耿宜萍
- 作品数：32 被引量：85H指数：6
- 供职机构：西安交通大学生命科学与技术学院生物医学信息工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省卫生厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白血病瘤苗对小鼠巨噬细胞作用的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 :探讨自制的一种白血病瘤苗对C5 7BL 6小鼠Mφ杀伤功能的影响。 方法 :建立白血病荷瘤小鼠模型 ,用自制的 3种不同的白血病瘤苗进行预防或主动免疫治疗 ,用MTT比色法检测预防或治疗 2周、4周后小鼠Mφ杀伤活性 ,并与对照组比较。结果 :(1)随着白血病细胞在小鼠体内的生长 ,小鼠的Mφ免疫功能受到严重抑制。 (2 )灭活肿瘤细胞 +IFA +细胞因子 (rGM CSF +rIL 2 +rIL 6 )的肿瘤疫苗在提高小鼠的Mφ免疫功能方面 ,优于灭活肿瘤细胞 +IFA肿瘤疫苗 ,而仅含灭活肿瘤细胞的疫苗作用不明显。结论 :灭活肿瘤细胞 +IFA +细胞因子 (rGM CSF +rIL 2 +rIL 6 )的肿瘤疫苗可以激活以Mφ为代表的非特异性细胞免疫功能 ,如非特异性细胞毒、免疫监视、抗原递呈等功能 ,为进一步活化T淋巴细胞打下基础 ,此种疫苗在血液恶性肿瘤的特异性主动免疫治疗中很有潜力。
- 赵万红何爱丽张王刚王一理耿宜萍田玮宋长琐
- 关键词：白血病小鼠巨噬细胞肿瘤疫苗免疫治疗
- 人乳头瘤病毒18型L1-E6、E7嵌合基因DNA疫苗的体内免疫效应被引量：6
- 2004年
- 目的 :检测HPV 18L1 E6、E7嵌合基因DNA疫苗在小鼠体内的体液和细胞免疫效应。方法 :将实验动物BALB/c小鼠 5 4只随机分为 9组 ,按不同免疫方式 (肌肉接种或鼻内滴注 )分别给予不同的重组质粒 (pVAX1 L1 E6M3或pVAX1 L1 E7M3)和免疫佐剂 (pLXHDmB7 2或LTB)。用免疫原免疫 3次 ,末次免疫后取眼球后血进行ELISA抗体检测。末次免疫后进行小鼠足垫迟发型超敏反应 (DTH)试验。断足进行小鼠足垫HE染色。取小鼠脾脏制成单细胞悬液 ,进行脾细胞增殖试验 ,并进行CD4 + /CD8+ T细胞中IFN γ+ 或IL 4 + 细胞的FACS分析。结果 :与对照组相比 ,各实验组均获得明显的免疫效果。实验组免疫后血清抗体A值均高于相应组别免疫前 ;肌肉注射组每次免疫后抗体水平较前次明显升高。实验组小鼠注射VLP抗原的左后足垫局部有红肿硬结 ,镜下观察可见大量单核细胞侵润。肌肉接种组的DTH反应强度、脾细胞增殖刺激指数 (SI)和CD8+ IFN γ+ 细胞数均高于鼻内滴注组 ;而鼻内滴注组CD4 + IL 4 + 细胞数高于单纯质粒肌肉接种组 ;加入pLX HDmB7 2的联合免疫组各项指标均高于单纯质粒组。结论 :证实了重组pVAX1 HPV18L1/E6、E7嵌和基因DNA疫苗能诱导小鼠的体液免疫和细胞免疫效应。同时 ,证实B7 2分子能显著提高该质粒在小鼠体内的免疫反应?
- 李昂杨谨来宝长耿宜萍王艳王一理司履生
- 关键词：人乳头瘤病毒18型DNA疫苗免疫效应
- 抗B7.1分子不同亚区单克隆抗体的制备被引量：1
- 2001年
- 陈梅珍司履生王一理耿宜萍刘天菊
- 关键词：单克隆抗体
- B7.1cDNA基因免疫抗移植瘤生长的实验研究
- 1999年
- 采用分子生物学、细胞生物学及病理学技术,研究B7.1cDNA基因免疫对移植瘤生长状况的影响。在实验中首先提取、纯化B7.1cDNA真核表达质粒,经鉴定证实后以其免疫小鼠。在免疫鼠背部皮下接种SP2/0细胞,观察移植瘤在实验鼠体内生长状况。结果见B7.1cDNA免疫组接种SP/0细胞后,肿瘤的发生率仅为8％,明显低于对照组(100％),且免疫组小鼠的肿瘤生长缓慢,小鼠存活时间延长,经统计学处理,其结果有显著性差异,提示B7.1cDNA基因免疫有明显的抗移植瘤生长作用。
- 陈梅珍司履生王一理耿宜萍刘天菊
- 关键词：移植肿瘤B7分子CDNA基因
- 在单个细胞水平上对非小细胞肺癌胸水淋巴细胞细胞因子的表达被引量：3
- 2000年
- 目的 分析非小细胞肺癌癌性胸水细胞中影响免疫状态的 7种细胞因子的表达 ,初步探讨肿瘤局部免疫微环境对抗肿瘤免疫应答的影响 ,揭示肿瘤逃逸机制。方法 应用原位杂交技术检测非小细胞肺癌癌性胸水和结核性胸膜炎炎性胸水细胞中IL 2、INF γ、IL 1 2、IL 1 8、IL 1 0、IL 4、TGF β1mRNA表达 ,比较其差异并进行半定量分析。结果 非小细胞肺癌癌性胸水细胞中IL 1 0、TGF β1、IL 4表达者显著高于IL 2、INF γ、IL 1 2、IL 1 8,且显著高于对照组。结核患者表达的各细胞因子水平均较低 ,且各因子的表达细胞数量相互间无显著性差异。结论 非小细胞肺癌患者癌性胸水细胞中Ⅱ型细胞因子表达者占主导地位 ,IL 1 0和TGF β1共同高表达 ,提示二者可能共同作用 。
- 李睿王一理司履生杨岚李蓉耿宜萍来宝长
- 关键词：非小细胞肺癌细胞因子原位杂交胸水
- 人重组TNF-α突变体471蛋白的初步纯化及生物学活性被引量：3
- 2003年
- 目的 :在利用原核表达系统表达重组人突变体 4 71TNF α蛋白的基础上 ,对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测。方法 :利用最佳发酵和表达条件 ,诱导基因重组的人突变体4 71TNF α工程菌表达目的蛋白。收集菌体 ,经超声破碎 ,分离人突变体 4 71TNF α的包涵体 ,并观察变性剂及蛋白浓度对蛋白折叠的影响。采用MTT比色法检测并比较人野生型及突变体 4 71TNF α的生物学活性。结果 :在适当的变性与复性条件下 ,已成功地将突变体 4 71TNF α折叠并聚合形成具有生物学活性的三聚体。突变体 4 71TNF α对L92 9的细胞毒活性高于野生型TNF α的 15倍。结论 :原核表达系统中表达的人突变体 4 71TNF α经复性处理后具有显著的生物学活性 。
- 李瑶琛孔令洪王一理尚宁宽耿宜萍司履生
- 关键词：蛋白纯化MTT比色法生物学活性
- 人乳头瘤病毒16 E6蛋白单克隆抗体的研制
- 1995年
- 运用杂交瘤技术，我们成功地建立了两株能稳定分泌小鼠抗人乳头瘤病毒１６Ｅ６蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。经鉴定单克隆抗体均属ＩｇＧ１ｋ。试验结果表明，所得单克隆抗体仅与ＨＰＶ１６Ｅ６融合蛋白反应，不与ＨＰＶ１６Ｅ７、Ｌ１、Ｌ２融合蛋白以及Ｌ１－Ｌ２真核表达蛋白反应，也只与Ｃａｓｋｉ细胞反应，不与Ｈｅｌａ细胞反应。初步结果说明，该抗体是ＨＰＶ１６Ｅ１６蛋白特异性的ＭｃＡｂ。
- 刘培军耿宜萍司履生王一理刘钰
- 关键词：乳头状瘤病毒E6蛋白单克隆抗体宫颈癌
- 蛋白质组学方法鉴定卵巢癌转移相关蛋白被引量：5
- 2007年
- 目的探讨不同转移潜能卵巢癌细胞株蛋白表达谱差异。方法采用基于双向电泳(2-DE)-基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)蛋白质组学分析方法,对比分析具有相同来源、不同转移能力的卵巢癌细咆系 HO8910和 HO8910pm 的总蛋白表达谱差异。结果 2-DE分析发现两株细胞间有39个蛋白表达水平差异在2倍以上,MALDI-TOF-MS 鉴定出其中18种蛋白,它们涉及细胞凋亡、细胞外基质、细胞骨架、生长因子、糖酵解、蛋白质代谢和免疫系统等领域。结论肿瘤转移涉及体内多种领域多种蛋白,这些领域的蛋白相互协调作用最终共同控制细胞的转移能力。
- 周乐杨筱凤王艳张盈涛耿宜萍司履生王一理
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤转移蛋白质组学
- 白血病瘤苗对正常小鼠免疫作用的观察被引量：1
- 2003年
- 目的 观察自制的一种白血病瘤苗对C57BL/ 6小鼠一般状况 、抵御FBL 3细胞的攻击及小鼠免疫功能的影响。方法 用自制的白血病疫苗 ,内含灭活的FBL 3细胞 +不完全弗氏佐剂 (incompletefoundadjuvant,IFA) +细胞因子(rIL 2、rIL 6、rGM CSF) ,皮下注射免疫C57BL/ 6小鼠 ,用FBL 3细胞皮下注射攻击小鼠 ,观察小鼠一般状况、成瘤率、瘤块生长情况 ;用病理学方法了解瘤块及疫苗注射部位病理变化 ;用MTT比色法检测小鼠巨噬细胞 (macrophage ,Mφ)及细胞毒性T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)杀伤活性。 结果 与对照组相比 ,发现自制成的白血病瘤苗能有效的提高小鼠的细胞免疫功能 ,Mφ及CTL杀伤活性明显提高 ,用FBL 3细胞攻击 ,小鼠成瘤率低 ,成瘤小鼠瘤块生长缓慢 ,瘤周单个核细胞浸润明显 ,瘤块内瘤细胞坏死明显。结论 所用白血病疫苗制备简单 ,疗效肯定 ,副作用小 。
- 赵万红张王刚何爱丽王一理耿宜萍田玮宋长琐
- 关键词：白血病小鼠免疫作用肿瘤疫苗细胞毒性
- 宫颈癌患者外周血中的人乳头瘤病毒16型E6及E7蛋白特异性致敏淋巴细胞的检测被引量：3
- 1995年
- 本研究证明进展期宫颈癌患者10/37例和10/46例外周血中分别存在有HPV16 E6和E7蛋白致敏的淋巴细胞,而40例献血员中分别为12.5％(5/40)和17.5％(7/40)。46例中有17例和25例分别进行了宫颈癌组织中的HPV16E6和E7基因序列检测,E6蛋白致敏淋巴细胞阳性的6例中检出与未检出E6序列的各占3例,E7蛋白致敏淋巴细胞阳性的5例中有3例未检出,有2例检出E7序列。
- 刘华刘天菊耿宜萍司履生范俊杰刘孜刘惠喜张明惠
- 关键词：人乳头瘤病毒子宫颈癌
