田菊
- 作品数：16 被引量：13H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染被引量：7
- 2012年
- 目的探讨超声介导自制阳离子微泡破坏、增强基因转染的效果,并与普通脂质微泡对比,寻找一种更可靠、完善的基因载体工具。方法采用水浴机械震荡法,加入DC-胆固醇制备阳离子微泡,观察其物理特性并检测其体外载基因能力。将微泡和质粒DNA加入人脐静脉血管内皮细胞后分为6组,观测不同微泡浓度对细胞存活率的影响,应用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测基因转染率,MTT法分析细胞存活率。结果自制阳离子微泡形态规整、分散度好,最大载基因率为39.7%。超声联合阳离子微泡能够增强基因转染,与普通脂质微泡组相比差异有统计学意义;随着微泡浓度增加,细胞损伤增大。结论采用自制阳离子微泡可在体外实现较高效率的基因转染。
- 张清凤王志刚李攀郑元义田菊王星
- 关键词：超声微泡造影剂基因转移技术
- 多靶点多模态超声微泡造影剂的研究进展被引量：1
- 2011年
- 目前,医学影像学在临床诊断和科学研究中已得到广泛运用,由于各种成像方式所依赖的原理和成像的物质基础不同,使其具有各自的优缺点,没有哪一种成像模式可以完整且足够地获取人体的所有信息,在临床运用中它们可以互相补充,但由于它们所需的造影剂类型不同,给临床应用带来诸多不便,比如：不仅给患者带来经济压力,多次造影也会给患者造成心理和生理的痛苦;而且一种造影会给另一种检查造成影响,增加了诊断疾病的时间.近年来各种造影剂的研究和开发应用取得了很大发展,一种新型微泡造影剂脱颖而出,该种造影剂为内含不同气体成分的微气泡,其微囊材料多数为表面活性剂类、人血蛋白质类、脂类及可降解的高分子材料等.
- 田菊王志刚
- 关键词：超声微泡造影剂多模态多靶点医学影像学
- 叶酸介导靶向高分子造影剂的制备及体外识别研究
- 2012年
- 目的合成叶酸介导靶向的聚乳酸共聚物，以其为靶向膜材制备靶向造影剂，表征造影剂性质。方法以自制的叶酸-脯氨酸-乳酸共聚物（Fa—PLLA—Hpr）为膜材，应用双乳化-冷冻干燥法制备叶酸介导靶向高分子造影剂（MB—Fa—PLLA）。采用激光粒径测量仪检测微泡的粒径，通过光镜观察该靶向造影剂（靶向造影剂实验组）对人卵巢癌SKOV3细胞的体外寻靶情况，并与游离叶酸干预组及空白对照组（普通微泡）比较。结果FT-IR表征了靶向膜材的结构。成功制备叶酸介导靶向聚乳酸共聚物MB—Fa—PLLA。MB—Fa—PLLA在光镜下大小分布均匀，形态圆整，65％的微粒直径分布为500～800nm，呈单峰分布，其亲水性较普通高分子微泡更好。体外寻靶实验显示，MB—Fa—PLLA可以较多并牢固地聚集到SKOV3细胞表面，而普通微泡未见特异性结合。结论MB—Fa—PLLA亲水性好，对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强特异性亲合力，其有望成为靶向显像叶酸高表达肿瘤的理想造影剂。
- 郝兰田菊李攀王志刚
- 关键词：叶酸
- 新型穿膜肽作为基因运输载体的实验研究被引量：4
- 2011年
- 目的人工设计合成穿膜肽新序列(CGRLWMRWYSPWARRYGC),并于体外考察其作为基因载体的潜力。方法采用Na-芴甲氧羰基(Fmoc)法固相合成穿膜肽新序列,并用异硫氰酸荧光素(FITC)标记N端。高效液相色谱及质谱仪检测其纯度及相对分子质量,流式细胞仪及共聚焦显微镜观察其穿膜能力,荧光显微镜和流式细胞仪观察其携带增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)进入细胞表达情况,MTT评价穿膜肽与质粒复合物的细胞毒性,琼脂糖凝胶电泳检测穿膜肽与质粒的亲和力及对质粒的保护作用。结果合成的穿膜肽纯度为96.13%,相对分子质量为2 348.42,流式细胞仪检测显示荧光阳性细胞平均约占98.81%,共聚焦显微镜可见荧光标记的穿膜肽分布于细胞内;穿膜肽携带质粒在人脐静脉内皮细胞中的表达率平均约为11.44%;不同电荷比的复合物对细胞的活性没有明显影响(P>0.05);琼脂糖凝胶电泳显示当穿膜肽与质粒的电荷比大于2∶1时,质粒不能迁移出来,电荷比为4∶1、8∶1和16∶1的复合物能够抵抗DNA酶Ⅰ的消化作用,以8∶1最为明显。结论人工设计合成的新型穿膜肽能够作为一种潜在的基因运输载体。
- 田菊王志刚任建丽张清凤
- 关键词：固相合成穿膜肽基因载体
- 超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染的实验研究
- 目的 肿瘤的基因治疗成为近年研究重点,其关键在于如何安全、高效地将外源基因导入细胞.转染效率较理想的病毒载体存在免疫原性、致畸变性限制了其应用,超声介导微泡破坏增强基因转染被认为是最具发展潜力的非病毒载体之一,已证实能够...
- 张清凤王志刚李攀郑元义田菊王星
- 关键词：超声基因转染
- 超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染的实验研究
- 张清凤王志刚李攀郑元义田菊王星
- 靶向载基因及穿膜肽超声造影剂转染缺氧人脐静脉内皮细胞的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨P-选择素靶向载基因及穿膜肽超声造影剂的制备及转染缺氧损伤型人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的可行性。方法采用机械振荡法及碳二亚胺法制备P一选择素靶向载绿色荧光蛋白基因及穿膜肽超声造影剂，检测其形态分布、浓度、粒径，采用激光共聚焦显微镜观察基因和穿膜肽的分布，用荧光分光光度法计算基因及穿膜肽的包封率。体外培养HUVEC，用过氧化氢处理制备HUVEC缺氧模型，并分为靶向和非靶向载基因及穿膜肽造影剂组进行转染实验。用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况，流式细胞仪检测转染率，并用SPSS17．0统计软件进行t检验及直线相关分析。结果制备的P一选择素靶向载基因及穿膜肽超声造影剂平均粒径约（2．15±0．36）u脚，计数为（1．58±0．23）×10’个／ml。激光共聚焦显微镜下观察到基因和穿膜肽均匀分布在造影剂壁上，基因和穿膜肽的包封率分别为28％[Y=0．932x一0．09（r=0．993，P〈0．05）]和25％[Y=5．875x一0．81（r=0．987，P〈0．05）]。转染24h后，荧光显微镜下观察到靶向和非靶向载基因及穿膜肽造影剂组均有绿色荧光蛋白的表达，流式细胞仪检测靶向组和非靶向组平均转染率分别约为（18．74±0．47）％和（15．34±0．22）％（t=10．923，P〈0．001）。结论P-选择素靶向载基因及穿膜肽超声造影剂能够转染缺氧损伤的HUVEC，这为靶向基因投递提供了新的思路。
- 田菊王志刚任建丽张清凤刘利
- 关键词：造影剂基因穿膜肽转染内皮细胞
- 超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染的实验研究
- 通过自制阳离子微泡，研究超声介导其破坏增强基因转染的效果，并与普通脂质微泡做对比研究，寻找一种更可靠、完善的基因载体工具。研究结果表明自制的阳离子微泡，携基因能量强，在体外可实现较高效率的基因转染，望为基因载体技术提供新...
- 张清凤王志刚李攀郑元义田菊王星
- 关键词：基因转染体外实验
- 文献传递
- 穿膜肽与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂的制备及体外靶向实验研究
- 目的：制备穿膜肽与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂，并在体外评价其靶向结合能力及转染缺氧损伤型人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的可行性。方法：采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽超声造影剂，用碳二亚胺法制备P-选择素靶向超...
- 田菊王志刚任建丽张清凤王星
- 关键词：超声造影剂穿膜肽P-选择素基因转染
- 穿膜肽与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂的制备及体外靶向实验研究
- 目的制备穿膜肽与P-选择素抗体修饰的载基因超声造影剂,并在体外评价其靶向结合能力及转染缺氧损伤型人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的可行性。方法采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽超声造影剂,激光共聚焦显微镜观察质粒DNA和穿膜...
- 田菊王志刚任建丽张清凤王星
- 关键词：穿膜肽基因转染超声造影剂靶向
- 文献传递
