王灿华
- 作品数：19 被引量：100H指数：5
- 供职机构：上海交通大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 人胆固醇酯合成酶－2c及其编码序列
- 本发明提供了人胆固醇酯合成酶－2c(ACAT2c)及其编码序列，含所述序列的构建物和载体，以及它们的用途。人ACAT2c编码基因的核苷酸序列长近1.2kb，编码379个氨基酸序列。本发明的人胆固醇酯合成酶－2c(ACAT...
- 李伯良宋保亮杨新颖姚晓敏戚炜张大元王灿华
- 文献传递
- 水剂法提取米糠蛋白的多因素分析
- 2018年
- 水剂法是目前提取米糠蛋白最实用和最经济的手段之一。为发展和完善该工艺,进一步耦合其他方法以提高米糠蛋白提取效率,本项目以米糠蛋白提取效率为指标,在水剂法提取的基础上,首先通过响应面分析,依据二次多项回归方程判断pH值、温度和料液比对米糠蛋白提取率的影响程度,得出水剂法理论最优工艺条件。在此基础上进一步对超声波辅助水剂法、连续多步水剂法及蜗牛酶辅助水剂法进行比较分析,发现超声波辅助水剂法可显著提高米糠蛋白首次提取率(最高可达72.01%),连续多步水剂法可简单有效地提高蛋白总回收率(3次累加最高可达73.17%)。综合理论和上述实验结果,我们推荐以水剂法为基础,恒温37℃、料液比1∶10、pH7.0,浸提2h,增加超声波辅助,为获取米糠蛋白最高提取效率的最佳工艺条件,为水剂法工艺的完善提供了备选方案。
- 庞可王灿华张大兵许杰
- 关键词：米糠蛋白水剂法超声波
- 真核生物pre-mRNA剪接的研究进展被引量：3
- 2005年
- Pre-mRNA剪接,即把内含子去除并把外显子序列连接成为成熟的mRNA,是基因表达与调控的重要环节之一。本文在概述真核基因mRNA剪接反应机制的基础上,主要讨论pre-mRNA的剪接机器,剪接体如何催化pre-mRNA剪接反应和pre-mRNA选择性剪接等方面的研究进展。
- 姚晓敏马涵慧王灿华林志新李伯良
- 关键词：RNA剪接真核生物选择性剪接真核基因剪接体基因表达与调控
- 人胆固醇酯合成酶－2b及其编码序列
- 本发明提供了人胆固醇酯合成酶-2b(ACAT2b)cDNA序列及其编码的一种人胆固醇酯合成酶氨基酸序列，含所述序列的构建物和载体，以及它们的用途。人ACAT2b cDNA的核苷酸序列长约1.5kb，编码502氨基酸序列。...
- 李伯良宋保亮杨新颖姚晓敏戚炜张大元王灿华
- 文献传递
- 适于转基因水稻RJ5检测的质粒DNA标准物质的研制被引量：2
- 2016年
- 标准物质对于实时荧光定量PCR进行转基因作物及其产品的定量分析尤为重要,但我国转基因生物的标准物质研制还处于初级阶段,因此研制新型的标准物质对解决转基因标准物质匮乏有着重要的意义。本研究针对转基因水稻RJ5构建了质粒标准分子pRJ5,并对其进行定量适应性鉴定、均匀性测试、稳定性考察,并利用数字PCR方法测定其量值。结果表明,以质粒分子pRJ5为标准物质构建的标准曲线具有良好的反应效率和线性相关性及良好的重复性和重演性。在定量PCR体系检测极限(LOD)低至5 copies/μL,定量极限(LOQ)约为10 copies/μL。均匀性测试的数据表明,质粒标准分子在管间和管内无明显差异,具有良好的均匀性。稳定性测试的结果表明,该质粒标准分子至少可以稳定地保存半年以上。数字PCR(3D-d PCR)的量值测定准确度良好。实际样品的定量分析偏差范围在1.31%至2.44%,相对标准偏差值在0.98%至10.05%。以上结果说明了质粒标准分子pRJ5适合作为标准物质对转基因水稻RJ5进行定量检测。
- 李竹青杨立桃王灿华
- 关键词：转基因水稻荧光定量PCR
- 小鼠胆固醇酯合成酶－2基因启动子
- 本发明提供了小鼠胆固醇酯合成酶－2启动子序列及其主要的顺式作用元件，含所述序列的构建物和载体，以及它们的用途。本发明的胆固醇酯合成酶－2启动子可用于研究筛选治疗或辅助治疗动脉粥样硬化症的药物并在哺乳动物细胞中表达异源蛋白...
- 李伯良宋保亮王灿华杨新颖姚晓敏
- 文献传递
- 酮类物质合成酶OsPKS1和Os PKS2对水稻花粉外壁形成的作用被引量：1
- 2019年
- 【背景】植物花粉外围包裹的花粉外壁作为植物雄性配子的天然保护屏障对植物的生殖发育起到非常重要的作用。植物花粉外壁的主要成分是孢粉素,主要由脂类物质和酚类物质构成。因此,脂类物质和酚类物质的代谢是植物花药内外壁形成和花粉外壁形成的关键步骤。在其合成过程中,PKS1/PKSA/LAP6和PKS2/PKSB/LAP5在不同物种间发挥保守的生化功能。【目的】通过研究水稻OsPKS1和OsPKS2在花药内外壁和花粉外壁发育过程中的作用,为水稻花药内外壁和花粉外壁合成机理提供新认识。【方法】水稻花药发育基因共表达网络AntherNet预测到一个可能参与孢粉素合成的基因OsPKS1,利用CRISPR/Cas9技术在野生型9522背景和突变体ospks2背景下敲除OsPKS1获得ospks1单突变体和ospks1 ospks2双突变体。在同一生长条件下比较野生型和突变体植株表型,分析突变体植株的营养生长和花器官发育情况。通过I2-KI染色分析ospks1和ospks1 ospks2的花粉活力。通过半薄切片观察野生型和突变体各个时期花药四层细胞发育及小孢子发育,利用扫描电子显微镜观察野生型和突变体花药外壁、花药内壁和花粉外壁表面的精细结构,利用透射电子显微镜观察野生型和突变体花药壁细胞、花粉外壁和乌氏体的精细结构。【结果】获得4个ospks1单突变体和4个ospks1 ospks2双突变体,其中,ospks1-3是纯合的单突变体,ospks1-4 ospks2是纯合的双突变体。ospks1-3和ospks1-4 ospks2均呈现雄性不育的表型。ospks1-3与ospks2的花粉外壁和乌氏体结构均不正常,但两者结构不同。ospks1-3花药表面可形成凸起的外壁结构;绒毡层可正常降解。花粉外壁内部形成大量微小的空洞,柱状体变短,无法有效连接覆盖层和花粉外壁内层;乌氏体的底部结构减小,顶部结构增多,并且较野生型更为尖锐。ospks1-4 ospks2花药外壁角质层减少;绒毡层无法正常降解
- 周雨露林泓张大兵王灿华王灿华
- 关键词：水稻孢粉素花粉外壁雄性不育
- 人胆固醇酯合成酶－2b及其编码序列
- 本发明提供了人胆固醇酯合成酶－2b(ACAT2b)cDNA序列及其编码的一种人胆固醇酯合成酶氨基酸序列，含所述序列的构建物和载体，以及它们的用途。人ACAT2b cDNA的核苷酸序列长约1.5kb，编码502氨基酸序列。...
- 李伯良宋保亮杨新颖姚晓敏戚炜张大元王灿华
- 文献传递
- 任务型案例教学法在生物化学教学中的应用研究被引量：1
- 2015年
- 将任务型案例教学法应用于两个专业的生物化学课程教学。分析了16个任务型案例的实际运用效果,在本期任务案例的数量性、针对性、有用性、启发性方面,学生满意度(调查打分A^+、A和A^-总和)均达100%;趣味性和难易性的满意度分别为96%和94%。不同专业的学生对案例任务的难易性和趣味性评价略有差异。研究结果表明任务型案例教学法在生物化学课程中的应用效果良好,有利于培养学生的学习兴趣和综合能力。
- 王灿华
- 关键词：生物化学
- 具有促进生长和抗病原真菌的根际假单胞菌株M18
- 根据植物根际与土壤微生物之间相互依赖而又抑制的生态关系,设计出了一条独特的途径。首先,以1-氨基-1-羧基-环丙烷(ACC)为唯一氮源的选择性培养基,从植物根际土壤中筛选出具有ACC脱氨酶活性的假单胞菌1000多株,然后...
- 许煜泉祝新德王灿华张雁
- 关键词：植物真菌病植物根际假单胞菌株M18
