黄燕萍
- 作品数:29 被引量:88H指数:6
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市科委基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 逆向斑点杂交检测HBV基因型及YMDD变异
- 目的应用逆向斑点杂交技术检测HBV基因型及YMDD变异。方法合成有生物素标记的引物, PCR扩增两种DNA片段,与尼龙膜上的探针同时杂交,BCIP/NBT显色。结果检测21例拉米夫定治疗中的慢性乙型肝炎患者,11例HBV...
- 黄燕萍兰林李俊刚丁世涛王宇明
- 文献传递
- 逆向斑点杂交检测乙型肝炎病毒基因型及YMDD变异被引量:4
- 2006年
- 目的应用逆向斑点杂交技术检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型及YMDD变异。方法合成有生物素标记的引物,PCR扩增两种DNA片段,与尼龙膜上的探针同时杂交,BCIP/NBT显色。结果检测21例拉米夫啶治疗中的慢性乙型肝炎患者,11例HBV为基因型B,10例为基因型C;YMDD基序有47·6%(10/21)为YMDD,28·6%(6/21)为YVDD,23·8%(5/21)为YIDD。结论在同一张尼龙膜上检测HBV基因型及YMDD变异,经济实惠、准确快捷,且易于开展。
- 黄燕萍兰林李俊刚丁世涛范燚王宇明
- 关键词:基因型
- 乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子基因组CpG岛甲基化谱差异分析被引量:2
- 2005年
- 目的进行乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子基因组CpG岛甲基化谱差异分析,以发现可能的差异甲基化基因。方法采用改良甲基化间区位点扩增技术,根据人基因组CpG岛甲基化位点的两种主要碱基组合,CGCG和CCGG,用3种不同的酶切组合(SmaⅠXmaⅠ、HpaⅡMspⅠ、BssHⅡPauⅠ/BsePⅠ),同时采用PersonalMolecularImagerFX分子成像系统及放射自显影相结合的方法,经QuantityOne4.4.0凝胶图像分析软件进行差异条带分析,分离回收差异甲基化条带并克隆入T载体,阳性克隆进行测序,将测序结果进行BLAST分析,初步了解与乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子相关的差异甲基化基因情况。结果在一对表型一致的单卵孪生子间基因组CpG岛甲基化分析显示条带几乎相同,而在另一对表型一致以及一对表型不一致的单卵孪生子之间均存在差异甲基化条带,前者差异甲基化条带数目少于后者,将得到的差异甲基化条带克隆入T载体,目前测序分析得到4个可能与乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子相关的差异甲基化基因。结论乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子间基因组CpG岛甲基化水平有差异,其对疾病表型的影响及机制尚需后续深入研究。
- 徐宝艳王宇明邓国宏罗元辉杜泽丽兰林黄燕萍
- 关键词:表型甲基化CPG岛甲基化病毒感染后乙型肝炎
- 应用改良甲基化间区位点扩增(AIMS)技术对人类全基因组CpG岛甲基化谱的分析被引量:1
- 2005年
- 目的 进行人类全基因组CpG岛甲基化谱分析。方法 采用改良甲基化间区位点扩增(AIMS)技术,以甲基化敏感和 甲基化不敏感的3组同裂酶进行分析。分析6%、8%、10%3种变性测序胶对于分析人类甲基化谱电泳条带的影响,3种酶切组合的 分析效果以及进行放射自显影和分子成像系统分析的对比。结果 得到具有个体差异的人类基因组CpG岛甲基化图谱,为后续研 究奠定了基础。6%变性测序胶所得电泳条带的分辨率和条带范围明显优于8%和10%变性测序胶。3种酶切组合均可以很好地进 行AIMS分析。放射自显影和PersonalMolecularImagerFX分子成像系统两种方法相辅相成。结论 改良AIMS技术是一种甲基 化高通量分析方法,具有简单、特异、易操作的特点。所选3组内切酶组合可以较全面的覆盖人类CpG岛,使分析结果更加准确,且 所需的基因组量少,可满足临床微量标本检测的需要。
- 徐宝艳王宇明邓国宏杜泽丽兰林罗元辉黄燕萍
- 关键词:表观遗传学
- 荧光PCR快速检测基因型和基因变异
- 2001年
- 黄燕萍
- 关键词:基因型基因变异
- 肝炎和血液透析病人庚型肝炎病毒感染状况的初步研究
- 96年美国科学家Linnen等从美国慢用肝炎病人中分离出了庚型肝炎病毒(HGV),HGV感染,几乎呈全球性分布,中国北京、四川、黑龙江、广东等地区均有发现。该文采用ELISA法对住院肝炎患者和维持性血液透析患者共227例...
- 陈国致李玲黄燕萍
- 关键词:医原性疾病医院感染流行病学庚型肝炎病毒血液透析酶联免疫吸附法
- 针对HBV C基因启动子区的siRNA抑制HBV DNA复制的研究
- 目的:设计针对HBVC基因启动子区的siRNA,观察其对HBVDNA复制的抑制作用.方法:根据siRNA的设计原则,针对HBVDNAC基因启动子区设计两条引物,常规退火,磷酸化,与酶切后质粒PmU6连接,构建能产生发夹样...
- 万志红王宇明黄燕萍刘国栋丁世涛重庆
- 关键词:肝炎病毒SIRNA肝脏疾病DNA复制
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子基因组CpG岛甲基化谱差异分析
- 目的进行乙型肝炎病毒感染后表型不一致的单卵孪生子(monozygotic twins,MZ twins)基因组CpG 岛(CpG islands)甲基化谱差异分析。方法应用改良甲基化间区位点扩增技术(amplificat...
- 徐宝艳王宇明邓国宏罗元辉杜泽丽兰林黄燕萍
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒包膜糖蛋白高变区1多抗原肽设计及免疫原性的研究被引量:3
- 2000年
- 目的 应用多抗原肽 (MAP)研究丙型肝炎病毒包膜糖蛋白高变区 1(HVR1)的抗原性。方法 根据已经获得的HCV BJ株E2 /NS1区氨基酸序列 ,参照国内外学者所报道的HCVHVR1序列及抗原性参数 ,设计并合成含HCVHVR1390— 411aa序列 2 2个氨基酸的线性表位多肽 (以LP表示 )及MAP(对称 8分枝 ) ,分别以LP和MAP免疫Balb/C小鼠及家兔 ,比较其免疫原性。结果 MAP免疫原性明显强于LP ,抗体滴度 1∶40 96 0 ,而LP免疫组为 1∶12 80。结论 MAP的构型优势能明显提高HCVHVR1合成多肽抗原的免疫原性 ,提示MAP可用于HCV分子疫苗的设计。
- 王永刚郝飞黄燕萍王宇明
- 关键词:肽类免疫原性丙型肝炎病毒
- 荧光定量PCR与普通PCR检测HBV DNA的对照分析被引量:12
- 2001年
- 目的 比较普通PCR(Common PCR)和实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测人血清HBV DNA结果之间的相互关系,为临床提供最有效的诊断方法。方法 对 117份血清标本用两种方法同时进行检测,分析其相关性,比较其差异。结果 荧光定量PCR不仅能几乎100%检测出普通PCR阳性的标本,还能在其阴性的76份标本中检测出36份阳性,其拷贝数均在较低水平。在不同的血清标志物模式下,定量方法的阳性率均明显高于定性方法。结论 荧光定量PCR具有一定优势,尤其适合于使用抗病毒药物的病人的疗效观察和病情预测。
- 黄燕萍王宇明
- 关键词:HBV乙型肝炎