闫道广 作品数:12 被引量:25 H指数:3 供职机构: 暨南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省学位与研究生教育改革研究项目 广东省高等教育教学改革项目 更多>> 相关领域: 文化科学 生物学 医药卫生 更多>>
ORP4L在制备治疗急性髓性白血病产品中的应用 本发明公开一种ORP4L在制备治疗急性髓性白血病产品中的应用。本发明从ORP4L基因在白血病干细胞中的特异表达出发,发现白血病干细胞特殊的能量维持机制,即氧化磷酸化依赖于ORP4L基因的存在。本发明提供了ORP4L基因的... 闫道广 钟文彬文献传递 核受体Rev-Erbα与代谢及心血管疾病 被引量:1 2010年 人类生理过程呈现24小时的生物节律,其受时钟基因控制和调节。细胞核受体Rev-Erbα是生物钟系统的重要组成部分,不仅是生物钟基因而且是生物钟调节基因,在维持生物节律准确性中发挥着重要作用;同时,Rev-Erbα调节糖代谢、脂质代谢、脂肪形成、纤溶蛋白降解、血管炎症并与其他与能量平衡相关核受体相互作用参与动脉粥样硬化发生发展过程。以往认为Rev-Erbα是一种孤儿受体,但最近发现其配体是血红素,这一发现拓宽了对该基因的理解并使其成为新的药物靶点。本文提出Rev-Erbα作为生物节律、代谢、免疫调节的共同节点,参与代谢疾病和心血管疾病的过程;并就最新研究进展进行了综述。 姜迎亮 周天鸿 闫道广一类小分子化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤转移药物中的应用 本发明公开了一类小分子化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤转移药物中的应用。所述化合物的结构如式(Ⅰ)所示;所述小分子化合物或其药学上可接受的盐,在体外可显著抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移和水平运动能力;且细胞毒性较小,对正... 闫道广 钟文彬 徐梦阳文献传递 ORP4L多克隆抗体的制备及其在蛋白质组学研究中的应用 2012年 目的:原核表达并纯化人氧化固醇结合蛋白相关蛋白4(ORP4L)肽段,制备兔抗人ORP4L多克隆抗体,并利用其进行蛋白质组学研究。方法:应用PCR技术扩增人ORP4L 382-485氨基酸(ORP4Lm)的基因序列并插入到PGEX-4T-1载体中,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)中表达融合蛋白GST-ORP4Lm。利用所表达的融合蛋白中含有的GST标签进行亲和纯化。用所获得的纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获得兔抗人ORP4L多克隆抗体。用Western blotting检测抗体免疫特异性。将亲和纯化后的抗体偶联到CNBr-actived sepharose beads上,利用免疫沉淀的方法,通过质谱仪分析鉴定可能与ORP4L存在相互作用的蛋白质。通过West-ern blotting进一步确证特异性的相互作用蛋白。结果:在大肠杆菌中表达并纯化了GST-ORP4Lm重组蛋白,用其免疫新西兰大兔,成功制备了相应兔源多克隆抗体,Western blotting证实该抗体可以特异识别内源性及外源性的ORP4L蛋白。质谱分析和Western blotting的结果表明所制备的多克隆抗体可以用于蛋白质组学研究。结论:利用重组的GST-ORP4Lm融合蛋白成功制备了有良好特异性的ORP4L多克隆抗体,并可将其用于ORP4L的蛋白组学研究。 韦坤德 闫道广关键词:蛋白表达纯化 多克隆抗体 蛋白质组学 miR-31-5p在急性髓系白血病中的应用 本公开涉及miR‑31‑5p在急性髓系白血病中的应用,其中包括检测miR‑31‑5p的产品在制备用于辅助诊断受试者患有急性髓系白血病(AML)和/或用于预后受试者生存期的试剂、芯片或试剂盒中的用途,以及miR‑31初始/... 闫道广 钟文彬文献传递 一类小分子化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤转移药物中的应用 本发明公开了一类小分子化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤转移药物中的应用。所述化合物的结构如式(Ⅰ)所示;所述小分子化合物或其药学上可接受的盐,在体外可显著抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移和水平运动能力;且细胞毒性较小,对正... 闫道广 钟文彬 徐梦阳Disulfiram联合Cu通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导白血病干细胞凋亡 被引量:4 2015年 目的探讨Disulfiram联合Cu(DS/Cu)诱导急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)细胞凋亡及其相关分子机制。方法磁珠筛选CD34+CD38-的KG1α细胞作为AML干细胞,流式细胞术检测空白对照组、DS单药组(5μmol/L)、DS/Cu组(5μmol/L/0.5μmol/L)、DS/Cu+NAC组(5μmol/L/0.5μmol/L/10 mmol/L)的AML干细胞24 h后凋亡比率及ROS水平;qRT-PCR检测上述各组TNF-α、CD40、TNFRSF11B、TNFRSF1B、HRK凋亡相关基因mRNA表达水平;Western blot检测各组处理后TNF-α的蛋白表达水平;予以中和抗体TNF-αm Ab(2μg/m L)和对照抗体Ig G(2μg/m L)预处理2 h后,流式细胞术检测空白对照组、DS/Cu组、TNF-αm Ab组、TNF-αm Ab+DS/Cu组、Ig G组及Ig G+DS/Cu组的AML干细胞24 h后的ROS水平。结果予以DS或DS/Cu处理CD34+CD38-KG1α细胞后,细胞凋亡率由空白对照组的(6.65±0.64)%分别上升至(11.87±1.30)%、(27.43±1.65)%,差异均具有显著性统计学意义(P=0.01和P<0.01);CD34+CD38-KG1α细胞ROS也分别上升了(1.39±0.12)倍和(2.81±0.11)倍,差异也具有统计学意义(P<0.03和P<0.01),并且DS/Cu组比DS组更明显(P=0.00);应用NAC抑制DS/Cu诱导ROS蓄积后,细胞凋亡率由(27.43±1.65)%下降到(12.37±0.85)%(P<0.01)。qRT-PCR结果显示DS及DS/Cu均上调TNF-α、CD40、TNFRSF1B、TNFRSF11B、HRK凋亡相关基因的mRNA水平(P<0.05),且DS/Cu组较DS组上调的更明显(P<0.05),但是予以NAC预处理2 h后,仅TNF-α基因水平依然高表达(P=0.73),而CD40、TNFRSF11B、TNFRSF1B、HRK基因水平均明显下调(P<0.05)。为进一步证实TNF-α作用,分别予以TNF-αm Ab(2μg/m L)或Ig G(2μg/m L)预处理2 h后,TNF-αm Ab+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS相对变化率由(2.78±0.25)倍下降到(1.28±0.17)倍(P=0.00),而Ig G+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS相对变化率无显著性差异(P=0.23),TNF-αm Ab及Ig G组相比空白对照组的ROS水平无显著性差异(P=0.09和P=0.50)。结论 DS/Cu可通过上调TNF-α表达及蓄积ROS诱导AML干细胞凋亡。 周勇 钟文彬 陈凯 董慧娟 闫道广 周淑云 徐兵关键词:CU ROS ORP8与SPAG5相互作用并影响细胞周期 2011年 目的:筛选与氧化固醇结合蛋白相关蛋白8(Oyxterol binding protein related protein 8,ORP8)相互作用的蛋白质,为揭示ORP8在细胞中的功能及其机制提供线索,并根据相互作用蛋白质初步探索ORP8的功能。方法:构建重组诱饵质粒pGBKT7-ORP8m,利用GAL4酵母双杂交系统筛选人Universal cDNA文库,筛选出与ORP8相互作用的蛋白质,通过GSTPull-down以及免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)验证蛋白质相互作用,并通过流式细胞仪检测过表达ORP8对HepG2细胞周期的影响。结果:酵母双杂交筛选得到了精子相关抗原5(Homo sapiens sperm associated antigen 5,SPAG5),体外GSTpull-down和Co-IP实验确证了ORP8-SPAG5的相互作用,流式细胞术显示ORP8过表达后与空载体相比,人肝癌细胞系HepG2的S期细胞数增加,G1期细胞数减少。结论:SPAG5是与ORP8相互作用的蛋白质,ORP8过表达影响人肝癌细胞系HepG2的细胞周期,可能通过SPAG5起作用。 罗玮 周天鸿 闫道广关键词:酵母双杂交 蛋白质相互作用 细胞周期 基于生本理念的生物学混合式教学的创新与实践 被引量:6 2015年 随着高等教育信息化的迅速发展,信息技术正以惊人的速度改变着大学生的学习方式,混合式教学在教育领域日益受到重视。混合式教学是学习理念的一种提升,这种提升可以使得学生的认知方式发生改变,教师的教学模式、教学策略、角色也都发生改变。本文作者构建了生物学混合式教学模式,以及MOOC、翻转课堂、微课、WIKI平台等教学方法在混合式教学模式中的应用。 黄柏炎 周天鸿 闫道广 杨维东关键词:网络教学资源 混合式教学 研究性学习 网络教学平台 miR-31-5p在急性髓系白血病中的应用 本公开涉及miR‑31‑5p在急性髓系白血病中的应用,其中包括检测miR‑31‑5p的产品在制备用于辅助诊断受试者患有急性髓系白血病(AML)和/或用于预后受试者生存期的试剂、芯片或试剂盒中的用途,以及miR‑31初始/... 闫道广 钟文彬