杜晓东
- 作品数：224 被引量：950H指数：18
- 供职机构：广东海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 马氏珠母贝SRF基因的分子特征及组织特异性表达被引量：11
- 2015年
- 血清反应因子(SRF)是一个高度保守的转录因子,在细胞增殖、细胞凋亡以及免疫反应中发挥重要作用。为了探究血清反应因子在马氏珠母贝中的生物学功能,本研究运用c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆得到马氏珠母贝SRF基因(Pm SRF)c DNA的全长序列,并且应用实时荧光定量PCR技术对Pm SRF基因在马氏珠母贝不同组织中的表达进行检测。结果显示,Pm SRF基因序列全长1 758 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 440 bp,编码479个氨基酸,5'UTR为65 bp,3'UTR为253 bp,包含29 bp的poly A。预测其相对分子量为50 534.6 Da,理论等电点为7.71。多序列比对结果发现物种间SRF具有较高的保守性。SMART软件分析显示Pm SRF具有典型的MADS结构域。荧光定量PCR数据分析表明,Pm SRF基因在马氏珠母贝闭壳肌、肝胰腺、血细胞、外套膜、性腺、鳃六种组织中均有表达,其中在鳃中表达量最高。本研究可为进一步探究Pm SRF在贝类中的生物学功能提供重要的理论基础和参考价值。
- 田荣荣田群莉杜晓东焦钰黄荣莲王庆恒邓岳文
- 关键词：马氏珠母贝SRF荧光定量PCR
- 钻井泥浆和消油剂对合浦珠母贝稚贝的急性毒性试验被引量：14
- 2000年
- 以合浦珠母贝稚贝为测试对象 ,比较了三种钻井泥浆和消油剂的 96h急性毒性效应。实验结果表明 ,钻井泥浆对合浦珠母贝稚贝的半致死浓度大于 10 5mg/ L;三种消油剂的半致死浓度分别为12 58mg/ L ,4 4 69mg/ L和 2 545mg/ L。
- 邓岳文杨丰华湛波杜晓东黄韧
- 关键词：钻井泥浆消油剂急性毒性试验合浦珠母贝稚贝半致死浓度
- 牡蛎的遗传育种研究进展被引量：3
- 2004年
- 薛明杜晓东
- 关键词：牡蛎育种
- 细胞小片处理对马氏珠母贝育珠效果影响被引量：14
- 2011年
- 以马氏珠母贝选系F2为实验材料,按照马氏珠母贝常规技术进行插核手术,并经过池塘休养和海区养殖过程,比较了细胞小片黏液处理和保养对马氏珠母贝育珠效果影响。实验设为4组:细胞小片黏液处理组(A)、细胞小片保养组(B)、同时进行细胞小片黏液处理和保养组(C),对照组(D),同时利用H E染色观察比较A和D组细胞小片显微结构的变化。研究结果表明,对照组细胞小片的外套膜边缘上皮细胞部分脱落,而处理组的外套膜边缘上皮细胞保持完整。育珠期结束后,A、B、C和D组育珠贝的成活率没有显著差别(P>0.05);A、B、C和D组留核率、商品珠率和优质珍珠率存在显著性差异(P<0.05),其中B组具有最大的商品珠率(81.4%)和优质珠率(34.6%),C组具有最小的商品珠率(70.7%)和优质珠率(20.6%)。本研究结果说明经过细胞小片保养处理能显著提高马氏珠母贝的商品珠率和优质珠率,这为优质海水珍珠生产提供了依据。
- 邓岳文邓陈茂杜晓东符韶王庆恒
- 关键词：马氏珠母贝
- 马氏珠母贝（Pinctada fucata martensii）新型清道夫受体基因克隆与表达分析被引量：1
- 2018年
- 清道夫受体（scavenger receptors,SRs）作为一类先天性免疫受体,在宿主固有免疫防御中起着重要的作用。本研究采用RACE技术首次从马氏珠母贝c DNA文库中克隆出一个新型的马氏珠母贝SR基因全长序列（pmSR）,并且运用qRT-PCR技术检测了pmSR基因在马氏珠母贝不同组织中的表达情况和哈维氏弧菌刺激后在血淋巴中的时序表达模式。结果显示,PmSR基因序列全长为954 bp,5＇UTR长为107 bp,3＇UTR长为169 bp,开放阅读框为678 bp,其编码225个氨基酸;PmSR氨基酸序列含有α卷曲螺旋结构和具有6个保守的半胱氨酸的SRCR域（scavenger receptor cystein rich domain）,具有A型SRCR结构域的典型特征。SRCR结构域氨基酸序列多序列比对显示Pm SR的SRCR结构域与老鼠和斑马鱼MARCO（macrop Hage receptor with collagenous structure,MARCO）SRCR相似度最高,分别为44%和43%;且蛋白质聚类分析表明PmSR与SR-AI（class A scavenger receptor I,SR-AI）同源性最高。qRT-PCR结果显示,PmSR基因在马氏珠母贝闭壳肌、肝胰腺、血细胞、外套膜、性腺、鳃中均有表达,在肝胰腺表达量最高;哈维式弧菌（Vibrio harveyi）刺激后,血淋巴中PmSR基因表达量在0-8 h逐渐上升,并于8 h达到最大表达量,约为对照组（0 h）的4.2倍,表达量随后下降,直至16 h后,其表达量再次出现显著性上升,结果具有显著性差异（p〈0.05）。本研究为贝类免疫防御系统的研究提供了重要资料。
- 吴羽媛郭志颖梁海鹰肖梓阳雷倩楠杜晓东
- 关键词：马氏珠母贝清道夫受体基因克隆
- 马氏珠母贝NR1基因的克隆、序列分析与表达研究
- 2018年
- N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate, NMDA）受体属于是一类离子型谷氨酸受体,并且与脊椎动物和无脊椎动物的突触可塑性,记忆采集和学习等密切相关。本研究采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术获得了马氏珠母贝（Pinctada martensii） NR1型受体基因（PmNR1） cDNA全长序列,并且运用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）技术检测了PmNR1在马氏珠母贝各组织中的表达谱和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激后肝胰脏中的表达模式。结果显示,PmNR1 cDNA全长2 969 bp,其中5＇非编码区（UTR）长95 bp,3＇UTR长42 bp,开放阅读框（ORF）长2 382 bp,编码943个氨基酸;Pm NR1含有信号肽,两个配体结构域,一个预测的甘氨酸和谷氨酸结合位点,三个跨膜域,以及一个发夹式结构域,一个NR1亚基的钙调蛋白结合结构域;多序列比对结果表明物种间NR1具有较高的保守性,且与长牡蛎的相似度达61.19%。qRT-PCR结果表明,PmNR1在马氏珠母贝实验组织中都有表达,在肝胰脏、鳃、性腺和外套膜中表达量较高（p〈0.05）;LPS刺激后肝胰脏中PmNR1基因表达量在4 h逐渐下降,并于8 h达到最低表达量,约为对照组（0 h）的2.6倍,随后的12～24 h表达量开始回升,并于24 h恢复到原有水平,结果具有显著性差异（p〈0.05）。
- 吴羽媛梁海鹰吴家树雷倩楠黄荣莲黄荣莲
- 关键词：NMDA受体马氏珠母贝基因克隆脂多糖
- 马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)Pm-Δ6FAD基因的克隆及其对温度胁迫的响应
- 2018年
- 本实验利用RACE技术克隆获得了马氏珠母贝Δ6-脂肪酸去饱和酶（Pm-Δ6FAD）基因,并对其进行生物信息学分析,同时采用荧光定量PCR技术分析了该基因在不同组织的表达模式及不同温度下的时序表达模式。序列分析表明,Pm-Δ6FAD c DNA序列全长为1 491 bp,其中开放式阅读框1 125 bp,5＇UTR 225 bp,3＇UTR 141 bp,编码374个氨基酸,理论蛋白分子量为42.72 kD,理论等电点为8.27。SMART软件分析显示Pm-Δ6FAD蛋白具有Δ6FAD典型的脂肪酸去饱和酶结构域FA＿desaturase,以及3个组氨酸簇和6个跨膜区。多序列比对结果表明Pm-Δ6FAD与虾夷扇贝Δ6FAD同源性最高,为63%;系统进化分析发现,Pm-Δ6FAD与软体动物聚为一支。组织表达定量分析结果显示,Pm-Δ6FAD在马氏珠母贝多个组织中均有表达,在性腺中表达量最高;对不同温度下鳃组织中Pm-Δ6FAD的时序表达分析发现,在处理后各时间点低温组（17℃）基因表达水平最高,且均显著高于高温组（32℃）。以上结果表明Pm-Δ6FAD可能参与马氏珠母贝的低温胁迫响应。该研究为进一步探索Pm-Δ6FAD在马氏珠母贝在温度适应性中的作用提供了基础资料。
- 刘雅郑哲王庆恒王庆恒李利二焦钰
- 关键词：马氏珠母贝温度适应基因克隆
- 生长适温下马氏珠母贝黄壳色选系F_1与养殖群体消化酶活力的比较被引量：11
- 2010年
- 2006年4月,从流沙港马氏珠母贝养殖群体中挑选11个纯黄壳色个体为繁殖群体建立了马氏珠母贝(Pinctada martensii)黄壳色选系F1(SG1)。同时,随机选取养殖群体中50个个体作为繁殖群体建立了对照组(CG)。2007年10月,从2个组分别选取相同规格的个体,比较了生长适温(15～30℃)下2个组的消化酶活力。结果表明:(1)马氏珠母贝肝胰脏中具有淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶活力,在15～30℃条件下,三者活力由高到低依次为淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶。(2)在15～30℃范围内,马氏珠母贝淀粉酶活力随温度升高先上升再下降,在温度25℃时达到最大值;SG1组和CG组淀粉酶活力变化范围分别为3.51～5.09μg·min-1·mg-1和2.53～4.04μg·min-1·mg-1;各反应温度下,SG1组淀粉酶活力均高于CG组,在15℃和20℃时,二者差异显著(P<0.05)。(3)在15～30℃范围内,马氏珠母贝纤维素酶活力随温度上升而上升,在温度30℃时达到最大值;SG1组和CG组纤维素酶活力变化范围为(2.44～3.22)μg·min-1·mg-1和(2.07～3.12)μg·min-1·mg-1;各实验温度下,SG1组纤维素酶活力均高于CG组,但差异均不显著(P>0.05)。(4)在15～30℃范围内,马氏珠母贝蛋白酶活力随温度上升而升高,在温度30℃时达到最大值;SG1组和CG组蛋白酶活力变化范围为(0.075～0.296)μg·min-1·mg-1和(0.067～0.455)μg·min-1·mg-1。在15℃时,SG1组蛋白酶活力大于对照组,差异不显著(P>0.05);在20℃、25℃、30℃时,CG组蛋白酶活力显著大于SG1组(P<0.05)。本研究结果表明,经过一代壳色选育后黄壳色选系与对照组的消化生理指标存在明显差异,为马氏珠母贝的黄壳色系进一步选育提供依据。
- 王庆恒张善发杜晓东邓岳文黄荣莲
- 关键词：马氏珠母贝消化酶活力养殖群体
- 马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmHEX基因的功能研究
- 2019年
- 几丁质是软体动物贝壳有机框架的重要成分,其代谢在贝壳矿化中发挥重要作用。β-N-乙酰-己糖胺酶(HEX, EC3.2.1.52)是几丁质代谢的关键水解酶。为了探究马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶(Pm HEX)(登录号:MF555152)在贝壳形成中的作用,本研究利用原位杂交(ISH)技术检测Pm HEX基因在外套膜的定位,结果显示Pm HEX的mRNA主要分布于外侧褶的外上皮细胞、中褶的内侧上皮细胞和内褶上皮细胞。利用RNAi技术抑制Pm HEX表达后,Pm HEX在边缘区和套膜区的表达量均显著下调;SEM观察发现实验组的棱柱层和珍珠层的微观结构都出现不同程度的紊乱。综上所述,Pm HEX可能通过影响几丁质代谢,参与马氏珠母贝贝壳棱柱层和珍珠层的矿化过程。
- 范闪闪郑哲郑哲王庆恒郝瑞娟
- 关键词：马氏珠母贝RNAI原位杂交
- 马氏珠母贝生长性状与珍珠质量和珍珠层厚度的相关分析被引量：11
- 2013年
- 以马氏珠母贝快速生长选系F3为材料,以常规技术插核操作并进行海区养殖,育珠期结束,测量育珠母贝的壳长、壳高、壳宽、总质量与壳质量共5个生长性状指标,以及商品珍珠质量与珍珠层厚度,分析育珠贝生长性状指标与珍珠层厚度及珍珠质量的相关性。结果表明:马氏珠母贝的生长性状与珍珠层厚度及珍珠质量均存在极显著相关性(p值<0.01);壳长、壳高、壳宽、总质量、壳质量与珍珠层厚度的相关系数分别为0.481、0.412、0.418、0.457、0.456;壳长、壳高、壳宽、总质量、壳质量与珍珠质量的相关系数分别为0.467、0.468、0.380、0.556、0.644。通过改良马氏珠母贝养殖群体的生长性状能够有效提高珍珠的质量。
- 王庆恒逯云召邓岳文杜晓东
- 关键词：马氏珠母贝生长性状
