杨建林
- 作品数：114 被引量：96H指数：5
- 供职机构：三峡大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目湖北省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 多胺类似物四丁基丙二胺对人早幼粒白血病细胞HL-60生长的影响
- 2014年
- 目的:研究新多胺类似物四丁基丙二胺(TBP)对人早幼粒白血病细胞HL-60生长的影响及其作用机制。方法:MTT比色法分析TBP对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞术检测TBP对HL-60细胞周期的影响,DNA片段化和线粒体膜电位分析用于检测细胞凋亡,化学发光法检测TBP对多胺降解代谢酶精胺氧化酶(SMO)和乙酰多胺氧化酶(APAO)活性的影响。结果:TBP通过抑制细胞周期和诱导细胞凋亡显著抑制HL-60细胞增殖;随TBP药物浓度增高,HL-60细胞凋亡水平增加,SMO和APAO的活性亦显著增高。结论:新多胺类似物TBP能够通过诱导多胺降解代谢途径关键酶活性和诱导细胞凋亡而抑制HL-60细胞增殖,具有抗白血病治疗的潜在应用前景。
- 王清王凯王艳林杨建林曹春雨
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病多胺类似物细胞凋亡
- 小鼠钙网蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备
- 2011年
- 钙网蛋白(calreticulin,CRT)是存在于哺乳动物细胞具有高度保守性和多种生物学活性的蛋白,为了更好的研究其生物学活性,本课题组通过PCR方法扩增CRT截短基因,将其克隆到原核表达载体PET-28a(+)中,经大肠杆菌表达并纯化CRT蛋白。以纯化的CRT蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,制备多克隆的CRT血清。进一步采用Western blot、ELISA、流式细胞术等技术对制备的抗体进行初步鉴定。结果显示:原核表达重组质粒在大肠杆菌中能高效表达CRT蛋白;获得多抗血清应用Western blot鉴定几种细胞株中CRT,流式细胞术检测CRT的外翻现象。因此我们得到结论——成功制备了CRT蛋白及其抗体,并有很好的特异性,能识别人鼠两种源性的CRT。
- 汪龚泽刘朝奇杨建林聂纪芹
- 关键词：钙网蛋白原核表达抗体制备
- 一种小分子抑制剂SLD1338及其在制药中的应用
- 本发明提供一种小分子抑制剂SLD1338，该小分子抑制剂的结构式为：<Image file="DDA0001523740300000011.GIF" he="196" imgContent="drawing" imgFo...
- 曹春雨王艳林杨建林孙丽丹
- 文献传递
- 新型精胺氧化酶小分子抑制剂SI-4650抗人骨肉瘤活性及分子机制研究被引量：3
- 2019年
- SI-4650是本实验室新近发现的一种新型精胺氧化酶(spermine oxidase, SMO)小分子抑制剂,本研究的目的是进一步探究SI-4650对人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移能力的影响及其分子机制。研究利用化学发光法和高效液相色谱法分析SI-4650对143B细胞中SMO活性的影响; DIOC6(3)探针染色/流式细胞术分析细胞中活性氧的堆积水平; MTT法和流式细胞术检测SI-4650对细胞增殖和周期的影响; Transwell法和Western blot分析细胞迁移相关蛋白的表达; PI/FITC-Annexin V双染、倒置荧光显微镜观察和Western blot法分析细胞凋亡和自噬。结果显示,SI-4650可显著性抑制人骨肉瘤143B细胞内SMO酶活性,高效抑制143B细胞的增殖和迁移能力,并引起S期周期阻滞,其机制可能与干扰多胺代谢、活化线粒体介导的细胞凋亡途径和引起自噬性死亡相关。上述研究结果提示,SI-4650具有用于人骨肉瘤临床治疗的潜在价值。
- 周游王艳林孙丽丹曹春雨杨建林
- 关键词：多胺代谢人骨肉瘤细胞自噬
- DZNep诱导HL-60细胞凋亡和生长抑制
- 2018年
- [目的]研究S-腺苷同型半胱氨酸水解酶抑制剂DZNep(3-Deazaneplanocin A)对人早幼粒白血病细胞HL-60增殖的影响。[方法]细胞计数法分析DZNep(10~500 nmol/L)处理对HL-60细胞增殖的影响;以DNA片段化、Annexin-V/PI法和线粒体膜电位法检测DZNep处理对HL-60细胞凋亡的影响。Western Blot检测细胞凋亡相关基因Bax和细胞色素C的表达。[结果]50 nmol/L DZNep对HL-60细胞的24、48、72h增殖抑制率达18%、44.5%、81.7%。Annexin-V/PI法显示DZNep能诱导HL-60细胞发生剂量依赖性的细胞凋亡。进一步研究发现,DZNep(50nmol/L)处理24 h诱导23.8%的HL-60细胞发生线粒体途径介导的细胞凋亡,表现为细胞DNA片段化、线粒体膜电位下降和Bax基因表达上调,同时伴有细胞浆内细胞色素C增加。[结论]DZNep能在较低浓度下抑制HL-60细胞增殖并通过激发线粒体凋亡途径诱导HL-60细胞凋亡,具有抗人早幼粒细胞白血病治疗的潜在应用前景。
- 李倩王清杨建林夏燕王艳林曹春雨
- 关键词：早幼粒细胞白血病细胞凋亡
- 四丁基丙二胺对人MG63骨髓瘤细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响被引量：6
- 2012年
- 目的分析新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutylpropanediamine,TBP)对人骨髓瘤MG63细胞生长的影响及其机制。方法 MTT法用于分析细胞增殖,流式细胞分析用于细胞周期和凋亡细胞鉴定,琼脂糖凝胶电泳用于分析DNA片段化,Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白的表达水平,Transwell技术用于分析细胞的迁移能力。结果TBP明显抑制MG63细胞的增殖和迁移能力,抑制效应呈时间和剂量依赖性。流式细胞分析发现,TBP干扰细胞周期,导致G1和G2期细胞比例升高,但S期细胞比例明显下降,同时凋亡细胞数量大幅增加。TBP处理后,细胞染色体DNA出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象,细胞质中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。结论 TBP具有抑制人骨髓瘤MG63细胞增殖的药理活性,其机制与抑制细胞周期和诱导细胞凋亡有关,提示TBP具有用于临床骨髓瘤治疗的潜在价值。
- 张贺吉王凯韩钰杨建林王艳林
- 关键词：多胺多胺类似物骨髓瘤细胞
- 鹿仙草多糖通过靶向miR-122a改善酒精性肝病的实验研究被引量：8
- 2020年
- 研究鹿仙草总多糖(total polysaccharides from Balanophora henryi,TBP)对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的作用,并探究其可能的作用机制。C57BL/6N小鼠随机分为4组,配对饮食对照组,酒精饮食模型组,模型+TBP干预组,TBP对照组。采用Gao-binge法制备慢性ALD小鼠模型,同时用400 mg·kg^-1 TBP进行干预,喂养6周后留取血清和组织待检测。与饮食对照组相比,模型组小鼠肝组织表现出明显的脂肪样变和炎性细胞的大量浸润,血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平升高。经过TBP干预后,模型组小鼠肝脏组织病理学变化明显改善,脂质沉积减少,肝细胞排列较为紧密,炎性因子表达水平降低,同时血清ALT和AST的水平降低,说明TBP具有显著改善ALD的作用。对小鼠结肠组织的观察显示,TBP能有效维持ALD小鼠肠道组织结构的完整性,增强紧密连接蛋白occludin的表达和降低miR-122a水平,更重要的是显著降低模型小鼠血清脂多糖(LPS)水平。这一结果表明,TBP可能通过维持和增强肠道屏障功能来发挥对ALD的护肝作用。体外实验发现,TBP能够显著抑制乙醇暴露下Caco-2细胞中miR-122a的表达水平。在Caco-2细胞中过表达miR-122a诱导了对occludin蛋白生成的抑制,而TBP的加入可以显著干预这一作用。这些结果提示,TBP通过增强occludin蛋白表达来维持肠道屏障功能的稳定性,减少肠道LPS进入肝脏进而改善ALD,其潜在机制部分可能是通过抑制miR-122a的表达实现的。
- 肖莉何毓敏彭帆杨建林袁成福
- 关键词：酒精性肝病肠道屏障
- 一种肿瘤标志物钙网蛋白检测试剂盒的制备及应用
- 一种肿瘤标志物钙网蛋白检测试剂盒的制备及应用，属于基因工程和临床诊断领域。本发明应用重组CRT蛋白免疫BALB/c小鼠和新西兰大白兔制备了CRT的单克隆抗体、多克隆抗体，并建立了检测CRT最低量为0.3125ng/ml，...
- 刘朝奇吴薇杨建林汪龚泽
- 文献传递
- HIV-1P24蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 目的制备HIV-1P24蛋白及单克隆抗体,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HIV感染。方法聚合酶链反应(PCR)扩增p24基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经E.coli表达并纯化HIV-1P24蛋白。以纯化P24蛋白抗原免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备能产生P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用Wes ternblot、ELISA技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定,建立检测P24蛋白含量的ELISA竞争法。结果原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达P24蛋白,从杂交瘤细胞中选取能稳定分泌P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用ELISA竞争法检测HIV-1阳性的血清中P24蛋白含量与病毒载量显著相关。结论 P24蛋白及特异性单克隆抗体成功制备,并建立了检测P24蛋白含量的ELISA竞争法。
- 汪龚泽刘朝奇杨建林覃晓琳吕佰瑞姚佳红
- 关键词：免疫缺陷病毒质粒酶联免疫吸附测定
- 高效抗肝癌细胞的新城疫病毒株的筛选
- 目的 新城疫病毒(newcastle disease virus，ndv)属副粘病毒科avulavirus属，为单股负链rna病毒，能感染多种人类肿瘤细胞且不依赖于肿瘤细胞增殖而独立复制，选择性杀伤肿瘤细胞。已有的...
- 杨建林
- 关键词：肝癌细胞抗肿瘤新城疫病毒
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