梁超 作品数:33 被引量:84 H指数:6 供职机构: 中国农业科学院上海兽医研究所 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 上海市科技兴农重点攻关项目 国家生猪现代产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
猪伪狂犬病毒gB、gC和gD蛋白多抗制备及交叉中和抗体效价测定 被引量:8 2016年 为研究猪伪狂犬病毒(PRv)主要免疫原性基因的抗原变异情况,本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔,对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价的i/n,4定。结果显示,JS.2012和Bartha.K61株的gC蛋白和gD蛋白多抗对PRVJS.2012变异株、SC经典强毒株和Bartha.K61弱毒疫苗株的交叉中和效价均无显著差异;而两个病毒株的2B蛋白多抗对JS.2012和sc株的中和效价较低,分别为1:29.0~56.7和1:56.2~137.0,对Bartha—K61株以及其他毒力基因缺失弱毒疫苗株的中和效价较高,分别为1:75.0--490.0和1:198.6~986.9,差异显著,推测该结果可能与PRV毒力基因缺失有关。本研究为进一步鉴定PRV流行株的抗原变异奠定基础。 刘飞 童武 梁超 杨莘 郑浩 童光志关键词:猪伪狂犬病毒 多克隆抗体 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-ΔgI/gE株)的制备及免疫效力评阶 童武 李国新 郑浩 刘飞 梁超 李林 田青 曹艳云 武吉强 王涛 郑旭晨 童光志伪狂犬病毒变异株(JS-2012)对仔猪的致病性研究 被引量:37 2014年 本实验室2012年从江苏省太仓市某发病猪场分离到1株变异的伪狂犬病毒,命名为JS-2012。为了研究该分离株对仔猪的致病性,将12头15日龄的伪狂犬病毒阴性仔猪随机分为3组,其中2组(每组5头猪)分别通过肌肉注射和滴鼻接种JS-2012毒,第3组2头猪做空白对照。接种病毒的仔猪在攻毒后24 h体温均开始升高,4 d后开始死亡,死亡率为100%。临床观察发现,滴鼻组仔猪发病死亡明显快于肌肉注射组。对病死猪进行剖解,均可见大脑血管扩张并出血等典型的伪狂犬病病理变化。病理切片显示猪的脑蛛网膜下腔严重出血,其他各脏器也均有严重病理变化。结果表明该变异株JS-2012为伪狂犬强毒毒株。 童武 郑浩 单同领 刘飞 梁超 李国新 姜一峰 于海 高飞 周艳君 童光志关键词:伪狂犬病毒 仔猪 一株携带EGFP基因的重组伪狂犬病毒变异株的构建 被引量:1 2015年 本研究运用同源重组的方法,在伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株PRV JS-2012基础上,构建了一株携带增强型绿色荧光蛋白基因的标记重组伪狂犬病毒,命名为r PRV JS-2012-EGFP。经PCR方法鉴定及荧光显微镜观察分析,结果表明重组病毒构建成功,并能在感染细胞中稳定表达绿色荧光蛋白。生长曲线和空斑试验结果显示,r PRV JS-2012-EGFP与亲本株PRV JS-2012在体外具有相似的生长特性。将r PRV JS-2012-EGFP毒接种14日龄PRV阴性仔猪,能使实验猪100%发病,病死率高达40%,表明r PRV JS-2012-EGFP是一株具有强致病力的标记伪狂犬病毒变异株,在伪狂犬病毒变异株致病机制研究中具有一定的使用价值。 童武 郑浩 梁超 刘飞 曹艳云 李林 田青 郑旭晨 单同领 李国新 童光志关键词:伪狂犬病毒 同源重组 重组病毒 奶山羊妊娠黄体的组织形态观察 被引量:1 2010年 【目的】观察奶山羊妊娠期间黄体组织形态的变化。【方法】运用组织学常规石蜡包埋-HE染色方法及透射电镜技术,对不同妊娠时期山羊卵巢黄体的组织结构变化进行详细观察。【结果】妊娠黄体外包结缔组织被膜,被膜内伸形成小梁;黄体实质主要由粒性黄体细胞(大黄体细胞)和膜性黄体细胞(小黄体细胞)组成,前者数量多,主要位于黄体的中央,后者数量较少,位于黄体的周边及少量散布于大黄体细胞之间。退化黄体细胞数量随妊娠周龄增加而逐渐增加;黄体细胞的结构退行性变化表现为:细胞形态多变,胞质呈强嗜酸性,胞核固缩或碎裂;电镜下可见细胞器发生变性,核内异染色质数量逐渐增多,后期核膜出现皱缩,线粒体嵴断裂、脱落,分泌颗粒数量减少,脂滴发生退化聚集,滑面内质网减少或消失,细胞质内空泡数量增多、细胞间隙加大。【结论】黄体组织的形态结构随所处妊娠的不同阶段而变化,退化黄体细胞数量随周期推进逐渐增加。 张灵枝 王磊磊 梁超 李阳 高辰 卿素珠关键词:组织学 妊娠期 奶山羊 猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)最小免疫剂量测定 被引量:7 2017年 为了确定猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)的最小免疫剂量,本研究将25头14日龄仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型病原抗体均为阴性)随机分成5组,每组5头。第1~4组分别接种猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)0.5、1、2、3 m L/头,免疫28 d后各组参照第1次免疫的剂量分别加强免疫1次,第5组实验猪不做处理作为阴性对照。免疫后,每周采集各组猪血清检测抗体水平。待第2次免疫28 d后,5组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012株第5代强毒2 m L,含病毒105.0TCID50/头。结果表明:第1次免疫后14 d,第2~4组猪PRV g B抗体全部转为阳性,而第1组猪在第1次免疫后21 d全部转阳。攻毒后,第1组有1头猪发病,表现精神沉郁、厌食和轻微神经症状,其余4头猪有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为80%;第2~4组,实验猪只有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为100%;第5组猪在攻毒后48 h,体温迅速上升到41℃以上,并表现为明显的精神沉郁、厌食和神经症状,发病率为100%,死亡率为40%。由此确定猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)最小免疫剂量为1 m L/头。 童武 李国新 李国新 刘飞 郑浩 田青 刘飞 梁超 田青 李林 曹艳云 单同领 王涛关键词:伪狂犬病毒 灭活疫苗 最小免疫剂量 伪狂犬病毒变异株的弱毒株及其应用 本发明公开了一种伪狂犬病毒变异株的弱毒株,该弱毒株是伪狂犬病毒变异株PRVJS-2012株的基因缺失弱毒株,其缺失的基因序列包括:PRV JS-2012变异株基因组中gE基因CDS区的全部或部分DNA序列。本发明还公开了... 童光志 童武 梁超 徐宏军 高鹏 郑浩 李国新文献传递 伪狂犬病毒基因缺失弱毒株及其制备方法和应用 本发明公开了一种伪狂犬病毒基因缺失弱毒株,其缺失的基因序列包括:编码伪狂犬病毒gI蛋白第198-366位氨基酸的核苷酸序列、以及编码伪狂犬病毒gE蛋白第1-404位氨基酸的核苷酸序列。本发明还公开了一种伪狂犬病毒基因缺失... 童光志 童武 郑浩 刘飞 梁超 周艳君 单同领 于海 姜一峰 高飞文献传递 基于iTRAQ技术伪狂犬病毒感染宿主细胞差异表达蛋白质组分析 被引量:4 2017年 为了研究伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)感染宿主细胞后宿主蛋白的差异表达情况,寻找PRV与细胞相互作用的重要分子,本试验将PRV接种PK-15细胞,运用同位素标记(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)结合色谱/串联质谱联用技术,开展病毒感染细胞后差异表达蛋白分析,并通过qPCR对其数据进行验证。以未接毒细胞为对照,通过数据库检索,分析出3 062个蛋白,共鉴定到27个差异表达蛋白,其中21个蛋白下调,6个蛋白上调。这些差异蛋白主要参与代谢过程、生物调控、应激反应以及定位等生物学过程,具有结合活性、催化活性、转录活性等分子功能。NFκB1、PIK3R2、HSPA1L等差异蛋白在多条通路中发挥作用。POP1、UTP15和ND4的表达变化情况与iTRAQ结果变化趋势一致,证明了该数据的可靠性。本试验研究结果为进一步研究PRV致病机制及宿主免疫应答提供理论依据。 梁超 童武 郑浩 刘飞 李林 叶超 于之清 李国新 周恩民 童光志关键词:伪狂犬病毒 ITRAQ 差异表达蛋白 新发猪伪狂犬病病原致病性及免疫原性分析 伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的以发热,奇痒,脑脊髓炎为主要特征的一种烈性传染病。猪是伪狂犬病毒的天然宿主、贮存者和传播者。此病对养猪业危害极大,主要引起妊娠母猪流产、死胎、木... 童光志 童武 郑浩 刘飞 梁超 李国新