汪佳妮
- 作品数：7 被引量：95H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种大丽轮枝菌基因敲除的方法
- 本发明提供一种大丽轮枝菌基因敲除的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：构建用于同源重组的重组质粒，该重组质粒由载体和同源重组DNA片段组成，所述同源重组DNA片段含有用于替代待敲除基因的外源抗性基因和位于该外源抗性基因...
- 戴小枫田李陈捷胤汪佳妮
- 文献传递
- 大丽轮枝菌Vd991 T-DNA插入突变体库的构建及致病相关基因的筛选
- 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)是棉花黄萎病的病原菌。近年来,黄萎病在我国南北方棉区发展蔓延迅速,危害也在逐年加重,已成为当前制约我国棉花生产的突出问题。常规育种方法和其它防治方法如物理...
- 汪佳妮
- 关键词：大丽轮枝菌农杆菌介导T-DNA插入突变表型鉴定棉花黄萎病
- 文献传递
- 高效大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)基因敲除体系的构建被引量：8
- 2011年
- 【目的】为了深入研究大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)致病基因的功能,构建高效大丽轮枝菌基因敲除体系。【方法】融合PCR构建基因敲除载体;利用农杆菌介导法转化大丽轮枝菌;使用在T-DNA之间加入致死基因的双元载体,使T-DNA随机插入转化子在添加5-氟脱氧尿苷的培养基上不能存活,实现对随机插入转化子的"反向筛选"。【结果】对大丽轮枝菌腺嘌呤合成酶基因和几丁质合成酶基因进行基因敲除验证,基因敲除转化子在总转化子中的比例分别达到87%和44%。【结论】成功构建大丽轮枝菌高效基因敲除体系,为大丽轮枝菌致病基因的功能验证提供了技术平台。
- 田李陈捷胤汪佳妮王金龙戴小枫
- 关键词：大丽轮枝菌基因敲除融合PCR农杆菌介导转化致死基因
- 棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体表型特征和侧翼序列分析被引量：36
- 2010年
- 【目的】为鉴定棉花黄萎病菌随机插入突变体的表型特征,构建黄萎病菌遗传转化和功能基因研究的技术平台。【方法】采用农杆菌介导的T-DNA插入和高效TAIL-PCR方法。【结果】获得了2628个棉花黄萎病菌VD991的T-DNA随机插入的突变体和15个突变体插入位点的侧翼序列。部分突变体的表型特征和插入位点侧翼序列分析表明,①突变体的菌落形态分为菌丝型、菌核型和中间型3类,菌核型约占7.3%;②在摇瓶培养条件下,突变体产孢高峰在接种后第5—6天,菌核型突变体的产孢能力普遍高于菌丝型;③棉花黄萎病菌VD991可以产生胞外蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶。筛选获得蛋白酶分泌缺失的突变体3个,淀粉酶分泌缺失的突变体1个,果胶酶分泌降低的突变体6个;④菌核型突变体的致病力普遍高于野生型。获得了6个致病力减弱的突变体;⑤突变体侧翼序列与同种的大丽轮枝菌菌株VDLs.17基因组的序列一致性在95%—100%之间,与不同种的黑白轮枝菌VaMs.102序列的一致性为87%—94%。【结论】农杆菌介导的T-DNA随机插入可用于棉花黄萎病菌突变体的构建,突变体微菌核的产生与其产孢能力、致病性存在相关关系。美国大丽轮枝菌菌株VDLs.17基因组可用作黄萎病菌VD991功能基因研究的参考序列。
- 徐荣旗汪佳妮陈捷胤戴小枫
- 关键词：黄萎病菌T-DNA插入表型鉴定
- 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae VdLs.17)分泌组预测及分析被引量：44
- 2011年
- 【目的】预测并分析大丽轮枝菌基因组范围内的分泌蛋白,为大丽轮枝菌分泌蛋白致病机理的研究奠定基础。【方法】利用已公布的大丽轮枝菌全基因组序列,组合使用生物信息学软件SignalP、TargetP、TMHMM、Big-pi和PROSITE,预测大丽轮枝菌基因组范围内所有分泌蛋白,定义为分泌组。统计分析分泌组中蛋白N-端信号肽特点;应用碳水化合物活性酶类数据库和病原菌-寄主互作蛋白数据库对分泌组蛋白进行注释,预测分泌组中潜在果胶酶、纤维素酶和病原菌寄主互作蛋白;利用真菌激发子的保守结构域,预测分泌组中潜在的激发子蛋白集;应用BLASTP程序比较分析大丽轮枝菌和黑白轮枝菌分泌组,获得大丽轮枝菌相对于黑白轮枝菌特异的分泌蛋白。【结果】大丽轮枝菌分泌组共有922个蛋白。信号肽分析表明,以19个氨基酸为信号肽的蛋白数目最多,非极性氨基酸丙氨酸的出现频率最高,而有带电侧链的氨基酸天冬氨酸和谷氨酸的出现频率最低,信号肽的-3和-1位置上的氨基酸相对保守。大丽轮枝菌分泌组含有158个潜在的碳水化合物活性酶类,其中,包括10个果胶水解酶和14个果胶裂解酶;190个潜在的病原菌-寄主互作蛋白、97个含有RxLx[EDQ]模体的蛋白和52个富含半胱氨酸的小分子量分泌蛋白;58个相对于黑白轮枝菌分泌组特异的蛋白。【结论】本文建立了预测大丽轮枝菌分泌组蛋白的方法。分泌组蛋白信号肽长度具有高度的变异性,氨基酸组成多为脂肪族氨基酸,序列在C-端结构域较为保守。分泌组中包含大量潜在的果胶降解酶、病原菌-寄主互作蛋白、RxLx[EDQ]模体蛋白和富含半胱氨酸的小分子量蛋白等致病相关蛋白。
- 田李陈捷胤陈相永汪佳妮戴小枫
- 关键词：大丽轮枝菌分泌蛋白信号肽激发子
- 棉铃虫对转Bt基因棉花的抗性及其治理策略被引量：11
- 2009年
- 本文综述了棉铃虫对转Bt基因棉花的抗性机制和抗性风险,重点讨论了基因策略包括转入多个杀虫基因、定向和器官特异表达、侵害诱导表达、调控表达、高杀死与低表达策略,田间策略如Bt棉品种的轮作混植、降低化学防治经济阈值、农艺措施和庇护所策略,国家宏观调控如实施分区种植管理、加强种子生产经营管理、强化抗性动态检测、严格安全性评价等抗性治理策略与技术。
- 汪佳妮戴小枫
- 植物抗病基因和提高植物抗病性的方法
- 本发明提供了植物抗病基因和一种提高植物抗病性的方法。根据本发明提供的植物抗病基因，所述植物抗病基因为基因a或基因b，其中，所述基因a为编码由SEQ ID NO：1所示氨基酸序列组成的蛋白质的基因，所述基因b为编码由SEQ...
- 戴小枫陈捷胤田李汪佳妮
- 文献传递
