李晓刚 作品数:8 被引量:13 H指数:3 供职机构: 第三军医大学大坪医院野战外科研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
手术诱导的小鼠骨关节炎模型中关节软骨MMP-13表达上调 被引量:4 2014年 目的观察小鼠骨关节炎模型中关节软骨组织中基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)表达水平的变化,探讨其与关节损伤之间的关系。方法在小鼠原代软骨细胞培养中用IL-1β诱导炎症细胞外环境,采用RT-PCR检测MMP-13的表达水平。手术诱导不稳定的内侧半月板(destabilization of the medial meniscus,DMM)建立小鼠骨关节炎模型,观察术后5周和10周小鼠关节软骨组织变化情况,并用免疫组化检测MMP-13在受损的关节软骨中的表达。结果用IL-1β处理的原代软骨细胞中MMP-13的mRNA表达明显较高(P<0.01)。DMM术后小鼠关节软骨出现骨关节炎表现,且术后10周小鼠关节损伤程度较术后5周小鼠严重。免疫组化结果显示术后5周小鼠软骨组织中MMP-13的表达高于对照组;术后10周软骨组织中MMP-13进一步增高。结论在小鼠骨关节炎模型发病过程中,MMP-13作为一个具有软骨破坏性的标志分子在关节软骨中持续高表达,在骨关节炎发生过程中起重要作用。 唐浚洲 苏楠 周思儒 李晓刚 谢杨丽 陈林关键词:骨关节炎 关节软骨 基质金属蛋白酶13 小鼠 细胞谱系示踪技术 被引量:3 2014年 细胞谱系示踪(cell lineage tracing)是指利用各种方式标记细胞,并对包括其后代所有细胞的增殖、分化以及迁移等活动进行追踪观察。自20世纪以来,谱系示踪技术为研究器官发育、组织损伤修复以及单细胞的分化命运提供了重要的手段。近些年,随着基因工程技术的飞速发展,细胞谱系示踪技术也有所突破,尤其是诱导性重组酶Cre/loxp系统的应用,极大地拓宽了细胞谱系示踪技术的应用范围。本文将结合细胞谱系示踪技术在多种研究中的应用,对该技术的原理、特点以及最新进展做一综述。 李晓刚 苏楠 杜晓兰 陈林关键词:基因打靶 活体示踪 FGF2对破骨细胞体外分化以及骨吸收功能的直接调控作用 被引量:2 2014年 目的研究成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)对于破骨细胞(osteoclast,OC)体外分化与功能的直接调控作用。方法分离野生型C3H/HeJ小鼠骨髓单核细胞,利用核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)以及巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导向破骨细胞分化,同时在实验组中加入FGF2,观察骨髓单核细胞向破骨细胞分化发育过程,鬼笔环肽(phalloidine)染色观察破骨细胞肌动蛋白环(actin ring)变化,Real-time PCR检测破骨细胞Trap、Mmp9、Ctsk以及Clcn7表达,破骨细胞与骨片共培养检测骨吸收功能变化,并用Western blot检测相关信号通路分子表达情况。结果①TRAP染色显示实验组与对照组破骨细胞数量无明显差异(P>0.05);②鬼笔环肽染色提示实验组与对照组肌动蛋白环均正常;③实验组Trap、Mmp9及Ctsk mRNA表达量均高于对照组(P<0.05),而Clcn7 mRNA表达2组无明显差异;④体外骨片吸收实验提示实验组骨吸收陷窝面积显著大于对照组(P<0.05);⑤Western blot检测实验组磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK)较对照组表达明显增多。结论 FGF2不影响破骨细胞前体细胞向破骨细胞的分化以及肌动蛋白环的形成,但可以通过ERK信号通路正向调控成熟破骨细胞的骨吸收功能。 李晓刚 苏楠 唐玉彬 温轩 唐浚洲 陈思宇 李灿 杜晓兰 陈林关键词:破骨细胞 成纤维细胞生长因子2 细胞外信号调节激酶 破骨细胞FGFR1功能缺失导致骨折愈合延迟 目的 骨折是临床常见疾病之一,而FGFR1作为影响骨骼生长发育的重要基因,其对骨折的愈合也发挥调控作用.然而,关于FGFR1参与调控骨损伤修复的具体机制还不是很清楚.我们前期工作发现FGFR1促进破骨细胞的分化和功能,因... 李晓刚 苏楠 陈林破骨细胞中FGFR3功能缺失导致小鼠破骨细胞功能障碍和骨量增加 目的破骨细胞是骨组织中具有骨吸收功能的细胞,其分化和功能受体内多种因素影响,其中包括成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)家族成员。我们前期工作发现FG... 苏楠 李晓刚 陈思宇 杜晓兰 陈林一例Ⅱ型常染色体显性骨硬化症患者氯离子通道蛋白7基因突变分析 被引量:4 2014年 目的检测1例Ⅱ型常染色体显性骨硬化症患者氯离子通道7(chloride channel7,CLCN7)基因的突变情况,探讨其分子发病机制。方法收集1例骨硬化症患者及100名健康成年人的血液标本,提取基因组DNA,PCR扩增CLCN7基因外显子并对所有外显子及其旁侧内含子序列进行DNA测序分析。结果患者CLCN7基因第25外显子存在c.2460delA缺失突变,导致CLCN7基因784位及其后所有密码子移码突变(Arg784GlyfsX29)。该突变为一新突变,正常人均未检测到该突变。结论CLCN7基因Arg784GlyfsX29移码突变是导致该骨硬化症患者发病的原因。 李晓刚 苏楠 李灿 杨京 杜晓兰 陈林关键词:基因突变 破骨细胞FGFR1功能缺失导致骨折愈合延迟 目的 骨折是临床常见疾病之一,而FGFR1作为影响骨骼生长发育的重要基因,其对骨折的愈合也发挥调控作用.然而,关于FGFR1参与调控骨损伤修复的具体机制还不是很清楚.我们前期工作发现FGFR1促进破骨细胞的分化和功能,因... 李晓刚 苏楠 陈林FGFR3通过影响破骨细胞功能调控骨折的愈合过程 研究目的骨折是临床常见疾病之一,而FGFR3作为影响骨骼生长发育的重要基因,其对骨折的愈合也发挥调控作用,但其具体机制还不是很清楚。我们前期工作发现FGFR3对破骨细胞有重要的正向调控作用,因此,本研究旨在明确FGFR3... 李晓刚 苏楠 谢杨丽 陈林