王娟
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用酿酒酵母转座子文库筛选线粒体镁代谢相关基因被引量：2
- 2010年
- 镁离子对于维持细胞正常功能十分重要,糖尿病、高血压、慢性呼吸道疾病、骨质疏松、心律失常等多种疾病都与镁代谢失衡有关.MRS2基因编码线粒体镁离子转运蛋白,MRS2缺失会导致酵母线粒体镁离子浓度下降、线粒体内Ⅱ型内含子剪接缺陷和非发酵碳源培养基上的生长缺陷.为了增进对线粒体镁离子代谢调控基因的了解,利用酿酒酵母mTn-lacZ/LEU2转座子文库筛选MRS2的抑制基因,发现线粒体载体家族成员YMR166C基因的缺失可以挽救MRS2基因缺失突变体的生长缺陷、Ⅱ型内含子剪接缺陷,并可以调节线粒体镁离子浓度,首次发现YMR166C是线粒体镁代谢相关基因.
- 王娟范强旺周兵
- 关键词：酵母线粒体
- 酿酒酵母全基因组范围内筛选MTM1基因的抑制基因被引量：1
- 2010年
- MTM1基因对于维持锰超氧化物歧化酶的活性和线粒体正常功能十分重要,MTM1基因的缺失会严重影响酵母锰超氧化物歧化酶活性,并损伤线粒体功能,因此在非发酵培养基上不能生长.利用MTM1基因缺失的突变体在非发酵培养基上的生长缺陷,转入酵母基因组文库筛选MTM1抑制基因,发现MTM1基因缺失造成的损伤一旦形成不可逆转,重新引入MTM1基因也无法挽救,直接筛选无法得到抑制基因.为了避免MTM1缺失造成的不可逆损伤,在野生型酵母中先转入带有MTM1基因的质粒,再敲除染色体上的MTM1基因,随后转入基因组文库,再利用药物5-氟乳清酸(5-FOA)迫使细胞丢失表达MTM1基因的外源质粒,再筛选能在非发酵培养基上生长的转化子,通过这种方法筛选发现,POR2等5个基因的过表达可以挽救MTM1基因缺失造成的非发酵培养基上的生长缺陷,为深入了解MTM1基因的功能提供了线索,对筛选其他造成不可逆损伤的突变基因的抑制基因提供了一条可行的研究思路.
- 王娟张玟洁曾雅雪蔡颖周兵
- 关键词：酵母抑制基因
- 线粒体通透性转移孔与青蒿素抗疟机制研究被引量：4
- 2009年
- 目的:为增进对青蒿素作用机制的了解,探讨参与调节线粒体体积的线粒体通透性转移孔在青蒿素抗疟机制中的作用。方法:分离线粒体,采用分光光度法检测青蒿素能否直接作用于离体线粒体导致线粒体体积变化;利用等效应图分析线粒体通透性转移孔抑制剂是否拮抗青蒿素的抗疟作用。结果:青蒿素可以直接导致离体疟原虫线粒体肿胀,而不会影响鼠肝线粒体体积;两种不同的线粒体通透性转移孔抑制剂均可拮抗青蒿素的抑疟效果。结论:青蒿素可以直接作用于离体疟原虫线粒体导致线粒体肿胀,且青蒿素导致线粒体肿胀的物种选择性与细胞毒性的物种选择性一致。此外,利用抑制剂阻断线粒体通透性转移孔的开放可以拮抗青蒿素的抗疟效果,证明线粒体通透性转移孔在青蒿素抗疟过程中起重要作用。
- 王娟黄丽英龙伊成周兵
- 关键词：青蒿素疟原虫
- 线粒体呼吸链抑制剂对青蒿素代谢速率的影响被引量：1
- 2010年
- 线粒体呼吸链在青蒿素抑制酵母的过程中起重要作用。为了研究线粒体呼吸链对青蒿素代谢的影响,利用不同的抑制剂抑制线粒体呼吸链,用薄层层析法检测青蒿素代谢速率。结果表明:还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶抑制剂(DPI)可以减缓酵母细胞和疟原虫细胞对青蒿素的代谢,而呼吸链复合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的抑制剂对青蒿素消耗没有明显影响。NADH脱氢酶在青蒿素代谢中起重要作用,NADH脱氢酶结构上存在巨大差异。这也为解释青蒿素的物种选择性毒性提供了线索。
- 王娟周兵
- 关键词：酵母疟原虫青蒿素线粒体
- 利用酿酒酵母转座子文库筛选MTM1基因缺失表型相关基因被引量：3
- 2010年
- 【目的】MTM1基因对于维持锰超氧化物歧化酶的活性和线粒体正常功能十分重要,MTM1基因的缺失会严重影响锰超氧化物歧化酶活性,并损伤线粒体功能,使酵母在非发酵培养基上不能生长。为加深对MTM1基因功能及其相关基因的研究,尝试利用转座子文库筛选MTM1基因缺失表型相关基因,寻找哪些位置的转座子插入能挽救MTM1基因缺失导致的生长缺陷。【方法】因MTM1基因的缺失造成的损伤不可逆,直接转入文库无法筛选得到MTM1基因缺失表型相关基因,本研究利用外源MTM1基因菌株和mTn-lacZ/LEU2酿酒酵母转座子文库进行筛选,寻找能挽救mtm1突变体生长缺陷的转座子插入位点。【结果】发现转座子插入HSL1和TPS2基因能挽救mtm1突变体的生长缺陷。【结论】我们的结果为深入了解MTM1基因的功能提供了线索。
- 王娟张玟洁曾雅雪蔡颖孙驰程周兵
- 关键词：酵母
