马苗鹏
- 作品数:28 被引量:22H指数:3
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:广东省教育部产学研结合项目广东省自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程经济管理更多>>
- 猪源抗菌肽PBD-1在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量:7
- 2016年
- 本试验旨在实现猪β防御素1(poricine-β-defensin 1,PBD-1)在毕赤酵母中的表达,获得有抗菌活性的抗菌肽PBD-1。根据PBD-1的氨基酸序列和酵母密码子偏好性,设计优化其核苷酸序列,利用SOE-PCR技术获得PBD-1基因序列,克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-PBD-1,经SacⅠ线性化后转入毕赤酵母SMD1168中。PCR筛选得到阳性酵母表达菌株,经甲醇诱导后得到分子质量约4.5ku的抗菌肽PBD-1。抗菌特性研究结果表明,表达产物抗菌肽PBD-1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌均有较好的抑制效果。
- 江学斌陈嘉蔚杨军刘顺枝肖安吉卢志鹏楚品品黄朝远蔡海明马苗鹏张玲华
- 关键词:毕赤酵母PCR
- 一种嗜酸乳酸杆菌与醋酸杆菌混合发酵的方法
- 本发明属于微生物发酵技术领域,具体公开了一种嗜酸乳酸杆菌与醋酸杆菌混合发酵方法。本发明先制备乳酸杆菌种子和醋酸杆菌种子,然后在MRS基础培养基中加入2.8~3.1%葡萄糖、1.8~2.1%可溶性淀粉和0.4~0.7%低聚...
- 张玲华蔡海明曹丁明飞平马苗鹏杨军
- 文献传递
- 一种高效抗炎性PB ODN序列及其应用
- 本发明属于生物制药技术领域,具体公开了一种高效抗炎性PB ODN序列及其应用,所述序列如SEQ ID NO:1所示,该序列具有高效抗炎作用;含有该序列的制剂非常有利于控制猪疾病和炎症,可成功实现替代或部份替代抗生素,从而...
- 张玲华周洁安蔡海明马苗鹏
- 文献传递
- 一种鸡特异性免疫活化剂CpG-ODN及其应用
- 本发明公开了一种鸡特异性免疫活化剂CpG‑ODN及其应用,所述CpG‑ODN的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。该CpG‑ODN能提高对鸡的先天性免疫及特异性体液和细胞介导的免疫反应的诱发作用,可将其转入质粒载体p...
- 张玲华马苗鹏贾军皓
- 分离自婴儿粪便的嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的常温保存探究被引量:3
- 2015年
- 目的:试验不同的保护剂成分配方,探究分离自婴儿粪便的2种益生菌(嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌)在常温条件下保持较高活性的可行方法。方法:利用均匀设计实验方法设计保护剂配方,用于保存特定高活性高稳定性的菌种,在不同时间点检测活菌数,分析数据得出最佳保护剂成分比例。结果:嗜酸乳杆菌10A31保护剂最佳配方为:海藻糖∶谷氨酸∶天冬氨酸=5∶24∶24;长双歧杆菌11A11保护剂最佳配方为:海藻糖∶谷氨酸∶麦芽糖=34∶11∶10;用最佳保护剂配方保存后,嗜酸乳杆菌10A31在200 d时的菌落计数结果为3.87×109CFU/g,长双歧杆菌11A11在160 d时为1.53×109CFU/g,均具有较高的活性。结论:最佳保护剂配方使2个菌种常温保存期至160 d。
- 黄魁英肖安吉卢志鹏楚品品杜少平明飞平夏枫耿黄朝远杨军蔡海明马苗鹏张玲华
- 关键词:嗜酸乳杆菌长双歧杆菌常温保存益生菌
- 一种用于含有CpG基序重组质粒的工程菌的培养基及发酵方法
- 本发明公开了一种用于含有CpG基序重组质粒的工程菌的培养基。该培养基含有糖蜜4.00~8.00g/L、玉米浆8.00~10.00g/L和工业蛋白胨8.00~10.00g/L。提高CpG基序重组质粒产量的发酵方法为,使用所...
- 张玲华孙崇军赵锃珏何容肖甘冠华陈志洋马苗鹏
- 文献传递
- 菌丝霉素在酪丁酸梭菌中的表达研究
- 2020年
- 目的:构建菌丝霉素(Plectasin,Pt)的真核重组表达菌株,研究其在酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)中的表达和抑菌活性,提供一种高效,天然具有抑菌功能的新型食品添加剂和畜类养殖的抗菌制品。方法:先将启动子thl克隆到载体pMTL82151上,得到表达型质粒pMTL82151-thl,然后根据酪丁酸梭菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后的Pt基因,再将产菌丝霉素基因Pt克隆到启动子thl的下游,构建表达质粒pMTL82151-Pt,并接合转化入酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum),通过甲砜霉素抗性筛选阳性重组子,PCR鉴定,SDS-PAGE分析和琼脂孔穴扩散法筛选获得菌丝霉素组成型表达菌株,并进行工程菌酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)pMTL82151-Pt发酵表达研究。结果:thl基因与质粒pMTL82151连接,得到表达型质粒pMTL82151-thl,将产菌丝霉素基因Pt克隆到启动子thl的下游,成功构建表达质粒pMTL82151-Pt。实现了Pt基因在酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)中的组成型表达,SDS-PAGE分析显示,在4.4 kDa处有明显的目的条带。工程菌经发酵表达培养后取上清,对金黄色葡萄球菌ATCC25923的半抑制浓度(half-inhibitory concentration IC_(50))为12.74μg/mL。结论:本研究中成功将菌丝霉素在酪丁酸梭菌中表达,为以后大批量生产和推广菌丝霉素作为食品添加剂和肉食类畜牧养殖中抗生素替代品奠定了基础。
- 贾军皓曹丁陈勉华赵培静明飞平梁倩怡李嘉怡樊钦邓锦波张淑霞马苗鹏张玲华
- 关键词:食品添加剂抑菌活性
- 一种促进枯草芽孢杆菌自然生长转化的培养基组合及其转化方法
- 本发明公开了一种促进枯草芽孢杆菌自然生长转化的培养基组合及其转化方法。所述培养基组合包括培养基1和培养基2。本发明利用含有特殊营养物质配方的培养基,高效获得枯草芽孢杆菌感受态细胞,配合自然转化法,更高效,更快速获得有益重...
- 张玲华贾军皓楚品品曹丁马苗鹏邓锦波明飞平
- 文献传递
- CpG基序重组菌发酵培养基的优化
- 2012年
- 目的:为提高CpG基序重组菌的发酵水平,降低CpG重组质粒的生产成本,运用响应面法优化CpG重组菌发酵培养基。方法:利用Plackett-Burman试验筛选出影响发酵水平的3个最显著因素:糖蜜、玉米浆和工业蛋白胨。然后用响应面设计试验并优化得到最显著因素的最佳浓度,并进一步通过发酵试验验证优化后的培养基。结果:得到一组具有较高菌浓及质粒产量且价格低廉的发酵用培养基:糖蜜4.5g/L,玉米浆8.5g/L,工业蛋白胨8.5g/L,甘油10mL/L,KH2PO41.5g/L,K2HPO42.3g/L,MgSO4.7H2O 0.25g/L,在此培养条件下,OD600实测值为0.6771,理论值为0.6643,两者接近,与标准LB培养基相比,质粒产量提高了15%左右。结论:最终筛选到的培养基具有较高的性价比。
- 李华周叶明强黄志丰邝哲师赵祥杰姜增固马苗鹏王候光徐臣超曹丁张玲华
- 关键词:重组菌响应面法发酵培养基
- 一种对猪具有特异性免疫刺激作用的CpG-ODN及其应用
- 本发明公开了一种对猪具有特异性免疫刺激作用的CpG‑ODN及其应用,所述CpG‑ODN的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。该CpG‑ODN能提高对猪的先天性免疫及特异性体液和细胞介导的免疫反应的诱发作用,可将其转入...
- 张玲华贾军皓马苗鹏
- 文献传递