒,分别被命名为猪细小病毒2~7型(PPV2~PPV7型)。为确定中国江苏地区PPV1~PPV7型感染情况和遗传变异特征,采用PPV1~PPV7型常规PCR检测方法,从江苏地区猪场收集到2株PPV1、2株PPV2,以及PPV3、PPV4、PPV5、PPV6、PPV7各1株阳性组织病料,对这9株阳性组织病料进行全基因组测序,采用生物信息分析软件与GenBank中PPV1~PPV7型参考毒株进行比较,系统分析全基因组和衣壳蛋白2(VP2)的遗传进化分子特征。结果表明,PPV1~PPV7型测序毒株与GenBank中同型毒株全基因组同源性均高于97%,而不同型基因组间同源性均小于60.40%。PPV1~PPV7型测序毒株的VP2氨基酸序列与同型毒株同源性均高于97%,但不同型毒株之间差异巨大,PPV4与PPV5有55%同源性,其他毒株之间同源性更低,仅为9%~17%。毒力分析结果表明,2株PPV1流行株与PPV1强毒株Kresse存在相似的毒力位点,且存在5处特有的突变,可能为高毒力毒株。研究结果有助于更好地了解中国猪群中PPV1~PPV7型分子流行病学并制定科学的防治措施。; 华涛常晨常晨张道华唐波; 关键词：猪细小病毒 PCR检测基因组毒力分析

猪细小病毒在ST细胞中增殖规律的动态分析被引量：2: 2015年; 将猪细小病毒接种于ST细胞,于不同时间点收获病毒测定其病毒滴度与病毒拷贝数,以此分析该病毒在ST细胞上的增殖规律。细胞于感染后48 h开始出现细胞病变,84 h细胞出现脱落和崩解。TCID50结果显示,病毒感染后18 h即能检出病毒滴度,随后逐渐升高至72 h达到峰值(107.2/m L),其后逐渐下降。通过SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法测定不同时间病毒体外感染细胞后的复制动态水平,病毒含量的增长于108 h达到峰值随后逐渐下降。通过对PPV在ST细胞中的体外复制动态分析结果表明感染后96~108 h为最佳收毒时间,这为利用细胞增殖病毒生产疫苗提供重要参考。; 唐波张道华张雪花常晨刘国阳王永帅唐应华华涛侯继波; 关键词：猪细小病毒 ST细胞病毒复制

通用型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗抗原表达和免疫效力研究被引量：7: 2019年; H5亚型高致病性禽流感病毒因其变异快、感染性和致病性强等特点严重威胁着家禽业和人类健康。为研制具有广谱保护性的H5亚型禽流感病毒通用型亚单位疫苗,本研究分析和对比各分支H5亚型禽流感病毒的HA蛋白基因,获得HA蛋白基因共有序列,采用杆状病毒表达系统构建和表达重组HA蛋白。经IFA、Western Blot、微量血凝试验等方法鉴定重组HA蛋白,结果显示重组HA蛋白在昆虫细胞中得到正确表达,血凝效价达13log2,且与禽流感Re6、Re7和Re8阳性血清均具有较好的交叉反应活性。免疫效力试验结果显示,重组HA蛋白疫苗组血清抗体能与H5亚型禽流感病毒Re6、Re7和Re8检测抗原反应,且能诱导机体产生较高水平IFN-γ和IL-4。该研究结果可为H5亚型禽流感通用型亚单位疫苗研发提供试验基础和科学依据。; 张雪花陆吉虎陆吉虎卢宇华涛梅梅; 关键词：H5亚型禽流感病毒免疫效力

用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用: 本发明提供用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用，属于生物技术领域。用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物，活性成分为甲基-β-环糊精和吐温-80。本发明还提供制备猪圆环病毒2型病毒液的方法，宿主细胞在接种猪圆环...; 华涛侯继波张雪花冯磊陈丽吴培培张道华唐波

一种通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗及其制备方法: 本发明提供一种通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗及其制备方法，属于基因工程领域。该通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗中抗原为氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的蛋白。本发明通用型H5亚型禽流感亚单位疫苗具有广谱性，能与H5亚...; 梅梅陆吉虎张雪花冯磊华涛卢宇侯继波; 文献传递

一株猪源乙型脑炎病毒的分离及鉴定: 从江苏某发病猪场采集的母猪流产胎儿脑组织样本中成功分离到一株猪源乙型脑炎病毒毒株，并对该毒株的相关生物学特性进行了鉴定。利用BHK-21细胞传代和脑内接种小鼠方法，对疑似阳性病料做病毒分离。; 唐波张道华张雪花常晨刘国阳唐应华华涛侯继波; 关键词：生物特性

猪伪狂犬病毒Real-time PCR检测方法的建立和弱毒疫苗病毒含量的检测被引量：7: 2019年; 根据伪狂犬病毒的gB基因设计引物,将含gB基因的质粒作为标准品,绘制标准曲线,建立了伪狂犬病毒PRV的荧光定量PCR检测方法。该检测方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,不与PCV2、PPV、CSFV、JEV和PRRSV发生反应。用该方法对不同滴度病毒液的基因拷贝数进行检测,发现病毒滴度和病毒拷贝数之间存在较好的相关性。采用该方法对7种商品化PRV弱毒疫苗进行病毒含量检测,结果显示不同商品化弱毒疫苗的病毒含量存在显著差异,与说明书标注的病毒含量基本一致。; 华涛唐波唐波常晨刘国阳常晨侯继波刘国阳; 关键词：猪伪狂犬病毒 GB基因病毒滴度基因拷贝数

猪圆环病毒2型与猪细小病毒混合感染对仔猪致病性的研究被引量：4: 2019年; 对35日龄健康仔猪进行人工单独或混合感染猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2),采用临床症状、组织病理学变化和血清学检测等手段,比较了不同实验组攻毒后仔猪的症状差异。实验结果显示:PPV和PCV2混合感染能够引起更加严重的断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)症状,并加重PCV2引起的间质性肺炎和仔猪消瘦的严重程度;混合感染后,仔猪病毒血症出现更早,持续时间更长,且病毒含量明显高于单独感染组;混合感染组仔猪的PCV2 ELISA抗体水平和血清抗体水平均显著高于PCV2单独感染组的。说明PPV能够明显增强PCV2的临床症状,加重PMWS的发病程度。; 刘国阳唐波唐波华涛常晨张道华; 关键词：猪圆环病毒猪细小病毒

用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用: 本发明提供用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用，属于生物技术领域。用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物，活性成分为甲基‑β‑环糊精和吐温‑80。本发明还提供制备猪圆环病毒2型病毒液的方法，宿主细胞在接种猪圆环...; 华涛侯继波张雪花冯磊陈丽吴培培张道华唐波; 文献传递

提高猪圆环病毒2型产量的方法比较: 2015年; 为了获得较高的病毒滴度,降低疫苗成本,选用4种刺激剂:二磷酸氯喹(CQ)、刀豆素(Con A)、D-氨基葡萄糖(D-G)和β-甲基-环糊精(MβCD),采用单独刺激和联合刺激感染PCV2的PK-15细胞,研究PCV2增殖情况。结果显示,MβCD和D-G单独作用均能显著促进PCV2的感染和复制,且效果优于另外2种单独作用;采用3 mmol/L D-氨基葡萄糖和2.5 mmol/L MβCD联合作用方法,在病毒5次传代期间病毒滴度显著高于单独作用组,最高滴度达到107.3TCID50/m L,该法有助于提高PCV2复制效率,提高疫苗的产量。; 华涛张雪花唐波常晨刘国阳冯磊吴培培张道华侯继波; 关键词：PCV2 病毒滴度 D-氨基葡萄糖

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华涛

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