韦琴
- 作品数：3 被引量：23H指数：2
- 供职机构：武汉长江工商学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡α干扰素在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达及抗病毒功能初探被引量：2
- 2014年
- 为了研究鸡α干扰素(ChIFNα)基因的特性和功能,将鸡α干扰素的DNA序列克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPIC9K中,并转化入巴斯德毕赤酵母GS115菌株,用PCR技术鉴定阳性转化子。重组菌株GS115/pPIC9K-IFNα用1%甲醇诱导后,分泌表达重组蛋白,斑点杂交(dot-blot)检测IFNα具有免疫原性。细胞病变抑制法表明,表达产物有明显的抗鸡H9N2亚型禽流感病毒活性。
- 韦琴吴士筠梅辉叶斌
- 关键词：巴斯德毕赤酵母免疫原性
- 鸡α干扰素的克隆、原核表达及其抗病毒效果研究
- 干扰素是一类动物机体产生的多功能蛋白，它可由病毒感染而自发产生并随血液循环至全身，激活细胞内抗病毒作用机制合成各种抗病毒蛋白以抵抗病毒的侵扰。由于它高效的广谱抗病毒活性和免疫调节活性以及其无可替代的临床应用价值，从人类发...
- 韦琴
- 关键词：抗病毒禽流感病毒新城疫病毒生物制剂
- 文献传递
- 鸡α干扰素基因的克隆、原核表达及抗病毒效果研究被引量：18
- 2006年
- 通过PCR从三黄肉鸡的肝脏基因组中扩增了鸡α干扰素(ChIFN-α)全长基因。序列分析表明ChIFN-α基因全长582bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因(489bp),利用基因重组技术构建了E.coli/pET-28a(+)-IFNα,使IFN-α置于pET-28a的T7启动子下游并同6×His(多聚组氨酸标签)-Tag融合。经酶切鉴定,DNA测序证实重组质粒构建正确;将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE,Western-blot分析证实表达出22kD左右的融合蛋白,表达的蛋白以不溶性的包涵体形式存在并且具有良好的免疫学活性。提纯的包涵体纯度可达70%以上,用镍亲和层析方法纯化蛋白则可达到95%。经透析复性后的蛋白在鸡胚成纤维细胞上能够抑制H9N2禽流感病毒的复制。鸡胚试验中重组干扰素抗病毒效果好在H9N2禽流感病毒攻毒组中,能保护鸡胚并使其孵出率达到100%的重组干扰素最小蛋白含量为2μg;重组干扰素对新城疫病毒复制也有一定的抑制能力,延迟该病毒复制时间为12h至48h;雏鸡试验表明重组干扰素也能较好地抵抗H9N2禽流感病毒对雏鸡的感染。两组试验均表明,亲和层析纯化蛋白是包涵体蛋白活性的20倍左右。
- 韦琴彭贵青金梅林朱裕东周红波郭红燕陈焕春
- 关键词：抗病毒效果新城疫病毒
