白雪梅 作品数:27 被引量:102 H指数:6 供职机构: 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
肉鸡养殖场中耐药相关基因散播情况的调查研究 被引量:8 2020年 为研究耐药相关基因在肉鸡养殖场中的分布流行情况,本研究以河北省肉鸡养殖场待出栏肉鸡为研究对象,采用随机抽样方式采集肉鸡泄殖腔拭子样品264份,粪便污染地面样品9份,进行bla NDM、bla OXA、bla CTX-M、arm A、fex A、cfr、mcr-1、qnr S 8种耐药基因和int 1、IS CR 12种与耐药基因散布密切相关基因的实时荧光定量PCR检测。结果显示,10种基因在273份样品中均有不同程度检出,检出率在4.03%~97.07%之间,检出率最低的为arm A基因,最高的为int 1基因;样品中有基因共存情况,并以3种耐药基因共存的情况最多,有4份样品存在1种耐药基因,6份样品未检出任何耐药基因,没有样品共存8种耐药基因;通过数据分析,共得到41种不同的耐药基因谱型,其中常见的耐药基因谱型为bla CTX-M-fex A-mcr-1和bla OXA-bla CTX-M-fex A-cfr-mcr-1-qnr S;分析发现样品携带两种及以上耐药基因时,与耐药基因散布相关的int 1和IS CR 1元件检出率越高,耐药基因在样品中检出的种类越多;耐药基因bla OXA、bla CTX-M、fex A、cfr、mcr-1、qnr S与int 1基因的共存有统计学意义(P<0.05);耐药基因bla NDM、bla OXA、bla CTX-M、fex A、cfr、qnr S与IS CR 1元件的共存有统计学意义(P<0.05)。本研究为畜牧兽医养殖行业耐药性监测工作提供了基于样品的新型实时荧光定量PCR检测方法,为有效预防耐药菌、耐药基因产生、控制耐药性的快速传播提供了可靠的数据支持。 陈霞 车洁 骆鹏杰 张云飞 赵晓菲 袁敏 白雪梅 李文革 李娟关键词:肉鸡 耐药基因 北京市伴侣动物源肠球菌的抗菌药物耐受情况调查 被引量:5 2020年 为研究北京市伴侣动物源肠球菌对常见抗菌药物的耐受情况,于2015年5月至2016年1月以北京市某宠物医院门诊就诊犬、猫作为采样对象,采集犬、猫自然排出的粪便作为样品,共得到样本320份。采用选择性培养基进行菌株分离和VITEK-2型全自动微生物分析仪进行肠球菌的鉴定;对分离鉴定的菌株进行8类11种常见抗菌药物敏感性试验;同时进行高水平庆大霉素和高水平链霉素耐受的检测试验,对受试肠球菌的耐药性和多重耐药性进行分析。共得到菌落形态及生化特性不同的非重复的肠球菌318株,其中粪肠球菌(49.06%)和屎肠球菌(29.87%)分离率较高。受试肠球菌对高水平庆大霉素和高水平链霉素的耐药率分别为39.94%和43.40%,对四环素(78.62%)、红霉素(67.30%)和奎诺普丁-达福普汀耐药率(43.71%)较高,对替加环素全部敏感,对万古霉素和呋喃妥因非耐药率也很高(均为98.74%)。受试肠球菌对1类到7类抗菌药物有不同程度的耐药性,多重耐药现象普遍,多重耐药率高达57.23%。耐受4类抗菌药物的数量最多(n=65株)。经分析共得到44种不同的耐药谱,以耐受4类药物的红霉素-奎诺普丁-达福普汀-四环素-高水平氨基糖苷类耐药谱占比最高(45/318,14.15%)。本研究证实受试的北京市伴侣动物源肠球菌对常见抗菌药物的耐药程度较高,多重耐药情况普遍存在,应加强对其耐药性的监测工作。 陈霞 赵晓菲 白雪梅 车洁 张云飞 袁敏 李娟关键词:伴侣动物 肠球菌 耐药性 多重耐药性 527株肉鸡源大肠埃希菌的药物敏感性特征研究 被引量:2 2020年 目的研究河北省肉鸡养殖场分离的大肠埃希菌对常见抗菌药物的耐药情况。方法2017年3月,在河北省某2处大型肉鸡养殖场中选择38日龄的待宰肉鸡作为采样对象。将鸡舍分为5个区域采用单纯随机方法进行肉鸡泄殖腔拭子样品的采集,共得到样本273份。采用选择性培养基进行菌株分离,用VITEK~?-2型全自动微生物分析仪进行大肠埃希菌的鉴定和对10类18种常见抗菌药物的敏感性测试,并同时进行产超广谱β内酰胺酶(ESBL)的检测。结果经分离共得到菌落形态及生化特性不同的非重复的大肠埃希菌527株,产ESBL菌株占90.13%(475/527),对碳青霉烯类的厄他培南、美罗培南和亚胺培南的敏感率均为99.43%,对阿莫西林的耐药率最高,为99.24%。对四环素、环丙沙星、哌拉西林、氨曲南、左氧氟沙星的耐药率分别为94.88%、78.94%、78.37%、77.80%、70.40%。527株大肠埃希菌的多重耐药率为98.10%,且多重耐药菌株均产ESBL。耐受6类抗菌药物的菌株最多,占35.86%(189/527)。经分析共得到58种耐药谱,耐受青霉素类-头孢菌素类-氨曲南-氨基糖苷类-氟喹诺酮类-四环素-复方新诺明的菌株比重最高,占15.40%。结论肉鸡源大肠埃希菌对常见抗菌药物的耐药程度较高,多重耐药情况普遍存在,应加强对动物源菌株耐药性的监测和合理的轮换用药策略。 陈霞 赵晓菲 车洁 张云飞 袁敏 白雪梅 李娟关键词:肉鸡 大肠埃希菌 耐药性 多重耐药性 猪链球菌血清未分型菌株的荚膜多糖基因簇分析 被引量:2 2016年 目的从基因水平上探究猪链球菌菌株血清不可分型的原因及cps基因簇序列变异规律。方法根据Gen Bank登记号下载并提取41株猪链球菌血清未分型菌株的cps基因簇序列,根据wzy序列确定菌株的cps型别,并与相应血清型标准菌株的cps基因簇进行序列比对研究。结果 41株血清未分型猪链球菌中,共有37株菌的cps型别属于已知血清型。其中18株与其对应的血清型标准菌株的cps基因簇相比出现部分cps基因的插入、缺失、倒转、替换和移码突变等变异;另有19株与其对应的血清型标准菌株的cps基因簇序列相同或相似,除携带血清24型cps基因簇的菌株LSS23、LSS31、LSS37与血清24型标准菌株88-5299A的cps基因簇同源性为96%外,其余16株与其各自的标准菌株的cps基因簇同源性均超过99%。此外,有4株血清未分型菌株属于已知的新cps型别。结论由于猪链球菌cps基因簇序列变异频繁,导致荚膜多糖抗原型别呈多样化趋势,传统的血清凝集方法无法有效应对,亟需引入更灵敏的分子血清分型技术开展监测。 邱小彤 郝琴 白雪梅关键词:猪链球菌 基因特征 实时荧光定量聚合酶链反应检测血清2型猪链球菌的研究 2011年 目的基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术,建立针对血清2型猪链球菌的快速检测方法。方法针对血清2型猪链球菌的csp2 J基因序列,应用Beacon Designer 7.0,设计了引物和TaqMan-MGB探针,建立Real-time PCR检测方法;把目的片段克隆到pMD18-T载体制作标准曲线;以常见致病菌及条件致病菌验证引物探针的特异性;制备血液模拟标本评价本方法在临床标本中的应用。结果由标准曲线可知该方法可以检测到100拷贝/反应体系的目的基因,特异性检测显示只有血清2型猪链球菌有荧光信号,其他常见致病菌及条件致病菌均无荧光信号,血液模拟标本中3.9×102cfu/m l的细菌含量可被检出。结论以csp2 J为目的基因建立的血清2型猪链球菌Real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性好、快速,可用于临床感染患者标本的初步筛查。 白雪梅 张少敏 孙晖 叶长芸关键词:猪链球菌 REAL-TIME PCR TAQMAN-MGB探针 大肠埃希菌O157:H7分离株MLVA分子分型 被引量:6 2011年 目的了解国内大肠埃希菌O157:H7菌株的分子流行特征。方法采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)方法对1999-2002年江苏、河南、安徽、山东、云南等地的大肠埃希菌O157:H7分离株135株进行分子分型,选取7个可变数目串联重复序列(VNTR)位点,应用PCR技术及毛细管电泳方法,检测分离株DNA多态性,使用BioNumerics软件进行聚类分析。结果 135株大肠埃希菌O157:H7可分为3个群(A群、B群、C群)38个MLVA型别,其中A群占20.7%(28/135)、B群占23.7%(32/135)、C群占55.6%(75/135);MLVA型别存在一定地域性,同一暴发来源的菌株具有相同MLVA型别。结论大肠埃希菌O157:H7国内分离株存在丰富的基因多态性;MLVA方法具有较高分子分型能力,可以在溯源和流行病学调查中发挥重要作用。 王涛 綦廷娜 刘凯 赵爱兰 白雪梅 叶长芸 熊衍文关键词:大肠埃希菌O157:H7 分子分型 猪链球菌四环素耐药性与Tn916接合型转座子的关系 被引量:3 2010年 目的研究我国分离的血清2型猪链球菌四环素耐药性与Tn916接合型转座子的关系。方法采用微量稀释法进行药物敏感性检测,PCR方法检测四环素耐药基因及Tn916接合型转座子。结果我们检测了56株我国分离的血清2型猪链球菌及12株国外分离的血清2型猪链球菌,56株我国分离株均对四环素耐药并且携带四环素耐药基因tet(M),我国猪链球菌携带的tet(M)基因位于接合型转座子Tn916上。12株国外分离株有7株对四环素耐药,这7株菌携带四环素耐药基因tet(O)并且Tn916检测为阴性。结论 Tn916上的tet(M)基因编码了我国血清2型猪链球菌的四环素耐药性,我国血清2型猪链球菌可能在进化过程中通过水平转移的方式获得了Tn916接合型转座子。 白雪梅 赵爱兰 张少敏 王忆婷 孙晖 叶长芸关键词:猪链球菌 37株枸橼酸杆菌的耐药性及PFGE分型分析 2009年 目的了解食品及患者来源的37株枸橼酸杆菌的耐药性、毒力基因携带及PFGE的分型情况。方法运用K-B法选择15种抗生素进行药敏试验;以PCR方法检测志贺样毒素(stx1和stx2)、紧密素基因(eae)及溶血素(hly)4种毒力基因;用脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)方法进行同源性分析。结果37株枸橼酸杆菌中,25株为杨氏枸橼酸杆菌,11株为弗劳地枸橼酸杆菌,1株为布雷克氏枸橼酸杆菌。分离菌株对大多数抗生素敏感,但对头孢噻吩100%耐药。其毒力基因检测均为阴性。PFGE结果发现不同菌株带型差异较大。其中5株食品来源,1株为人来源的杨氏枸橼酸杆菌同为MAS007型,具有流行病学相关性。结论该地区枸橼酸杆菌主要以杨氏枸橼酸杆菌为主;部分菌株具有多重耐药,应加强菌株的耐药性监测;脉冲场凝胶电泳对枸橼酸杆菌有较好的分型能力,有助于分析追踪疫情和来源;患者可能存在食源性感染,应引起疾控部门的重视。 白莉 汪永禄 金东 白雪梅 周海健 刘燕 陶勇 石志峰 叶长芸 徐建国关键词:枸橼酸杆菌 耐药性 脉冲场凝胶电泳 2017年9月至2018年5月云南省某院新生儿肠道耐药肠杆菌目细菌筛查及耐药性分析 2024年 目的 了解产科病房新生儿肠道中耐药肠杆菌目细菌携带状况及菌株特征。方法 收集2017年9月至2018年5月间云南省某医院产科病房新生儿粪便样本277份,通过超广谱β-内酰胺酶(ESBL)显色培养基分离培养、菌株药物敏感检测及代表菌株Illumina基因组测序,分析新生儿肠道耐药菌携带状况,菌株耐药表型、耐药基因型及序列分型(STs)特征。结果 277份样品中113份样品ESBL显色培养基培养阳性,阳性率40.79%。分离鉴定出4个属11个种的113株肠杆菌目细菌,其中,克雷伯属53.10%(60/113),埃希菌属30.10%(34/113),肠杆菌属15.04%(17/113)及勒克氏菌属1.77%(2/113)。菌株呈现多重耐药性,除对二代、三代头孢菌素高度耐药外,对其他种类代表抗菌药物耐药率分别为厄他培南52.21%(59/113)、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑72.57%(82/113)、四环素65.49%(74/113)和环丙沙星54.87%(62/113)。挑选84株代表菌株完成基因组序列分析,共筛查到70种耐药基因,携带率较高的有sul1(84.52%,71/84)、fos A(71.43%,60/84)、tet(A)(67.86%,57/84)、bla_(SHV)(63.10%,53/84)和bla_(NDM)(61.90%,52/84)基因。53株肺炎克雷伯菌呈现优势克隆型集中分布,ST17型占比达92.45%(49/53),且均携带bla_(NDM-1)基因,其他种属菌株ST型别呈多样性。检出携带bla_(NDM-1)的阴沟肠杆菌、霍氏肠杆菌,携带bla_(IMP-26)的格氏克雷伯菌,携带bla_(IMP-1)的勒克氏菌和携带mcr的阿氏肠杆菌、霍氏肠杆菌及赫氏埃希菌。结论 本研究发现了某产科病房新生儿肠道高比例携带ESBL耐药肠杆菌,揭示了耐药菌株极易在新生儿间传播和肠道定植,应高度重视新生儿耐药菌环境暴露风险及对其肠道微生态建立的影响。 姜雪琪 贾森泉 白雪梅 孙静 刘泽梁 龚心怡 苗贝贝 李杰 孟双 尹建雯 李娟关键词:新生儿 超广谱Β-内酰胺酶 多重耐药菌 耐药基因 我国分离的大肠埃希菌O157∶H7的毒力基因检测分析 被引量:15 2010年 目的了解我国部分省区分离的大肠埃希菌O157∶H7菌株特异基因和毒力基因携带特点及在不同动物宿主来源的菌株分布情况。方法采用PCR对分离菌株的O157、H7抗原特异基因rfbEO157、fliCH7以及stx1、stx2、eaeA和hlyA四种毒力基因进行检测。结果在1992-2006年收集的O157及H7抗原阳性的345株大肠埃希菌株中,rfbEO157、fliCH7特异基因均为阳性,eaeA和hlyA的阳性率分别为99.4%和99.1%,stx2的阳性率为91.9%,stx1阳性率仅为13.3%,stx1+stx2的阳性率为13.0%,来源于病人和动物菌株的stx2阳性率均高于stx1。检测菌株中毒力基因型以eaeA+hlyA+stx2为主。携带毒力基因的O157∶H7菌株在羊、牛等动物宿主中广泛存在。结论 stx2是病人及羊、牛等动物来源的产志贺毒素大肠埃希菌O157∶H7携带的主要毒素基因型。 王涛 刘丽云 王娉 熊衍文 白雪梅 叶长芸 徐建国关键词:毒力基因