刘棋
- 作品数：83 被引量：439H指数：12
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划广西省自然科学基金广西科技创新能力与条件建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 广西狂犬病分子流行病学的研究
- 本研究从2000年开始从广西各地采集了1563份犬脑、4份发病牛脑、1份发病猪脑和1份猫脑组织,通过对这些动物脑组织的PCR检测,分离出38株狂犬病毒株,并对N基因3’端455个核苷酸片段进行测序分析。根据核苷酸同源性及...
- 熊毅刘棋朱伟韦友传陆专灵郭建刚李华明刘科南松剑罗廷荣
- 关键词：狂犬病N基因分子流行病学
- 文献传递
- 2株鹅细小病毒的主要结构蛋白VP2基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2008年
- 将鹅细小病毒PJ分离株和XJ分离株接种于13日龄非免疫鸭胚,收集接毒后24～72h死亡的鸭胚尿囊液。根据Genbank已发表的鹅细小病毒B株基因组核苷酸序列设计1对引物,对2株鹅细小病毒毒株主要结构蛋白VP2基因进行PCR扩增,将扩增产物与pMD18-T载体连接并测序。结果表明:PJ株和XJ株VP2的核苷酸序列全长分别为2 044bp和2 050bp,PJ株与B株、XJ株、台湾株的同源性均为93.5%～96.7%,与YG株、哈尔滨株、广东株的同源性为88.7%左右,与匈牙利株的同源性仅为80.7%,而与番鸭细小病毒的同源性为74.8%～80.7%。XJ株与匈牙利株的同源性为83.5%,与番鸭细小病毒的同源性为76.8%～80.0%,与其他毒株的同源性为91.6%～98.3%。
- 胡晓静潘杰陈进喜付薇徐贤坤何丹刘棋熊毅
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因克隆
- 5株H9N2亚型禽流感病毒HA、NA基因的序列分析被引量：1
- 2010年
- 为了从分子生物学角度了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在广西的遗传变异情况,对5株不同年代的广西H9N2亚型AIV的HA和NA基因进行克隆测序及同源性、遗传进化分析。结果表明,5株分离株均为低致病性AIV(LPAIV),HA、NA基因均属于欧亚谱系中的DK/HK/Y280/97(第I亚群),与我国代表株CK/BJ/1/94HA基因核苷酸、氨基酸同源性为93.5%～95.9%,NA基因核苷酸、氨基酸同源性为93.8%～95.8%。分离株DK/GX/51/05、CK/GX/55/05HA基因第226位氨基酸由谷氨酰胺(Gln)突变为亮氨酸(Leu),具备人类流感病毒的受体特征,而在糖基化位点方面,除了CK/GX/6/00HA基因的第218位发生变异以外,5株分离株HA基因上其余各糖基化位点均未发生变异;分离株DK/GX/51/05、CK/GX/55/05、QA/GX/B1/06NA基因均缺失第63、64、65位3个氨基酸,导致1个糖基化位点缺失,而CK/GX/6/00、WB/GX/A1/06NA基因则未发生缺失。
- 刘科覃伦熊毅刘棋
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型HA基因NA基因
- γ-干扰素ELISA检测方法在广西牛结核病流行病学调查中的应用被引量：12
- 2013年
- 【目的】摸清广西水牛及奶牛结核病的流行情况，为制定净化广西牛结核病防制策略提供参考。【方法】2008～2011年采用皮内变态反应和γ-干扰素ELISA检测方法联合对广西奶牛及水牛开展结核病流行病学调查，共检疫5478头奶牛和1580头奶水牛。【结果】2008～2011年从广西南宁、柳州、北海、钦州、桂林等市累积检测出皮内变态反应阳性奶牛63头、水牛17头，阳性检出率分别为1.15％和1.08％，总体上广西奶牛及水牛结核病阳性率呈现逐年降低的趋势。通过采用自制水γ－干扰素EusA检测试剂盒和Bovigam牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测试剂盒对牛结核病进行检测，发现γ-干扰素ELISA检测的牛结核病阳性率低于皮内变态反应，且准确度高。【结论】对牛群进行结核病检测时，先以变态反应检疫牛群，再结合γ-干扰素ELISA检测进行综合判断，更有利于牛结核病的检测与净化。
- 徐贤坤熊毅韦达有黄小武蓝纪黄胜斌马琳刘棋
- 关键词：牛结核病皮内变态反应流行病学调查阳性率
- O型口蹄疫病毒结构蛋白基因VP1的克隆与原核表达被引量：14
- 2008年
- [目的]为进一步研究口蹄疫病毒的诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上已公布的O型口蹄疫病毒核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,通过RT-PCR扩增VP1基因,将其克隆至表达载体pGEX-6p-1中,经测序鉴定目的基因正确地整合至表达质粒中,用IPTG诱导重组基因表达。[结果]通过PCR扩增获得682 bp的目的片段,所克隆的VP1基因在原核细胞中成功表达,表达产物为融合蛋白,经SDS-PAGE鉴定分子量为51 kD,Western Blot结果表明融合蛋白具有免疫原性。[结论]获得了猪O型口蹄疫VP1融合蛋白,可作为包被抗原用于口蹄疫诊断试剂盒的研制。
- 付薇陈磊熊毅潘琼王常伟陈进喜胡晓静刘棋
- 关键词：口蹄疫病毒VP1克隆
- 2013～2018年广西部分规模猪场主要病毒性腹泻疫病流行病学调查研究被引量：12
- 2019年
- 为了解广西壮族自治区规模猪场主要病毒性腹泻疫病的流行情况,本研究采用RT-PCR方法,对2013~2018年广西壮族自治区14个地级市送检的1547份腹泻类样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)和猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)4种猪的主要病毒性腹泻疫病的病原阳性率、季节影响因素和混合感染情况进行调查与分析。检测结果显示,2013~2018年,病毒平均样品阳性率从高到低依次为PEDV(54.94%)、PDCoV(4.52%)、PoRV(4.40%)和TGEV(0.00%),其中PEDV的样品阳性率、地区阳性率和秋冬季节阳性率均为最高。4种病毒均存在不同程度的单一感染或混合感染,其中单独感染以PEDV为主,其次是PDCo V和Po RV,TGEV单一感染率最低;混合感染中以PEDV+PDCo V和PEDV+Po RV双重感染为主,三重感染较少发生。结果表明,2013~2018年PEDV阳性检出率最高,已经成为引发广西规模猪场流行性腹泻的最主要病原,并且常与Po RV和PDCo V发生混合感染,是当前广西猪病毒性腹泻类疫病的防控重点。
- 何颖秦毅斌段群棚张艺杰卢冰霞胡庭俊李晓玉周英宁周展宏刘磊梁家幸李斌蒋冬福卢敬专苏乾莲刘棋赵武
- 关键词：猪病毒性腹泻
- 山羊痘病毒ORF8～ORF18缺失重组毒株的构建和鉴定被引量：2
- 2010年
- 本研究旨在通过敲除山羊痘病毒（GTPV）大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体。采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7-ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18~ORF19间1 355 bp的片段。接着分别以上述2片段作为左、右侧同源重组臂,构建了包含报道基因EGFP和抗性基因gpt的GTPV重组转移载体pCF-Eg。然后采用脂质体介导法,将重组转移载体pCF-Eg与GTPV AV41株共转染原代羊睾丸细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定重组病毒的遗传稳定性和生长特性。结果成功获得1株敲除掉ORF8~ORF18间9个ORF、长达7 kb基因组片段的重组病毒vCF-Eg。该重组病毒能稳定表达绿色荧光蛋白至少10代,并且其增殖滴度与亲本毒株基本相同。表明上述区域是GTPV的复制非必需区。
- 郑敏刘棋金宁一施开创梁媛莫胜兰屈素洁陆文俊胡博
- 关键词：山羊痘病毒重组病毒基因缺失病毒载体
- 广西家犬狂犬病病毒的感染状况调查被引量：20
- 2004年
- 为了解广西家犬狂犬病病毒的感染状况 ,采用RT PCR方法对广西 13个市、地区的家犬携带狂犬病病毒情况进行了检测 ,结果阳性检出率达 6 .6 9% (19/ 2 84 ) 。
- 李华明郭建刚刘棋郑敏邓朝阳邹联斌兰斌
- 关键词：家犬狂犬病病毒
- 猪繁殖与呼吸综合征血清学调查被引量：26
- 2006年
- 卢景杨汉春刘棋
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征血清学调查接触性传染病呼吸道症状繁殖障碍木乃伊
- 广西区2008-2011年猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因的遗传变异分析被引量：2
- 2012年
- 为了解广西壮族自治区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,对2008-2011年间来自广西各地的部分PRRSV阳性病料进行Nsp2基因的扩增和测序分析。结果显示,获得的49个毒株均为美洲型,其中46株具有高致病性变异毒株的序列特征,即其Nsp2蛋白缺失第481位和第533～561位aa,其余3株不具有上述缺失,属于PRRSV传统毒株。广西区49个毒株Nsp2基因间核苷酸序列的同源性介于84.8%～99.7%,与VR-2332、CH-1a、HB-1及JXA1株核苷酸序列的同源性分别为80.5%～83.7%、89.7%～92.6%、92.4%～96.3%、92.8%～99.3%,而与LV株核苷酸序列同源性仅为51.0%～53.9%。基于Nsp2基因核苷酸序列所绘制的遗传进化树,可将所有美洲型PRRSV毒株分为4个亚群,广西区的49个毒株有3株分布在以HB-1株为代表的Ⅲ亚群,46株分布在以JXA1株为代表的Ⅳ亚群。表明,当前广西区PRRSV流行毒株均为美洲型毒株,并且以Ⅳ亚群为优势基因亚群,各毒株间的Nsp2基因序列存在一定的差异,但没有明显的地域特征。
- 赵日浪施开创林昌华赵国明何贻坚刘棋
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因
