刘士廉
- 作品数:49 被引量:150H指数:7
- 供职机构:中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 细胞凋亡及其基因调控被引量:27
- 1994年
- 细胞凋亡及其基因调控刘士廉,郑德先(中国医学科学院基础医学研究所,北京100005)细胞的死亡,顾名思义,是指细胞生命活动的结束。在多细胞生物中,细胞的死亡有两种不同的形式。一种是坏死性或意外性死亡(Necrosis或AccidentalCellDe...
- 刘士廉郑德先
- 关键词:细胞死亡基因调控细胞凋亡
- 肢端肥大症及高泌乳素血症患者T细胞分化抗原mRNA的表达被引量:3
- 1994年
- 采用斑点杂交法测定了49例生长激素(GH)及泌乳素(PRL)分泌过多文件患者和15名正常女性外周血淋巴细胞CD2、CD4和cD8mRNA的表达水平。发现GH分泌过多患者CD2rnRNA的表达较正常人有显著升高,PRL分泌过多患者CD4和CD8mRNA的比值较正常人显著降低。提示GH及PRL分泌过多对患者免疫细胞的激活和免疫应答有重要影响。
- 刘军喜郑德先张泽松许成素刘士廉史轶蘩金自孟
- 关键词:肢端肥大症高催乳素血症RNA
- 8-氯腺苷增强肿瘤细胞对TRAIL杀伤作用敏感性的研究被引量:4
- 2005年
- 目的研究8-氯腺苷(8-Cl-Ado)增强肿瘤细胞对肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TARIL)杀伤作用的敏感性及其分子机制。方法以重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)和(或)8-Cl-Ado处理乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞BEL-7402,以MTT比色法测定细胞存活率,分析药物处理对细胞凋亡的影响;构建NF-κBDNA结合序列虫荧光素酶报告质粒,并转染适当的细胞株,测定NF-κB的转录活性;以不同胱天蛋白酶的抑制剂预处理所试细胞株,再加入rsTRAIL处理,测定胱天蛋白酶抑制剂对细胞凋亡的影响。结果8-Cl-Ado显著增强了乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞BEL-7402对rsTRAIL诱导细胞凋亡的敏感性;8-Cl-Ado与rsTRAIL联合可使肝癌细胞株BEL-7402内NF-κB活性下降,从而促进细胞凋亡,而在乳腺癌细胞株MCF-7中未观察到相同的现象;胱天蛋白酶家族抑制剂对BEL-7402细胞的凋亡无影响,但可显著抑制MCF-7细胞的凋亡,但胱天蛋白酶-3、-9和-8的特异性抑制剂对MCF-7细胞株的生长均无影响。结论8-Cl-Ado可显著增强乳腺癌和肝癌细胞对rsTRAIL细胞毒作用的敏感性,在此两种细胞中,8-Cl-Ado与rsTRAIL联合作用可分别激活胱天蛋白酶依赖的和非依赖的细胞凋亡信号途径。
- 王明婕刘彦信张锦春刘士廉郑德先
- 关键词:8-氯腺苷肝癌细胞乳腺癌细胞
- 重组可溶性TRAIL的表达与生物学活性被引量:18
- 2003年
- 研究重组可溶性TRAIL的抗肿瘤生物学活性。采用基因分子生物学方法构建重组可溶性TRAIL的表达载体 ,建立大肠杆菌表达菌株 ,采用柱层析等方法获得纯化的重组可溶性TRAIL ;采用流式细胞术、细胞活性测定法和体内药效学实验分析重组可溶性TRAIL杀伤肿瘤细胞的生物学活性。结果表明重组可溶性TRAIL在体外可诱导人白血病细胞和肝癌细胞凋亡 ,凋亡率达5 0 %以上。中枢神经系统的肿瘤细胞对重组可溶性TRAIL不敏感。重组可溶性TRAIL在体内能显著抑制人非小细胞肺癌细胞在小鼠体内生长 ,抑制率达 70 %以上。结论为研究制备的重组可溶性TRAIL能在体内外杀死多种肿瘤细胞 ,具有显著的临床应用前景。
- 史娟张锦春畅晓燕刘士廉刘彦信郑德先
- 关键词:生物学活性肿瘤细胞凋亡
- Bcl-2家族蛋白参与调节CD3ε和5-氟尿嘧啶介导的T淋巴细胞凋亡被引量:4
- 2005年
- 目的 :研究Bcl 2家族成员在 5 氟尿嘧啶 (5 FU)和CD3ε介导的T淋巴细胞凋亡中的作用 ,阐述T淋巴细胞凋亡的分子机制 ,为相关肿瘤的治疗提供依据。方法 :用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 5 FU(2 5 μg/ml)单独或联合刺激JK、TJK和T3JK细胞 ,诱导细胞凋亡 ,用MTS比色法检测细胞死亡率 ,用Westernblot检测Bid的表达和活化。用脂质体的方法转染细胞。结果 :CD3ε特异的单克隆抗体和 5 FU分别单独处理TJK细胞 ,都能诱导其凋亡并伴随Bid的活化 ,二者联合使用能显著增加TJK细胞凋亡和Bid的活化。Bcl 2过表达可明显降低TJK细胞对 5 FU的敏感性。结论 :Bcl 2家族成员参与CD3ε和 5 FU诱导的T淋巴细胞凋亡的调节 ,Bcl 2过表达能显著抑制T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。
- 程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先
- 关键词:5-FUBID细胞凋亡
- TRAIL诱导炎症细胞因子分泌及其信号传递途径
- 研究背景:肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)发现于1995年,是肿瘤坏死因子(TNF)超家族的成员。目前TRAIL及其受体相关的研究工作大部分都集中在细胞凋亡上,人们对其生理学功能仍知之甚少。目的:进一步地探寻...
- 唐万虎王维民张亚玺刘士廉刘彦信郑德先
- 文献传递
- 阿藿烯(Z-Ajoene)诱导肿瘤细胞凋亡被引量:11
- 1998年
- 为了研究大蒜的药理作用 ,从大蒜中分离得到了含硫的简单有机化合物阿藿烯 (z_Ajoene) .在体外以不同浓度的阿藿烯处理 3种不同的肿瘤细胞 ,应用MTT法分析阿藿烯对肿瘤细胞生长的影响 ,采用光学显微镜、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳等技术分析肿瘤细胞形态、DNA含量和染色体DNA的断裂 ,使用West ern蛋白印迹法测定基因表达 .发现阿藿烯对HL_6 0 ,MGc_80 3和Molt_4等 3种肿瘤细胞均具有明显的致凋亡作用 ,其机制可能是通过抑制原癌基因bcl_2的表达而实现的 .
- 张四清赵嵩闵吉梅王夔刘士廉郑德先
- 关键词:肿瘤细胞凋亡阿藿烯BCL-2表达抗肿瘤药物
- CD3ε胞浆区2个酪氨酸共同介导T淋巴细胞凋亡被引量:4
- 1998年
- CD3ε是T细胞抗原受体复合物 (TCR/CD3)的一个成员 ,在此复合物的组装和介导细胞激活信号的传递中起重要作用 ,其信号传递的功能与其胞内区称之为免疫受体酪氨酸依赖的激活基序 (ITAM )有关 .已有报道人CD8分子的膜外区_跨膜区和CD3ε分子的胞内区组成的融合分子 (CD8_ε)能介导T淋巴细胞激活后凋亡 ,表明单独的CD3分子的ITAM可传递细胞凋亡信号 .进一步以CD8_ε为模板和点突变PCR技术制备了其ITAM中酪氨酸 170 ,181分别和同时突变为苯丙氨酸的突变体 ,克隆入真核表达载体 pcDNA3后 ,转染CD8阴性的人白血病TJurkat淋巴细胞 ,获得了分别表达野生型和各突变型CD8_ε融合分子的细胞株 .以抗CD8单抗分别处理这些细胞株 ,发现抗CD8单抗只能诱导表达野生型CD8_ε分子的细胞激活后凋亡 ,而不能诱导任何表达突变型融合分子的细胞凋亡 ,证明CD3ε_ITAM中的 2个酪氨酸对T淋巴细胞激活和凋亡是缺一不可的 .
- 何亦平刘彦信郑勇刘音杨桂珍刘士廉郑德先
- 关键词:细胞凋亡酪氨酸T淋巴细胞白血病
- CD3ε和5-氟尿嘧啶在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P53的表达被引量:8
- 2003年
- 目的 研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法 培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM的TJK及T3JK细胞株。用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 /或 5 FU(2 5 μg/ml)刺激不同的T淋巴细胞诱导细胞凋亡 ,用噻唑蓝比色法检测细胞存活率 ,并计算细胞死亡率 ;用瞬时转染野生型或突变型P5 3表达质粒的方法和Western印迹检测P5 3蛋白质的表达 ,分析其在T淋巴细胞凋亡中的作用。结果 在CD3ε和 5 FU分别诱导T淋巴细胞凋亡过程中 ,均伴随着P5 3蛋白质表达增加 ;两者联合使用使T淋巴细胞凋亡和P5 3蛋白质表达显著增加 ;P5 3过表达可明显增加T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。结论 抗CD3ε抗体和 5 FU联合作用可显著提高P5 3蛋白质表达 ,两者在T淋巴细胞凋亡中具有协同效应。
- 程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先
- 关键词:5-氟尿嘧啶T淋巴细胞凋亡P53单克隆抗体
- DR4死亡结构域结合蛋白的初步研究
- 2002年
- 目的克隆DR4死亡结构域的结合蛋白,为进一步研究DR4诱导细胞凋亡的信号传递途径提供条件。方法以TRAIL(TNF-relatedapoptosisinducingligand)死亡受体DR4的死亡结构域(DR4DD)为钓饵,采用酵母双杂交系统筛选人白细胞MATCHMAKERcDNA文库。以DNA自动分析仪测定核苷酸序列,采用计算机软件分析核苷酸的同源性及功能结构域。并用免疫共沉淀方法分析人类甲酰肽受体1(formylpeptidereceptor-like1,FPRL1)在哺乳动物细胞内是否与DR4CD(thecytoplsmicdomainofDR4)特异性地结合。结果获得了两个阳性克隆pADB1和pADB2。DNA序列分析及同源性比较表明,pADB1的插入片段与人FPRL1的mRNA序列具有97%的同源性。pADB2的插入片段与GeneBank中的已知序列无同源性。免疫共沉淀结果表明FPRL1在哺乳动物细胞内可与DR4CD特异性地结合。结论FPRL1可与DR4的死亡结构域特异性结合,推测FPRL1与DR4的结合可能在DR4介导的细胞凋亡信号传导途径中发挥一定的作用。
- 李晓玲刘彦信刘士廉郑德先
- 关键词:TRAIL酵母双杂交系统