王娟 作品数:33 被引量:211 H指数:10 供职机构: 西北师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省高等学校基本科研业务费项目 甘肃省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 化学工程 更多>>
α-萘乙酸对低温胁迫下油菜幼苗抗寒性的影响 被引量:8 2020年 为探究α-萘乙酸(NAA)对植物抗寒性的影响,以白菜型冬油菜‘陇油6号’为试验材料,经4℃、NAA+4℃、NAA+4℃+DPI(NADPH氧化酶抑制剂)、NAA+4℃+DMTU(H2O2清除剂)、NAA+4℃+U0126(MAPK抑制剂)和NAA+4℃+Tungstate(NO生成抑制剂)处理后,研究其对‘陇油6号’油菜的活性氧(H2O2和O2-·)含量,抗氧化酶活性,丙二醛(MDA)、可溶性糖、脯氨酸和叶绿素含量,抗氧化酶基因(APX、CAT、GR、SOD)、Rboh A-F、MAPK3/4/6、CBF和ICE1基因表达量的影响。结果表明:与4℃低温处理相比,NAA+4℃处理下油菜根系中的细胞活性、H2O2和O2-·含量以及叶片中的MDA含量均降低;根系中的抗氧化酶(CAT、SOD、APX和POD)活性、叶片中的可溶性糖及脯氨酸含量、叶绿素含量、上述相关基因的表达量均升高,说明α-萘乙酸处理油菜可显著提高低温胁迫下油菜幼苗的抗氧化能力、光合能力和相关基因的表达,增强油菜幼苗的抗寒性。与NAA+4℃处理相比,NAA+4℃+抑制剂(DPI、DMTU、U0126和Tungstate)处理下油菜幼苗中叶绿素含量、抗氧化酶基因表达量、Rboh A-F、MAPK3/4/6、CBF和ICE1基因表达量均呈不同程度降低,说明H2O2和NO信号分子、NADPH氧化酶和MAP激酶级联途径均参与了α-萘乙酸增强油菜幼苗耐寒性过程的调控。 罗丹瑜 张小花 李巧丽 王娟 郑晟 张腾国关键词:白菜型油菜 Α-萘乙酸 低温胁迫 基因表达量 高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆 被引量:3 2010年 从高山离子芥中克隆得到了一种新的MAPK基因的cDNACbMAPK3,全长1419bp,其中包括1110bp的开放阅读框、91bp的5'非翻译区(5'UTR)和218bp的3'非翻译区(3'UTR)。CbMAPK3基因编码369个氨基酸的蛋白质,分子量为42.5kDa,等电点为5.79,含有MAP激酶所具有的11个保守序列区以及MAP激酶的磷酸化位点TEY基序。CbMAPK3蛋白与响应环境胁迫有关的植物MAPK亚类有很高的同源性。半定量分析表明,该基因表达受低温胁迫诱导。 张腾国 张艳 王娟 杨宁 安黎哲关键词:高山离子芥 MAPK基因 分子克隆 柠条锦鸡儿CkGR基因克隆及功能分析 2016年 通过RACE技术从柠条锦鸡儿中克隆得到一个新的GR基因,全长2 122 bp,包括5'非翻译区(5'-UTR)57 bp,3'非翻译区(3'-UTR)415 bp,开放阅读框(ORF)1 650 bp,编码550个氨基酸,推测的蛋白质分子量为59.2k Da,理论等电点为8.2,命名为Ck GR。Ck GR与鹰嘴豆Ca GR的同源性较高,为90.1%。利用染色体步移法克隆得到Ck GR起始密码子ATG上游648 bp的启动子序列,Plant CARE软件分析表明,该序列具有启动子的基本元件CAAT-box和TATA-box以及多种与逆境胁迫相关的顺式调控元件。实时荧光定量PCR分析表明,Ck GR在柠条锦鸡儿的根、茎和叶中均有表达,没有组织特异性;Ck GR的表达受低温、高盐和干旱胁迫的诱导,表明Ck GR在柠条锦鸡儿适应低温、高盐和干旱胁迫的过程中发挥作用。 张腾国 周轲 毛玉珊 聂亭亭 李萍 刁志宏 王娟关键词:柠条锦鸡儿 分子克隆 油菜RbohB基因的克隆及逆境响应表达分析 被引量:2 2017年 利用RACE技术从‘陇油6号’油菜中克隆得到一个新的RbohB基因,全长2 694 bp,开放阅读框2 541bp,编码846个氨基酸。实时荧光定量PCR分析表明RbohB基因表达受低温、高盐、H_2O_2诱导,MAPKK抑制剂U0126预处理12 h再经低温、高盐、H_2O_2诱导,与单独处理结果相比,RbohB基因表达明显降低,表明该基因在油菜适应低温、高盐、H_2O_2胁迫过程中发挥作用,U0126对该基因的转录有抑制作用。NADPH氧化酶活性受H_2O_2处理的诱导,U0126预处理12 h再经H_2O_2处理,与单独H_2O_2处理结果相比,NADPH氧化酶活性明显降低,表明MAPKK抑制剂U0126对该酶活性有抑制作用。 张腾国 罗丹瑜 郭艳峰 郑晟 王娟关键词:油菜 分子克隆 柠条锦鸡儿CkP5CS基因克隆及表达特性分析 2018年 旨在克隆柠条锦鸡儿Δ~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因(P5CS)的全长cDNA序列,研究其组织表达特异性,分析CkP5CS基因在低温、高盐和PEG处理下的表达情况,以阐明CkP5CS基因在柠条锦鸡儿中的生物学功能。利用RACE技术克隆P5CS基因cDNA序列,并对其全长基因进行生物信息学分析;构建系统发育树,研究其与相似序列的同源性;利用实时荧光定量PCR方法,分析CkP5CS基因的组织表达特异性以及在低温、高盐和渗透胁迫下的表达情况。结果显示,克隆得到柠条锦鸡儿P5CS基因全长c DNA序列,命名为CkP5CS,全长2 604 bp,包括5'非翻译区(5'-UTR)102 bp,3'非翻译区(3'-UTR)363 bp,开放阅读框2 139 bp,能编码712个氨基酸,预测蛋白质分子量为76.8 kD,理论等电点为8.6,二级结构主要包括α-螺旋、延伸链和无规则卷曲。多序列比对和系统进化分析表明,柠条锦鸡儿P5CS与白刺花SdP5CS、大豆GmP5CS、豇豆VuP5CS同源性较高,分别为85.1%、84.2%和82.6%。实时荧光定量PCR结果显示,CkP5CS在柠条锦鸡儿的根、茎和叶中均有表达,没有组织特异性;同时,该基因的表达受低温、高盐和渗透胁迫的诱导。克隆得到柠条锦鸡儿CkP5CS基因,其在柠条锦鸡儿适应低温、高盐和渗透胁迫过程中发挥作用。 张腾国 史中飞 寇明刚 郑晟 王娟关键词:柠条锦鸡儿 分子克隆 肋果沙棘幼苗抗氧化酶系统及总黄酮对UV-B辐射增强的响应 被引量:4 2020年 该文以青藏高原特有木本植物肋果沙棘为材料,在62μW·cm-2的UV-B辐射强度下,分别测定处理了0~6 d幼苗叶片的氧化损伤程度、抗氧化系统酶活性和总黄酮含量及其抗氧化活性,以探究肋果沙棘对UV-B辐射的生理生态响应机制。结果表明:随UV-B辐射时间的增加,肋果沙棘幼苗过氧化氢含量(H 2 O 2)和膜脂过氧化产物(MDA)显著增加;抗氧化系统酶中过氧化氢酶(CAT)活性显著升高;过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性呈先降后升的趋势,且活性均显著低于对照,超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显变化;总黄酮含量随辐射时间的积累显著增加,作为非酶抗氧化物质的总黄酮对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)的清除率与其含量变化具有显著正相关关系。综上结果表明,肋果沙棘幼苗在抵御该辐射产生的氧化损伤中,通过提高CAT活性及增加总黄酮含量来抵御辐射造成的氧化损伤。 周璇 贾志鹏 王娟 杜梅娜 苏雪关键词:木本植物 UV-B辐射 抗氧化酶系统 总黄酮 高山离子芥CbMAPK3基因功能分析 2010年 将高山离子芥丝裂原活化蛋白(MAP)激酶基因CbMAPK3编码区连接到表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌JJ001(srl::Tn10),在1 mol·L^(-1)山梨醇的渗透胁迫及IPTG的诱导下,转化pET-30a-CbMAPK3的大肠杆菌JJ001(srl::Tn10)生长情况比转化pET-30a的好。免疫分析表明,在0℃下处理时,高山离子芥CbMAPK3激酶蛋白质水平没有明显的变化;在4℃处理下,高山离子芥CbMAPK3激酶蛋白质水平在处理前3 h明显增加,并在3 h后达到最高值。高山离子芥CbMAPK3在响应环境胁迫的过程中起作用。 张腾国 夏小慧 刘玉冰 杨宁 贾凌云 王娟 安黎哲关键词:高山离子芥 功能分析 MAPKK抑制剂对低温胁迫下油菜幼苗光合作用和抗氧化酶活性的影响 被引量:13 2013年 以两种油菜品种天油2号和陇油6号作为供试材料,研究了MAPKK抑制剂U0126对低温胁迫油菜幼苗叶绿素、F_v/F_m、抗氧化酶活性的影响.结果表明:低温胁迫下,油菜幼苗叶绿素质量分数、F_v/F_m下降,MDA质量分数增加,CAT,APX,GR,SOD活性先增加后下降.MAPKK抑制剂U0126预处理再低温胁迫后,与单独低温处理相比,叶绿素质量分数、F_V/F_m降低,MDA质量分数增加,抗氧化酶活性均下降.表明MAP激酶级联途径参与油菜抗低温胁迫转导途径,缓解低温胁迫造成的氧化损伤,对其抗氧化损伤起了一定正调控作用. 张腾国 张艳 夏小慧 王娟 王圆圆 王宁 孙万仓关键词:低温胁迫 油菜 抗氧化酶 油菜BnMKK4全长基因的克隆及表达分析 被引量:12 2012年 从‘陇油6号’油菜中克隆得到了一个新的BnMKK4基因的cDNA,全长1317bp,其中包括993bp的开放阅读框,159bp的5'非翻译区(5'UTR),165bp的3'非翻译区(3'UTR)。与拟南芥AtMKK4有很高的同源性,因此命名为BnMKK4(GenBank登录号为JF268686)。该基因编码330个氨基酸的蛋白质,分子量36.5kDa,等电点为9.01。实时荧光定量PCR结果显示该基因表达受低温胁迫和盐胁迫的诱导,表明该基因在油菜适应低温胁迫和盐胁迫的过程中发挥作用。 张腾国 王宁 王娟 王圆圆 张艳 孙万仓 常燕 夏惠娟关键词:分子克隆 油菜BnMKK2基因的克隆及表达分析 被引量:14 2012年 通过实验从陇油6号油菜中克隆得到了一种新的MAPK激酶基因BnMKK2基因的cDNA,全长1 344 bp,其中包括5'非翻译区(5'UTR)111 bp,3'非翻译区(3'UTR)165 bp,开放阅读框(ORF)长1 068 bp,编码355个氨基酸,该基因编码的蛋白质分子量为39.3 kDa,理论等电点为6.8。与拟南芥AtMKK2有很高的同源性,因此命名为BnMKK2(GenBank登录号:HQ848661)。该基因实时荧光定量PCR分析表明,BnMKK2基因的表达受低温胁迫诱导。 张腾国 王圆圆 王娟 王宁 张艳 孙万仓 陈琼琼 夏惠娟关键词:基因克隆