白杨
- 作品数:9 被引量:35H指数:4
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学军事更多>>
- PC-Windows平台三维重组技术在活体供肾移植中的应用被引量:4
- 2007年
- 目的探讨PC-Windows平台上重组活体肾移植供体肾脏及其血管立体图像的方法,在供肾摘取术前和术中对临床手术医师提供指导。资料与方法10名亲属活体肾移植供者行CT薄层扫描,图像以DICOM格式保存,在PC-Windows XP平台上读入TGS Amira3.1软件后,通过图像裁剪、分割、三维重组等步骤进行处理。结果获得了供体肾脏及其血管解剖结构的立体图像和动画演示,其结果方便其他PC机查看,并可按要求输出。合成结果显示8名供体双侧肾脏均为单支动脉供应,2名供体存在副肾动脉,均符合术中所见。结论该项技术为活体肾移植中移植肾的术前评估和术中切取提供了便利,准确性高,花费时间少,方便临床医师掌握,所需设备价格低廉,对CT工作站是一个有益的补充,临床医师可以根据实际需要灵活机动地对CT图像进行处理,更好地指导临床工作。
- 王振迪李恒曾甫清叶哲伟梁波白杨夏伟
- 关键词:肾移植活体
- 流式细胞仪富集大鼠A1-A4型精原干细胞被引量:3
- 2008年
- 目的:探讨A型精原干细胞的A1-A4亚型细胞的分离纯化方法。方法:先使用不连续密度梯度法分离A型精原细胞,再经流式细胞分选技术分选有干细胞因子受体(c-kit)表达的亚型细胞。并采用免疫组化检测c-kit在睾丸中的表达,电镜下观察分选后细胞超微结构。结果:经密度梯度分离后的精原细胞内含c-kit阳性细胞比例为(18.65±1.69)%,未经密度梯度分离的睾丸细胞内含c-kit阳性细胞比例为(3.16±0.84)%,两者比较差异有显著性(P〈0.01);c-kit阳性细胞经流式细胞术分选,阳性细胞回收率(65.90±1.24)%,活性(85.60±1.14)%。结论:以c-kit为标记物,经不连续密度梯度分离初步纯化后,使用流式细胞分选技术能有效分离A型精原干细胞亚型。
- 白杨叶哲伟曾甫清
- 关键词:精原干细胞流式细胞术
- 尿中肿瘤标志物与膀胱癌被引量:2
- 2005年
- 白杨曾甫清
- 关键词:膀胱肿瘤肿瘤标志物尿分析
- 精原细胞分化过程中c-kit mRNA和蛋白的表达被引量:8
- 2008年
- 目的探讨不同发育阶段大鼠睾丸内c-kit的表达特点。方法采用RT-PCR、免疫组化、Western blot方法分别检测1日龄、9日龄、1月龄大鼠睾丸内c-kit mRNA和蛋白的表达,并进行半定量分析。结果1日龄、9日龄和1月龄大鼠睾丸内均有c-kit mRNA和蛋白的表达,9日龄组大鼠睾丸内c-kit mRNA表达水平(0.2040±0.0048)和蛋白表达水平(3.7263±0.0087)显著高于1日龄组(0.0825±0.0071,2.4270±0.0982)和1月龄组(0.1034±0.0064,2.6532±0.1150)大鼠(均P<0.01),1日龄组与1月龄组c-kitmRNA和蛋白表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论c-kit的表达与精原细胞分化有直接关系,c-kit是精原细胞走向分化的标志。
- 白杨夏伟叶哲伟曾甫清
- 关键词:精原细胞C-KIT细胞分化
- 大鼠pEGFP-N1-PLZF真核表达载体的构建和意义
- 2007年
- 目的构建真核表达载体pEGFP-N1-PLZF,为基因水平研究早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)在精原干细胞增殖和分化中的调控机制提供理论参考。方法参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增PLZF,将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,以构建重组质粒pEGFP-N1-PLZF。结果实验从大鼠睾丸组织中提取总RNA,以RT-PCR方法获取编码PLZF基因的全序列cDNA。构建PLZF的cDNA真核表达质粒时将能发出绿色荧光的EGFP报告基因融合在PLZF基因,并经酶切后DNA电泳鉴定及DNA测序证实结果。结论构建重组质粒pEGFP-N1-PLZF成功,实验中将能发出绿色荧光的EGFP报告基因融合在PLZF基因的3’端。提高PLZF在真核细胞中的表达,而且不影响其目的蛋白的结构和功能,对研究PLZF调控精原干细胞增殖和分化机制具有重要的意义。
- 夏伟白杨曾甫清王振迪叶哲伟
- 关键词:PLZF基因表达绿色荧光蛋白
- 大鼠睾丸中c-kit的表达特点与精原干细胞的分化被引量:14
- 2007年
- 白杨叶哲伟曾甫清
- 关键词:C-KIT精原干细胞分化睾丸
- 线粒体促凋亡蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义被引量:1
- 2008年
- 目的检测线粒体促凋亡蛋白(Smac)在膀胱移行上皮细胞癌(TCC)中的表达并探讨其临床意义。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学SP法分别在基因和蛋白水平检测Smac在15例正常膀胱黏膜和72例TCC中的表达。结果Smac蛋白和mRNA在正常膀胱黏膜与分化Ⅰ级TCC中均有较强表达,两者差异无统计学意义(P〉0.05),在TCC中的表达随分级的增加都显著性减少(P〈0.01,P〈0.05)。浸润性TCC中Smac蛋白和mRNA的表达都低于表浅性TCC(P〈0.01)。结论Smac在正常膀胱黏膜强表达,而在TCC中低表达,且与TCC的分级分期密切相关,检测Smac可辅助临床TCC分级、分期的判断。
- 李恒廖贵益曾甫清白杨王竞
- 关键词:膀胱肿瘤脱噬作用凋亡蛋白线粒体
- 胶质细胞源性神经营养因子对体外培养大鼠精原干细胞PLZF和c-Kit表达的影响被引量:6
- 2010年
- 目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠原代培养的精原干细胞(SSC)早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)、原癌基因c-Kit基因转录及表达的影响。方法采用含不同浓度GDNF(0、10、50、100ng/m1)的DMEM培养液原代培养大鼠SSC。RT-PCR检测SSC中PLZFmRNA、c-Kit mRNA水平,蛋白质印迹法检测PLZF、c-Kit蛋白表达情况。结果对照组和GDNF10ng/ml组细胞随着培养时间延长,生长速度无明显变化,而GDNF50和100ng/ml组细胞生长速度明显加快。对照组PLZF和c-KitmRNA表达量分别为0.28±0.13、0.65±0.21,GDNF10ng/ml组分别为0.27±0.14、0.62±0.19,与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05);GDNF50ng/ml组分别为0.64±0.28、0.34±0.15,与对照组比较差异均有统计学意义(P〈0.05);GDNF100ng/ml组分别为0.68±0.27、0.28±0.18,与50ng/ml组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。对照组PLZF和c-Kit蛋白表达量分别为0.34±0.13、0.72±0.27;GDNF10ng/ml组分别为0.38士0.18、0.69土0.26,与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05);GDNF50ng/ml组分别为0.68±0.26、0.35±0.15,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);GDNF100ng/ml组分别为0.70±0.27、0.32±0.11,与50ng/ml组比较差异无统计学意义(P2〉0.05)。结论随着GDNF浓度增加,SSC增殖水平升高,而分化受抑制。GDNF对SSC增殖和分化有一定的调控作用。
- 夏伟曾甫清叶哲伟白杨
- 关键词:精原细胞胶质细胞源性神经营养因子原癌基因蛋白质C-KIT
- 大鼠pEGFP-PLZF真核载体的构建及在精原细胞中的表达
- 2007年
- 目的:构建真核表达重组质粒pEGFP-N1-PLZF,并了解其在大鼠精原细胞中的融合蛋白表达情况。方法:参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF),将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,并用双酶切、测序进行鉴定;将重组质粒用脂质体转染的方法导入精原细胞中,观察有无荧光的表达及用Western blot检测蛋白表达情况。结果:实验从大鼠睾丸组织中获取了编码plzf基因的全序列cDNA,产生了2 kb的目的插入片段,与pEGFP-N1载体连接后经酶切电泳鉴定及DNA测序证实序列正确;重组质粒转染精原细胞24 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,并用Western blot检测到106 kD目的蛋白的表达。结论:新构建的重组质粒pEGFP-N1-PLZF通过鉴定,结构正确。转染到精原细胞后能在其中表达,发挥功能,为后续研究奠定了基础,对研究PLZF调控精原细胞增殖和分化机制具有重要的意义。
- 夏伟白杨叶哲伟曾甫清邬喻
- 关键词:重组质粒绿色荧光蛋白精原细胞