沈晨凌
- 作品数:18 被引量:34H指数:4
- 供职机构:上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞的分子标志物的价值
- 目的探讨CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标记物的价值。方法首先应用流式细胞仪对下咽癌FADU细胞系中CD44的表达情况进行检测,随后采用免疫磁珠分选技术对CD44的阳性细胞进行分选,并用流式细胞仪对分选后的CD44阳...
- 向明亮沈晨凌聂琛马衍
- CD44基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量:1
- 2014年
- 目的构建CD44基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并在下咽癌FaDu细胞株上鉴定其沉默效率,为研究目的基因沉默后下咽癌肿瘤细胞致瘤性的改变提供稳定可靠的载体。方法针对目的基因CD44mRNA的序列,按照RNA干扰序列的设计原则,设计、合成4个CD44基因特异性小分子干扰iRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,将其合成短发卡hRNA(short hairpin RNA,shRNA)并退火成双链DNA,与慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆。将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其感染下咽癌FaDu细胞株细胞,采用Real-time PCR检测靶基因的沉默效率。结果对LV-CD44-shRNA载体进行双酶切鉴定,证实短发夹RNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入序列正确,CD44基因RNA干扰重组慢病毒载体经293T细胞成功包装后,其病毒滴度为8E+8TU/ml。RNA干扰下咽癌FaDu细胞CD44基因后,CD44 mRNA水平显著下降,干扰效率大于70%。结论成功构建了CD44基因的shRNA慢病毒表达载体,能够在细胞水平有效沉默靶基因,为CD44基因沉默后下咽癌肿瘤细胞生物学改变的研究打下了较坚实的基础。
- 沈晨凌向明亮聂琛胡海霞马衍吴皓
- 关键词:下咽癌CD44RNA干扰慢病毒
- 氨基糖苷类药物中毒后耳蜗螺旋神经元退行性变研究
- 2014年
- 哺乳动物感音神经性聋发生后螺旋神经退行性变的研究,对于感音神经性聋发生后耳蜗螺旋神经元退行性变的防制和干预有着重要的理论价值。本文重点总结了哺乳动物氨基糖苷类药物耳中毒动物模型的建立、耳蜗毛细胞破坏后螺旋神经元退行性变的形态变化及其发生机制等方面的研究成果。
- 聂琛沈晨凌胡海霞吴皓向明亮
- NF1基因突变致儿童头颈部丛状神经纤维瘤及尼罗替尼治疗的研究进展
- 2025年
- 神经纤维瘤病(NF)是一类罕见的常染色体显性遗传性疾病,主要分为1型神经纤维瘤病(NF1)、2型神经纤维瘤病(NF2)和施万细胞瘤病3种类型,其中NF1是由位于17号染色体上的NF1基因突变所致,占所有神经纤维瘤病的96%,发病率为1/3000~1/2600,多在儿童期发病,出现逐渐加重的疼痛、畸形,甚至毁容和运动障碍,可能造成终身认知障碍、学习障碍和社交功能受损,有些瘤灶还可出现恶变,有并发其他多种肿瘤的风险。尼罗替尼作为一种二代靶向药,也被称为第二代BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂。靶向药物是目前新兴的抗肿瘤治疗手段,作用原理主要是针对肿瘤细胞上的特异性靶点,杀死肿瘤细胞,对正常细胞影响较小。由于儿童丛状神经纤维瘤患者处于生长发育阶段,所以其诊断、治疗、随访较成人更为复杂,因此,研究者通过以上治疗经验及国内外相关文献的回顾有助于提高临床对该病的进一步认识。同时,对NF1基因突变致儿童头颈部丛状神经纤维瘤患者的治疗和管理需要团队的努力,包括医学专家和患儿,鉴于这种疾病的复杂性,开发有效的治疗方法同样需要跨学科的团队合作。在过去的数十年里,虽然在研究NF1方面取得进展,但这种疾病在未来一段时间内仍将是临床一大挑战。本研究在了解NF1的诊断、治疗及随访等基础上,针对NF1基因突变致儿童头颈部丛状神经纤维瘤及尼罗替尼治疗的研究进展作一综述。
- 沈晨凌陈佳瑞王颖王颖向明亮李晓艳
- 关键词:1型神经纤维瘤病NF1基因基因突变丛状神经纤维瘤
- CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标志物的价值被引量:4
- 2013年
- 目的探讨CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标记物的价值。方法应用流式细胞仪检测下咽癌FADU细胞系中CD44的表达;采用免疫磁珠分选技术(MACS)分选CD44+细胞,并用流式细胞仪检测其纯度;运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测CD44+、CD44-细胞的体外增殖能力,将相同数量级(1×106、1×105)的CD44+、CD44-细胞分别注射于雄性非肥胖糖尿病型/重症联合免疫缺陷(non-obese diabetic/severe combined immunodefi ciency,NOD/SCID)小鼠皮下,观察其体内致瘤能力的差异。结果下咽癌FADU细胞系中CD44+细胞占(21.1±1.56)%,免疫磁珠分选后的CD44+细胞纯度达(99.4±0.29)%。体外增殖能力研究显示CD44+细胞增殖速度明显快于CD44-细胞。NOD/SCID鼠体内致瘤实验结果显示:1×105CD44+细胞致瘤率为12.5%(1/8),1×105 CD4 4-细胞致瘤率为0(0/8);1×106 CD44+细胞致瘤率为100%(8/8),1×106 CD4 4-细胞致瘤率为5 0%(4/8);相同数量级的CD44+与CD44-两组细胞致瘤率差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,CD44+细胞组比CD44-细胞组更早成瘤,潜伏期明显缩短。CD44+细胞组所致肿瘤体积平均为(2017.81±538.50)mm3,而CD44-细胞组所致肿瘤体积平均为(1153.25±503.18)mm3,两组差异具有统计学意义(t=2.67,P<0.05)。结论下咽癌肿瘤中CD44+细胞比CD44-细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤能力,提示肿瘤干细胞可能存在于CD44+肿瘤细胞内,CD44可作为筛选下咽癌肿瘤干细胞的一个重要分子标记物。
- 沈晨凌向明亮聂琛胡海霞马衍吴皓
- 关键词:肿瘤干细胞分子标记物CD44下咽癌
- CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞的分子标志物的价值
- 向明亮沈晨凌聂琛马衍
- 关键词:肿瘤干细胞分子标记物CD44下咽癌
- CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞的分子标志物的价值
- 目的 探讨CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标记物的价值.方法 首先采用流式细胞仪对下咽癌FADU细胞系中CD44的表达进行检测,随后采用免疫磁珠分选技术对CD44阳性细胞进行分选,并用流式细胞仪对分选后的CD44阳性...
- 向明亮沈晨凌胡海霞马衍吴皓
- 儿童分化型甲状腺癌29例临床病例分析被引量:9
- 2015年
- 目的 分析儿童分化型甲状腺癌的临床表现、治疗方法及其结果,探讨其最佳治疗方式.方法 对上海交通大学医学院附属新华医院耳鼻咽喉头颈外科1998年1月-2014年7月收治的14岁以下的29例儿童分化型甲状腺癌的临床表现、治疗方法及其结果等进行回顾性分析.结果 29例患儿中,以“发现颈部肿块”为主诉者27例;单侧甲状腺癌16例,双侧甲状腺癌13例;甲状腺实质性肿块伴多发点状钙化者21例(72.4%);颈淋巴结肿大者24例(82.8%),其中仅患侧肿大者9例(37.5%),双侧均肿大者15例(62.5%).我院初治患儿20例中,T2及其以上者18例,颈淋巴结肿大者16例.行甲状腺患侧腺叶+峡部切除术者2例,甲状腺全切除术者18例,其中1例气管壁受肿瘤侵犯者同时行气管部分切除术;同时行颈清扫术者16例.在外院接受过原发灶手术的9例患儿中,术后出现颈淋巴结肿大者8例,伴发肺转移者6例;行颈清扫术5例,残留甲状腺切除术+颈清扫术4例.术后行^131I治疗者总共27例.术后随访率100%,随访时间平均6年10个月(0.5 ~16.0年),无死亡病例发生,亦无复发、局部及远处转移.结论 儿童分化型甲状腺癌侵犯性明显强于成人,甲状腺全切除术+颈清扫术辅以术后^131I治疗可作为其基本治疗方案.
- 王龙昊向明亮叶斌胡海霞沈晨凌马衍焦宇吴皓
- 关键词:甲状腺肿瘤甲状腺切除术颈淋巴结清扫术儿童
- 采用改良L型切口行甲状腺癌颈清扫术
- 胡海霞向明亮吴皓聂琛沈晨凌马衍吕静荣
- 头颈部肿瘤干细胞分子生物学标志及其筛选
- 2013年
- 头颈部恶性肿瘤生物学方面特点的研究对于其预防、早期诊断和早期治疗有着重要的理论价值.许多研究表明,包括头颈部肿瘤在内的实体瘤中存在有肿瘤干细胞.肿瘤干细胞概念的提出,揭示了靶向性或选择性杀伤肿瘤干细胞的可能,为肿瘤根治、防止复发和转移提出了新的思路.肿瘤干细胞研究的关键之一是寻找其特异性分子生物学标志.本文重点总结了肿瘤干细胞的生物学性状,已发现的头颈部肿瘤干细胞的特异性分子标志物以及分离与鉴定肿瘤干细胞的技术方法.
- 沈晨凌向明亮
- 关键词:NECK