刘玉瑛 作品数:5 被引量:13 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素基因工程重点实验室 更多>> 发文基金: 基础研究重大项目前期研究专项 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
通过阻断负调控基因提高格尔德霉素发酵产量的方法 本发明涉及利用分子生物学操作技术、通过阻断生物合成调控基因提高抗生素产量的方法,具体来讲,就是在获得gdm RII基因的基础上,构建gdm RII基因阻断重组载体,筛选获得gfm RII基因阻断变株,再进行gdm RII... 王以光 赫卫清 刘玉瑛文献传递 格尔德霉素生物合成的调控基因 被引量:4 2008年 从吸水链霉菌17997中克隆了格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)生物合成酶基因簇,通过生物信息学分析发现两个LAL(Large ATP-bindingregulators of the LuxR family)家族的调控基因gdmRI和gdmRII,基因阻断和基因回复实验证实这两个基因产物都正调控Gdm的生物合成。 赫卫清 雷健 刘玉瑛 王以光关键词:调控基因 基因阻断 反相高效液相谱型分析检测吸水链霉菌17997变株发酵新产物 被引量:5 2006年 以吸水链霉菌17997为出发菌株,分别阻断格尔德霉素(geldanamycin,GA)生物合成酶基因簇中的I型聚酮合酶(type I polyketide synthase,pks)基因的第6模块,单加氧酶(monooxygenase,gdmM)基因和氨甲酰基转移酶(carbamoyltransferase,ct)基因得到3种变株(pks-)、(gdmM-)和(ct-)。比较变株与原株发酵产物的H PLC谱型,结合紫外吸收图谱分析。检测结果表明各变株的GA生物合成均被阻断,并产生3个不同于原始菌株的新物质。这证明基因操作所涉及的pks,gdm M和ct基因是GA生物合成的必需基因;这些基因的阻断可产生不同于原株的新物质。HPLC谱型比较可以在多样化代谢产物的产生菌中快速、准确地发现基因工程变株发酵产物的变化,指导新化合物的分离鉴定,样品用量甚微,是化学早期鉴别的有力工具。 赫卫清 李京艳 孙桂芝 刘玉瑛 王以光关键词:反相高效液相色谱 基因阻断 格尔德霉素生物合成基因功能的验证 被引量:7 2008年 格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)作为热休克蛋白90的特异性抑制剂,是非常有前景的抗肿瘤和抗病毒的药物,我们已从吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus17997)的基因文库中获得了Gdm大部分生物合成基因。为了研究主要基因的功能,选择了聚酮合酶基因(Polyketide synthase gene,pks)的第六模块、单加氧酶基因(Mono-oxygenase gene,gdmM)和氨甲酰基转移酶基因(Carbamoyltransferase gene,gdmN)3个基因作为靶点分别进行基因阻断,获得了基因同源双交换的阻断变株△pks、△gdmM和△gdmN。经HPLC检测证实这些基因的阻断变株均不产生Gdm,基因回复实验排除了基因阻断所可能造成的极性效应对其它基因表达的影响,说明所克隆的pks、gdmM和gdmN基因确实是Gdm生物合成所必需的基因。 赫卫清 刘玉瑛 孙桂芝 王以光关键词:基因阻断 吸水链霉菌17997中格尔德霉素生物合成基因簇的研究 吸水链霉菌17997(S.hygroscopicus 17997)是本所从中国土壤中分离得到的格尔德霉素(geldanamycin,GDM)产生菌。最先发现GDM具有抗原虫和抗肿瘤作用,最近本所的研究发现,GDM还具有良... 赫卫清 武临专 孙桂芝 刘玉瑛 雷健 王以光关键词:吸水链霉菌 格尔德霉素 生物合成 抗病毒活性 文献传递