田志坚
- 作品数：7 被引量：37H指数：3
- 供职机构：湖南农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技厅科研项目湖南省重大科技专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 苎麻纤维素合成酶基因cDNA的功能分析被引量：4
- 2009年
- 运用克隆的苎麻纤维素合成酶(BnCesA1)基因cDNA及植物表达载体pWM101,构建了35S启动子控制的苎麻BnCesA1基因核心区段反义融合表达载体(pWM-BnCesA),并通过根癌农杆菌介导法将其转化至模式烟草WS38,获得了转基因烟草.对转基因烟草植株进行的分子检测和初步组织学研究表明,转反义BnCesA1基因核心区段对纤维素的合成产生干扰,植株叶柄切片初生组织细胞较野生烟草松散,其基本组织细胞涨大,间隙也相应增大,证实BnCesA1基因的纤维素合成功能,表明BnCesA1基因在植物初生组织和次生组织的细胞壁合成中都发挥作用.
- 易蓉田志坚黄丽华刘峰郭清泉张学文
- 关键词：苎麻功能分析
- 苎麻纤维素合成酶基因cDNA的克隆及功能分析
- 苎麻/(Boehmeria nivea/)是一种我国传统的重要纤维作物，其麻皮纤维是主要收获物。当今一些模式植物纤维素合成分子生物学研究取得了良好的进展，为苎麻纤维素合成的分子生物学研究提供了丰富的参考。
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- 田志坚
- 关键词：苎麻基因克隆
- 文献传递
- 苎麻纤维素合成酶基因cDNA的克隆及表达分析被引量：22
- 2008年
- 以苎麻[Boehmeria nivea(Linn.)Gaud.]栽培种湘苎3号为材料,通过简并引物RT-PCR结合RACE技术首次成功克隆苎麻纤维素合成酶基因BnCesA15′端450bp序列以外的全部cDNA序列,序列长3276bp,编码一段938个氨基酸的蛋白质。经基因比对及蛋白质结构分析确证是苎麻纤维素合成酶基因。半定量RT-PCR分析显示:BnCesA1在苎麻根、茎、叶和芽组织中均有表达,其表达量为茎>叶>芽>根,相对表达量依次为0.791、0.381、0.319和0.183。从其表达模式可以推测该基因同时参与了苎麻细胞初生和次生细胞壁纤维素的合成。
- 田志坚易蓉陈建荣郭清泉张学文
- 关键词：苎麻纤维素合成酶CDNA克隆
- 体外分子展示技术被引量：1
- 2004年
- 作为一项新的基因技术 ,体外分子展示技术的用途十分广泛。该文对各种体外分子展示技术的基本原理及相关应用进行综述 ,并展望其应用前景。
- 田志坚张学文
- 关键词：文库抗体受体
- β-甘露聚糖酶基因克隆与在大肠杆菌中表达被引量：13
- 2005年
- 为了通过基因工程方法在大肠杆菌中发酵生产β-甘露聚糖酶,采用多重比较几种来源的β-甘露聚糖酶氨基酸序列,获得了该酶的保守结构域,并按此设计简并引物.以能水解魔芋葡甘聚糖的枯草杆菌属野生筛选菌种A33为材料,通过简并引物PCR法从A33基因组中扩增出β-甘露聚糖酶基因核心区段.经过克隆、测序及BLASTN比对分析,证实该DNA区段推导的编码蛋白具有β-甘露聚糖酶的保守结构域,属于该酶家族中的一员.将该片段构建到大肠杆菌表达载体pRSET-A并转入大肠杆菌表达系统BL21DE3(pLysS),经过诱导获得了此酶的高效表达.
- 张学文田志坚吴永尧周双德康冬丽
- 关键词：Β-甘露聚糖酶基因克隆
- 酵母三杂交系统的应用研究进展
- 2005年
- 1996年,酵母三杂交技术被研究应用于筛选RNA结合蛋白。本文介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足及局限,并分析其原因,总结了在过去8年中利用此方法所取得的成就。在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统,其应用范围已扩大到蛋白质-蛋白质、蛋白质-RNA、蛋白质-小分子药物间的相互作用等更加广泛的研究领域。
- 田志坚张学文
- 关键词：酵母三杂交系统蛋白质RNA小分子药物相互作用
- 黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因的克隆和序列分析
- 2007年
- 以黄孢原毛平革菌基因组DNA为模板,克隆Lip-2基因片段,结合序列测定和生物信息学方法对扩增序列进行分析,结果证实所获得的序列与GenBank中已经登陆的Lip-H8基因具有高度的同源性,其N-端也具有真核生物分泌型信号肽序列.Lip-2基因序列的获得为下一步将其构建到酵母表达载体中进行蛋白质表达奠定了基础.
- 陈立祥苏建明雷威田志坚张学文章怀云
- 关键词：分子生物学黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶克隆
