沈冰
- 作品数：34 被引量：99H指数：6
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
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- 重组腺病毒载体对大鼠胶质瘤细胞转染效率的影响
- 2013年
- 目的研究转染复数(MOI)和转染时间对重组腺病毒载体转染大鼠胶质瘤细胞转染效率的影响。方法体外培养大鼠胶质瘤细胞(C6细胞),用携带有rHSG基因的重组腺病毒载体(Adv-rHSG-GFP)转染C6细胞。根据MOI将细胞分为:A组MOI=0、B组MOI=10、C组MOI=50、D组MOI=80、E组MOI=100,转染Adv-rHSG-GFP 24h后分别收集每组细胞,采用Western Blot和免疫细胞化学法检测rHSG蛋白的表达,并通过流式细胞仪和倒置荧光显微镜观察GFP阳性表达来评价重组腺病毒载体的转染效率。用MOI为100的Adv-rHSG-GFP转染C6细胞不同时间后(12、24、36和48h),同法收集细胞并检测rHSG蛋白的表达及评价重组腺病毒载体的转染效率。结果 Adv-rHSG-GFP转染C6细胞24h后,rHSG蛋白的相对表达量和绿色荧光蛋白表达随MOI值的增高而增多;用MOI为100的Adv-rHSG-GFP转染C6细胞后,12h即可观察到绿色荧光蛋白的表达,且在24h内随时间的变化而增高,在24~36h绿色荧光蛋白表达无变化,48h有所降低(P<0.01);rHSG蛋白相对表达量在12~48h内随时间的变化而增高,于48h达到最大值(P<0.01)。结论重组腺病毒载体能够有效转染C6细胞,且在MOI值为100,24h时有最高转染效率。
- 高鹏张春赵巍沈冰
- 关键词：腺病毒转染
- 枸杞多糖对脑出血大鼠神经细胞凋亡及凝血酶受体-1表达的影响被引量：3
- 2017年
- 目的观察枸杞多糖(LBP)对大鼠脑出血(ICH)后神经细胞凋亡及凝血酶受体-1(PAR-1)表达的影响,并探讨其可能机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、LBP低剂量、中剂量、高剂量组(50、100、200 mg/kg)和尼莫地平组10 mg/kg。各给药组给予相应剂量药物灌胃,假手术组、模型组给予等体积生理盐水替代,1次/d,共15 d。灌胃结束后,采用二次自体血注入法建立ICH模型;采用TUNEL法检测神经细胞凋亡,采用Western Blot、免疫组化、q RT-PCR,从不同水平探索LBP对ICH后脑组织PAR-1表达的影响。结果模型组神经细胞凋亡率、PAR-1阳性率、PAR-1蛋白的表达及PAR-1 m RNA的表达较假手术组显著增加(P<0.05),LBP各剂量组神经细胞凋亡率、PAR-1阳性率、PAR-1蛋白的表达、PAR-1 m RNA的表达较模型组均有不同程度的减低(P<0.05)。相关性分析显示,ICH后神经细胞凋亡率与PAR-1阳性率呈正相关性。结论 LBP能够抑制大鼠ICH引起的神经细胞凋亡,对ICH后脑组织具有保护作用,其机制可能与抑制PAR-1表达有关。
- 邹有瑞霍国进王军成吴桥沈冰
- 关键词：枸杞多糖脑出血细胞凋亡
- 恶性胶质瘤中血管生成与肿瘤生长关系的研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨血管生成与恶性胶质瘤生长之间的关系,为进一步抗血管生成治疗恶性胶质瘤提供实验依据。方法立体定向尾状核注射C6细胞制作SD大鼠脑胶质瘤动物模型并观察肿瘤生长变化;采用SABC免疫组化法,检测注射C6细胞后第9、15、21天肿瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),检测CD34计算肿瘤组织中的微血管密度(microscope vessel density,MVD)。结果接种C6细胞后,随着天数的增加肿瘤体积逐渐增大;肿瘤组织中PCNA的表达逐渐增强,微血管密度明显增加,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论恶性胶质瘤是生长活跃、血管增殖明显的肿瘤,血管生成与恶性胶质瘤生长间密切相关。
- 郝文炯沈冰
- 关键词：恶性胶质瘤血管生成
- 内源性血红素氧合酶-1在脑血管痉挛中作用机制的实验研究
- 2012年
- 目的探讨内源性血红素氧合酶(HO-1)在迟发性脑血管痉挛(DCV)中的作用。方法 SD大鼠108只,随机分为生理盐水组(A组)、蛛网膜下腔出血(SAH)组(B组)、和SAH+氯高铁血红素(Hemin)组(C组)。采用枕大池二次注血法建立SAH模型,于注血后3d、5d、7d,取基底动脉(BA)测量其内径周长、血管壁厚度,观察血管结构改变,免疫组化染色检测BA中HO-1蛋白表达,RT-PCR检测BA中HO-1 mRNA的表达水平。结果A组BA血管结构正常,未发生DCV;B组第3天有DCV、第7天达到高峰;C组大鼠BA痉挛情况较B组明显缓解(P<0.01)。免疫组化显示A组大鼠BA上无HO-1蛋白表达;B组大鼠BA上HO-1蛋白低表达;C组大鼠BA上HO-1蛋白高表达,B、C两组比较有显著性差异(P<0.01)。RT-PCR显示A组大鼠BA无HO-1 mRNA的表达;B组大鼠BA上HO-1 mRNA低表达;C组大鼠BA HO-1mRNA高表达;B、C两组比较有显著性差异(P<0.01)。结论 HO-1诱导剂hemin可诱导HO-1过度表达并防止SAH后DCV的发生。
- 沈冰乔卫军王保江赵巍
- 关键词：蛛网膜下腔出血脑血管痉挛氯高铁血红素
- 大鼠增殖抑制基因抑制大鼠胶质瘤细胞的增殖及其机制被引量：5
- 2014年
- 目的观察腺病毒介导的大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)在大鼠胶质瘤细胞(C6)中的表达及其对大鼠胶质瘤细胞增殖的影响,并探讨其作用的机制。方法用含有rHSG基因的重组腺病毒载体(Adv-rHSG-GFP)转染C6细胞,采用Western blot和免疫细胞化学法检测rHSG蛋白的表达;使用流式细胞仪分析细胞周期,并结合MTT、细胞计数法和平板克隆形成实验观察rHSG对细胞增殖的影响;应用Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期调控蛋白p27Kip1、p21Cip1的蛋白表达变化。结果 Adv-rHSG-GFP转染组C6细胞中:rHSG蛋白的相对表达量均明显高于未转染组和Adv-GFP转染组(P<0.01);流式细胞仪分析结果表明细胞周期被阻滞在G0/G1期,且MTT、细胞计数和平板克隆形成实验显示大鼠胶质瘤细胞增殖受到明显抑制(P<0.01);与未转染组和Adv-GFP转染组相比,周期调控蛋白p27Kip1、p21Cip1表达升高,PCNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 rHSG基因过表达能够抑制大鼠胶质瘤细胞增殖,其机制可能是通过参与细胞周期调节发挥作用。
- 高鹏蒋树财郭晖杨强方志豪赵巍沈冰
- 关键词：神经胶质瘤腺病毒细胞C6
- 岛叶区域病变与癫痫：手术治疗与预后
- 目的岛叶位置深在,周围结构复杂,手术难度大。癫痫是岛叶病变常见临床表现,但有关岛叶区域病变伴发癫痫病人的手术治疗策略和癫痫发作长期预后情况尚缺乏研究报道,在此我们报道我们关于岛叶病变临床表现;癫痫发作特点;手术治疗经验,...
- 王峰孙涛刘诤徐永龙李宗正沈冰
- 关键词：岛叶癫痫手术
- 文献传递
- 大鼠增殖抑制基因通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖被引量：6
- 2016年
- 目的:探究大鼠增殖抑制基因(r HSG)过表达抗C6大鼠胶质瘤细胞增殖的机制。方法:体外培养C6细胞,感染运载r HSG基因的腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP),倒置显微镜及流式细胞仪分析腺病毒载体感染效率;应用流式细胞仪分析C6细胞周期;Western blot检测细胞r HSG蛋白、抑癌基因P53蛋白、细胞周期调控蛋白P21cip1、磷酸化及非磷酸化成视网膜细胞瘤蛋白(p-Rb,Rb)表达变化。结果:腺病毒可以高效的将目的基因导入C6靶细胞;Adv-r HSG-GFP组r HSG蛋白的表达量明显高于PBS组和Adv-GFP组(P<0.01);r HSG过表达的C6细胞停滞于G0/G1期细胞的数量明显增加(P<0.01);P53、P21cip1蛋白表达量明显增加(P<0.01),p-Rb蛋白表达降低(P<0.01),Rb蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:r HSG可能通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖。
- 邹有瑞蒋树财霍国进王军成赵巍沈冰
- 关键词：细胞周期胶质瘤C6细胞
- 面神经监测在大型听神经鞘瘤术中的应用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨大型听神经鞘瘤术中连续面肌肌电图监测对面神经解剖保留和功能保留的作用。方法分析术中应用面神经监测组46例和术中无面神经监测组56例患者资料,比较两组面神经解剖保留率,House-Braekmann评分标准评价两组患者术前、术后2周的面神经功能状态。结果监测组与无监测组面神经解剖保留率分别为91.30%和71.43%;两组术前面神经功能差异无统计学意义(Z=-0.753,P=0.452),术后2周面神经功能差异有统计学意义(Z=-2.109,P=0.035)。结论大型听神经鞘瘤手术中采用面神经监测对面神经的解剖和功能保留有明显效果,可提高患者的生活质量。
- 邹有瑞张斌沈冰
- 关键词：大型听神经瘤面神经术中监测显微手术
- 枸杞多糖对脑出血模型大鼠继发性脑损伤的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum bolysaccharides,LBP)对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)模型大鼠继发性脑损伤的影响。方法 SD大鼠90只,随机分为假手术组、模型组、LBP低剂量组、LBP中剂量组、LBP高剂量组、尼莫地平组,每组15只;术前15日,LBP低剂量、LBP中剂量、LBP高剂量组分别给予LBP50、100、200mg·kg^(-1)灌胃,尼莫地平组给予尼莫地平10mg·kg^(-1)灌胃,假手术组和模型组给予等量的生理盐水,每日1次;灌胃结束后,采用自体血尾状核注射法制作大鼠脑出血模型;在脑出血后4、8、12、24和48h分别对各组大鼠进行神经功能评分;评分结束后断头取脑,检测各组大鼠脑组织水肿体积、脑含水量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;HE染色后观察脑出血区及其周围脑组织的神经细胞、胶质细胞等的大小、形态。结果与假手术组比较,其他各组大鼠神经功能评分较高、脑组织水肿体积较大、脑含水量较高、SOD活性较低、MDA含量较多(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,LBP各组大鼠神经功能评分仅部分时点减低(P<0.05),脑组织水肿体积减小、脑含水量降低、SOD活性增高、MDA含量降低(P<0.05或P<0.01)。假手术组HE染色结果未见明显异常,模型组与各给药组HE染色结果均显示脑出血区均有血凝块形成,出血区周围脑组织有不同程度的破坏,并可见排列紊乱的神经细胞与神经胶质细胞。结论预防性应用枸杞多糖能够减轻脑出血后继发性脑损伤,对脑出血后脑组织起到一定的保护作用,对预防脑出血有积极的意义。
- 霍国进邹有瑞夏明蒋树财王军成沈冰
- 关键词：枸杞多糖脑出血继发性脑损伤
- 大鼠增殖抑制基因表达变化与恶性脑胶质瘤生长的关系被引量：13
- 2009年
- 目的:探讨大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)表达变化与恶性脑胶质瘤生长之间的关系,为外源性rHSG治疗提供实验依据。方法:采用立体定向法,于尾状核注射C6细胞建立SD大鼠脑胶质瘤动物模型;采用SABC免疫组织化学法检测注射C6细胞后第9、15和21天,脑胶质瘤中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、rHSG及微血管度(microvessel density,MVD)的表达;RT-PCR法检测不同生长期脑胶质瘤中rHSG mRNA的表达。结果:第9、15和21天脑胶质瘤中PCNA标记指数和MVD高于对照组,rHSG蛋白的表达低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠胶质瘤rHSG mRNA相对表达量分别为(13.53±2.11)%、(10.39±2.71)%和(8.86±1.91)%,低于对照组的(19.94±3.23)%。差异有统计学意义(P<0.05)。结论:rHSG表达下调可能与大鼠脑恶性胶质瘤的发生、发展及血管增生有关,rHSG的高表达可能会抑制肿瘤的生长。
- 郝文炯刘国华孙涛沈冰
- 关键词：神经胶质瘤
