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杨琨: 作品数：118 被引量：351H指数：10; 供职机构：第四军医大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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人脐血间充质干细胞抑制异体T淋巴细胞反应的实验及临床意义被引量：5: 2007年; 目的:研究人脐血间充质干细胞(MSCs)对异体外周血T淋巴细胞抑制的影响.方法:分离、扩增脐血MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定.取分离培养的脐血MSCs,与经分离的异体淋巴细胞共培养,在植物血凝素(PHA)刺激下,用MTT还原法测定细胞增殖,观察脐血MSCs对PHA刺激的T淋巴细胞转化抑制作用.采用ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平.结果:脐血MSCs在PHA刺激下可抑制T淋巴细胞增殖,且其培养上清也具有抑制异体淋巴细胞增殖转化能力.ELISA检测7d共培养上清中IFN-γ和IL-4两种细胞因子的含量,发现IFN-γ分泌水平下调、IL-4分泌水平部分上调.结论:脐血MSCs具有抑制异体淋巴细胞免疫反应,降低移植物抗宿主反应(GVHD)的作用.具有研究价值和应用潜能.; 王茜杨琨白海吴涛路继红; 关键词：间质干细胞外周血T淋巴细胞白细胞介素4

一种检测A型肉毒毒素的高灵敏度酶联免疫吸附法被引量：3: 2012年; 目的:建立检测A型肉毒毒素的酶联免疫吸附法。方法:利用重组A型肉毒毒素重链羧基端片段作为免疫原和B淋巴细胞杂交瘤技术,获得了56株高亲和力的抗A型肉毒毒素单克隆抗体(mAb),建立了检测A型肉毒毒素的双mAb夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:该方法理论检测下限达到了8.34 pg/mL,检测天然A型肉毒毒素制剂时其实际检测下限可达0.78 LD50/mL,与其他型别的肉毒毒素均未见交叉反应。通过测定基质中的回收率,发现基质中的相关的蛋白对检测具有较大的影响。结论:该方法具有灵敏度高,特异性好,使用方便等优点,具有较高的的实用价值。; 刘志佳李永明宋朝君李娜卢卫嘉孙元杰毛晓燕杨琨金伯泉; 关键词：A型肉毒毒素酶联免疫吸附法单克隆抗体

主动PBL方法在八年制《医学免疫学》教学中的应用与思考被引量：18: 2012年; 八年制医学生的培养目标是培养临床医学博士。医学免疫学是与临床联系较为紧密的基础课之一,在教学中如何加强学生处理临床问题的逻辑思维能力和提高探讨临床表象之下深层次科学问题的科研思维水平,一直是免疫学教学的主要关注之一。PBL（Problem based learning,PBL）教学方法由美国的神经病学教授Barrows于1969年首创,是以问题为导向的教学方法,是以学生为中心的教育方式,; 张赟杨琨陈丽华宋朝君方亮李琦庄然金伯泉温伟红杨安钢; 关键词：《医学免疫学》免疫学教学逻辑思维能力以问题为导向以学生为中心

SADA，一种新的鉴定未知肿瘤/睾丸抗原的方法: 研究背景:肿瘤/睾丸抗原(cancer/testis antigen,CTA)属肿瘤抗原的一类,迄今为止已命名了46个基因家族共编码91个不同的转录子。在正常组织中仅限制性表达于睾丸,其他正常组织不表达,而在某些肿瘤组织...; 宋朝君周幸春王鑫方亮杨琨金伯泉; 文献传递

Tfh细胞在重症肌无力患者胸腺中的表达及作用机制被引量：4: 2015年; 目的探讨Tfh细胞在重症肌无力(MG)患者胸腺中乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)产生中的作用及机制。方法收集28例MG患者、9例无胸腺异常的先天性心脏病患者和9例未合并MG的胸腺增生患者。采用流式细胞术检测胸腺中滤泡辅助T(Tfh)细胞和B细胞的比例,分别通过RT-PCR和Western-Blotting技术检测胸腺中Th1、Th2和Tfh细胞特异性转录因子T-bet、GATA-3、Bcl-6 mRNA水平和细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IL-21表达;采用HE和多标免疫荧光染色观察胸腺中生发中心以及Tfh细胞和B细胞之间的组织结构关系;采用放射免疫沉淀技术(RIA)检测MG患者胸腺和血清中AChR-Ab滴度;免疫磁珠提取胸腺中Tfh细胞和B细胞共培养,检测培养上清中IL-21和AChR-Ab滴度水平。结果 MG患者胸腺中Tfh细胞和B细胞比例及Tfh细胞相关转录因子Bcl-6mRNA水平和细胞因子IL-21表达均较对照组增高(P<0.01);MG患者胸腺中抗AChR-Ab滴度较对照组增高(P<0.01);MG患者胸腺中存在异位生发中心,且在生发中心内Tfh细胞和B细胞存在共定位;MG患者胸腺Tfh和B细胞共培养上清中IL-21和AChR-Ab水平较对照组增多(P<0.01),且AChR-Ab产生可以被IL-21中和抗体阻断。结论 Tfh细胞通过在MG患者胸腺中辅助B细胞形成异位生发中心及促进抗AChR-Ab产生参与MG的发生和发展。; 张晓燕常婷刘沙沙杨琨李柱一; 关键词：重症肌无力胸腺增生生发中心

医学免疫学本科生理论课教学探讨被引量：2: 2007年; 医学免疫学是医学本科生必修的一门医学基础课程,学科本身具有概念抽象、各部分内容联系密切、在细胞和分子水平发展迅速等特点,如何根据医学免疫学自身的特点和教学中存在的问题,有针对性地选择适合本学科的教学方式和手段,对于学员理解和掌握医学免疫学课程,提高教学效果至关重要,根据几年来的教学经验,就本科生的理论课教学谈几点体会。; 温伟红杨琨张赟王春艳庄然金伯泉杨安钢; 关键词：医学免疫学教学方法理论教学教学探讨

过敏性紫癜患儿血清TNF-α,IL-6和IL-8变化的意义被引量：14: 2000年; 陈艳妮施伟栋李琦刘雪松杨琨金伯泉; 关键词：过敏性紫癜 TNF-Α IL-6 IL-8

人CD226(PTA1)分子胞膜外区截短体真核表达载体的构建、表达及其识别结构域的分析被引量：1: 2003年; 目的　确定一套CD2 2 6单克隆抗体 (McAb)识别CD2 2 6分子胞膜外区结构域的部位。方法　应用计算机软件分析CD2 2 6分子蛋白质序列疏水性 ,确定其亲水性区域。采用PCR方法扩增CD2 2 6分子基因序列 ,分别缺失相应亲水性区域 ,构建CD2 2 6截短体重组真核细胞表达载体pcDNA3 PTA1T1和pcDNA3 PTA1T2。测序正确后 ,转染COS7细胞 ,抗CD2 2 6分子多克隆抗体间接免疫荧光染色 ,流式细胞术检测CD2 2 6分子截短体的表达。表达成功后 ,采用间接免疫荧光染色和流式细胞术分析 ,用一套CD2 2 6McAb检测与截短突变体的免疫反应性 ,从而确定CD2 2 6McAb识别CD2 2 6分子结构域的部位。结果　PCR扩增出CD2 2 6分子相应目的片段序列 ,定向克隆入pcDNA3真核表达载体 ,DNA序列测定正确。转染COS7细胞后 ,流式细胞术检测CD2 2 6截短体分子有较高水平的表达。CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1和FMU1～ 7均可识别CD2 2 6全长分子 ;LeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU4和FMU5与截短突变体PTA1T1和PTA1T2均无反应性 ;FMU3可结合PTA1T1分子 ,不结合PTA1T2分子 ;FMU6和FMU7均可结合PTA1T1及PTA1T2分子。结论　CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU3、FMU4和FMU5识别CD2 2 6分子胞膜外区D1结构域 ,其中FMU3识别的位点位于V1和V2环之间 ;FMU6?; 贾卫刘雪松张新海朱勇张贇李琦杨琨欧阳为明宁双飞金伯泉; 关键词：CD226 PTA1 基因表达

酶联免疫化学发光法检测SEB方法的建立: 目的：建立测定SEB的酶联免疫化学发光法(CLIA),使其敏感性达到国外同类方法的检测水平.意义：金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)是一组可溶性单肽链蛋白,经典的SE分为SEA、SEB、SEC、SED、SEE五型.SE引起的食...; 刘飞李永明董邦权宋朝君李琦李娜杨琨金伯泉; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B

硕士研究生《医学免疫学》教学初探被引量：9: 2000年; 金伯泉朱勇张新海杨琨李德敏刘雪松李琦张建平; 关键词：医学免疫学教学方法硕士研究生

杨琨

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