杨雯涵
- 作品数:7 被引量:6H指数:1
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种耐热木聚糖酶及其编码基因与应用
- 本发明提供了一种耐热木聚糖酶及其编码基因与应用,所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了一种分泌耐热木聚糖酶的菌株,保藏编号为CGMCC No...
- 曹云鹤杨雯涵郭晓晶董冰韩帅娟陆文清
- 文献传递
- 一种酸性木聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达及体外活性评价研究被引量:1
- 2013年
- 通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xynA串联双拷贝工程菌,提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中,双拷贝菌株发酵活力达3 574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃,最适反应pH为2.2~3.4,在pH 1.7的酸性缓冲液下保持100 min,酶活残留70%以上。重组木聚糖酶对胃蛋白酶和胰蛋白酶也具有较好的耐受性。该木聚糖酶在低pH条件下的高催化活性、耐酸性及蛋白酶耐受性,使之具有较好的应用前景。通过体外模拟猪胃肠道环境以快速评价重组酶的作用效果。试验以小麦型日粮作为基础日粮,设计4个处理组,重组酶的添加量分别为0 U/kg、2 000 U/kg、4 000 U/kg和6 000 U/kg,每个处理5个重复,使用SDS-Ⅱ单胃动物仿生消化系统模拟猪的胃肠道环境消化试验日粮,消化后的残渣烘干后测定其总能、粗蛋白质、中性洗涤纤维含量以计算其消化率。结果表明,添加重组酸性木聚糖酶显著提高了总能、粗蛋白质(线性和二次;P<0.01)和中性洗涤纤维的消化率(线性和二次;P<0.05)。重组酶的最适宜添加量为4 000 U/kg。
- 杨雯涵郭晓晶陈轶群吕俊楠谢飞曹云鹤
- 关键词:毕赤酵母体外法
- 一种脂肪酶编码基因及其工程菌株
- 本发明提供了一种脂肪酶编码基因及其工程菌株,所述基因序列如SEQ ID NO:1所示,所述菌株含有表达所述脂肪酶的质粒,所述菌株为巴斯德毕赤酵母(CGMCC NO.8569),该菌株表达得到的脂肪酶,在5升发酵罐的发酵活...
- 曹云鹤董冰陆文清郭晓晶谢飞杨雯涵
- 文献传递
- 一种脂肪酶编码基因及其工程菌株
- 本发明提供了一种脂肪酶编码基因及其工程菌株,所述基因序列如SEQ ID NO:1所示,所述菌株含有表达所述脂肪酶的质粒,所述菌株为巴斯德毕赤酵母(CGMCC NO.8569),该菌株表达得到的脂肪酶,在5升发酵罐的发酵活...
- 曹云鹤董冰陆文清郭晓晶谢飞杨雯涵
- 文献传递
- α-半乳糖苷酶对生长猪生长性能及营养物质体内外消化率的影响被引量:5
- 2015年
- 本试验旨在探讨日粮不同仪一半乳糖苷酶添加水平对生长猪生长性能和营养物质表观消化率的影响,并研究仿生酶法对酶制剂评价试验的准确性。试验选用180头生长猪(杜×长×大),试验初始体重为(18.45±2.00)kg,按照随机区组试验设计,分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复6头猪(公、母各半)。日粮d一半乳糖苷酶添加量为0、100、200、300、400U/l(g,试验期为24d。仿生酶法使用相同处理,每个处理5个重复,每个重复1根模拟消化管。结果表明:相对于其他处理组,添加300U/kg α-半乳糖苷酶显著提高了平均日采食量和平均日增重(P〈0.05);随着α-半乳糖苷酶添加量的增加,大部分营养物质的体内外消化率呈二次提高(P〈0.05);仿生酶法的消化率与体内消化率高度相关。本试验证明,18~33kg生长猪的该α-半乳糖苷酶最适宜添加水平为300U/kg,且仿生酶法可准确预测体内消化率,用于酶制剂的体外评价试验。
- 陈轶群杨雯涵郭晓晶韩帅娟杨勇智曹云鹤
- 关键词:Α-半乳糖苷酶消化率
- 一种耐热木聚糖酶及其编码基因与应用
- 本发明提供了一种耐热木聚糖酶及其编码基因与应用,所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了一种分泌耐热木聚糖酶的菌株,保藏编号为CGMCC No...
- 曹云鹤杨雯涵郭晓晶董冰韩帅娟陆文清
- β-1,3-1,4葡聚糖酶基因双拷贝工程菌株的构建与发酵研究
- 2013年
- 本试验旨在研究β-1,3-1,4葡聚糖酶双拷贝基因毕赤酵母工程菌株的构建及发酵。首先,通过对质粒pGAP-glu-opt进行PCR扩增获得密码子优化的β-1,3-1,4葡聚糖酶基因glu-opt,用EcoR I和Not I双酶切后与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,获得重组质粒p9K-glu-opt。该重组质粒经Sac I线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,利用不含组氨酸的MDS平板和摇瓶培养,筛选重组菌株,命名为GS115/9K-glu-opt。制备GS115/9K-glu-opt感受态细胞,再用线性化的重组质粒pPIC-glu-opt二次转化,在含有抗生素Zeocin的YPDS平板上筛选glu-opt基因双拷贝重组菌株GS115/2xglu-opt。双拷贝重组菌在10 L发酵罐中进行高密度发酵培养及甲醇诱导表达,β-1,3-1,4葡聚糖酶最高酶活达到21 600 U/mL,约为单拷贝工程菌株X33/pPIC-glu-opt发酵活力的1.44倍;蛋白表达量达8.4 g/L,约为X33/pPIC-glu-opt的1.68倍。
- 裴红蕾陈轶群吕俊楠杨雯涵李志民曹云鹤
- 关键词:毕赤酵母发酵