李文珠
- 作品数：27 被引量：44H指数：4
- 供职机构：厦门大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家教育部博士点基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- FasL、抗DR5单克隆抗体对结肠癌细胞株HT29的杀伤作用及其机制
- 2009年
- 目的探讨FasL、抗DR5单克隆抗体（Anti—DR5mAb）对结肠癌细胞株HT29的杀伤作用及机制。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、噻唑蓝（MTF）比色法、DNA倍体分析，Western blot等。结果HT29细胞表面FasmRNA的表达低于DR5mRNA的表达。50mg／LFasL和Anti—DR5mAb对HT29细胞的杀伤率分别为（25．49±0．90）％和（48．90±3．15）％，这种作用呈剂量依赖性。流式细胞术分析细胞周期和凋亡实验表明FasL和Anti—DR5mAb能够抑制HT29细胞的生长，并且诱导它的凋亡。25mg／LFasL和Anti—DR5mAb对HT29细胞的凋亡指数分别为（13．8±1．5）％和（22．6±1．1）％。FasL和Anti—DR5mAb作用HT29细胞后，Caspase-3蛋白表达上升，bcl-2蛋白表达水平下降。结论FasL、Anti—DR5mAb能不同程度的诱导结肠癌细胞株HT29凋亡，其机制与其受体和Caspase-3、bcl-2的表达有关。
- 刘忠臣李文珠齐忠权丁志杰袁思波庄国洪
- 关键词：结肠癌死亡受体脱噬作用
- 人源化抗人肺癌单域抗体基因的构建、表达及活性分析被引量：6
- 2006年
- 目的:构建人源化的抗人肺癌单域抗体hu3D3VH基因,在大肠杆菌中表达,对其蛋白活性进行分析。方法:采用CDR移植技术对mAb3D3的重链可变区进行人源化,通过重叠PCR获得hu3D3VH的基因。构建pET22(b+)/hu3D3VH表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达。表达产物通过Ni亲和层析柱纯化。采用间接ELISA和竞争抑制ELISA法进行活性分析。结果:通过重叠PCR获得序列正确的目的基因。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,目的蛋白的纯度达95%以上。hu3D3VH具有与亲本抗体相同的抗原反应性,并能抑制mAb3D3与L342细胞的结合。结论:获得的人源化单域抗体hu3D3VH,保留了与mAb3D3相同的反应性和特异性,为进一步临床应用奠定了基础。
- 王阶平庄国洪杨桂旺王臻李文珠谢莲英颜江华
- 关键词：人源化活性分析
- 抗死亡受体DR5抗体对大鼠佐剂型关节炎的作用机理探讨被引量：2
- 2007年
- 目的研究抗-DR5 McAb对大鼠佐剂型关节炎(AA)的作用及其免疫机理。方法注射弗式完全佐剂建立AA大鼠模型,尾静脉注射抗-DR5 McAb,观察大鼠关节肿胀度、血清和滑膜液中炎症细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平的变化。RT-PCR检测各组织器官、滑膜和淋巴细胞中DR5 mRNA水平的表达,Western blot分析各组织器官中凋亡相关因子caspase-8、Bcl-2蛋白的表达。结果抗-DR5 McAb能缓解AA病情,使关节肿胀度降低;血液和滑膜组织细胞产生IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平下降,抑制滑膜细胞和淋巴细胞的过度增殖。各组织器官中caspase-8蛋白水平上升,Bcl-2蛋白水平下调。结论抗-DR5 McAb能用于大鼠AA的治疗,其治疗机制与细胞表面DR5 mRNA的表达、细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平和caspase-8、Bcl-2蛋白表达相关。
- 李文珠陶惠然庄国洪胡庆中王生育陈彩霞
- 关键词：佐剂型关节炎细胞凋亡
- FasL基因构建 蛋白表达及其对胃癌细胞株BGC823和MGC803生长的影响
- 2009年
- 目的:构建适于原核表达的重组蛋白FasL表达载体,并进行重组蛋白的表达纯化及抗肿瘤活性分析。方法:获得人FasL cDNA全序列,将其分段设计引物,通过重叠PCR获得FasL基因。构建pGEX-5X-1/FasL表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,GST柱纯化。采用MTT比色法、流式细胞法检测融合蛋白对胃癌细胞的作用。结果:通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因。表达的目的蛋白表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。MTT比色法与流式细胞技术均表明纯化的融合蛋白能抑制胃癌细胞株BGC823和MGC803的生长,诱导其调亡增加。结论:重组蛋白FasL表达载体的成功构建、表达、纯化及活性分析,为进一步的抗肿瘤功能研究奠定了基础。
- 刘忠臣李文珠齐忠权丁志杰袁思波牛丽文庄国洪
- 关键词：FASL肿瘤凋亡
- 热激蛋白Hsp90在调控裂殖酵母异染色质区基因沉默中的功能被引量：1
- 2012年
- 鉴于高等生物中Hsp90与Argonaute蛋白的功能相关性,研究了裂殖酵母中Hsp90/Swo1与Ago1蛋白之间的相互关系以及对异染色质区基因沉默的影响。结果表明,裂殖酵母中Swo1蛋白通过与Ago1蛋白的相互作用,可以稳定Ago1蛋白,并且这种相互作用依赖于Swo1的N端和中央结构域以及Ago1的N端和PAZ结构域。在着丝粒的otr区和imr区,swo1+基因的突变会引起区域内基因沉默的解除,并且与RNAi组分双突变后(ago1Δ或dcr1Δ),基因沉默解除的效果加强。在交配型区,swo1+基因突变后也会引起显著的基因沉默解除现象。当swo1+基因突变后,依赖于Tas3的人工异染色质区基因沉默解除。研究发现了裂殖酵母中热激蛋白Hsp90的新功能,即参与异染色质区的基因沉默调控。
- 李文珠余圣炜薛钰李丹丹靳全文
- 关键词：裂殖酵母异染色质基因沉默
- DcR3重组蛋白对糖尿病大鼠重要器官细胞凋亡相关分子表达的影响
- 目的:研究诱骗受体3(DcR3)在正常大鼠及糖尿病(DM)大鼠重要器官的表达以及DcR3重组蛋白对DM大鼠重要器官凋亡相关蛋白表达的影响。方法:一次性腹腔注射链脲佐菌素建立大鼠DM模型,尾静脉注射不同剂量的DcR3重组蛋...
- 陶惠然庄国洪苗乃全李文珠陈福张佳揩
- 关键词：DCR3糖尿病
- 文献传递
- 死亡受体5胞外区域的重组、表达及活性鉴定
- 2006年
- 目的构建死亡受体5(deathreceptor5,DR5)胞外区域(eDR5)的表达载体,表达纯化重组蛋白并鉴定其生物特性。方法通过重叠PCR获得DR5胞外段编码序列,构建pET-22b(+)/DR5表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni2+柱亲和纯化,SDS-PAGE、直接ELISA鉴定纯化产物的纯度和特异性,用MTT法检测eDR5蛋白阻断DR5单克隆抗体FMU1.5和TRAIL诱导人胶质瘤细胞株U343(高表达DR5)、U373(低表达DR5)细胞凋亡的作用。结果获得了DR5胞外段编码序列,目的蛋白在上清及包涵体中都有表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上,蛋白产量达9mg/ml。ELISA结果表明所纯化蛋白为eDR5。eDR5蛋白可部分阻断FMU1.5和TRAIL诱导人胶质瘤细胞株U343细胞凋亡的作用,其阻断率与DR5表达相关。结论死亡受体5胞外段基因的成功重组、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础。
- 张长弓宋玉国李文珠王莉陈彩霞庄国洪
- 关键词：死亡受体5基因克隆胶质瘤细胞细胞凋亡
- FasL、抗人DR5单克隆抗体诱导肿瘤细胞凋亡的研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨FasL、Anti-DR5mAb对肿瘤细胞Hela、BGC823、MCF-7、L342、H9101、D6的杀伤作用及机制。方法采用RT-PCR、MTT比色法、电泳、DNA倍体分析、Westernblot等方法。结果H9101、Hela细胞株DR5mRNA水平有表达,D6细胞无表达;H9101、L342细胞株FasmRNA水平有表达,D6细胞无表达。H9101、L342细胞株对FasL、Anti-DR5mAb敏感并呈剂量依赖性;MCF-7、BGC823细胞株对FasL敏感,对Anti-DR5mAb相对敏感。Hela对FasL相对敏感,对Anti-DR5mAb敏感;D6对两种凋亡诱导剂耐受。结论FasL、Anti-DR5mAb能不同程度地诱导肿瘤细胞凋亡,其机制与Fas、DR5、Caspase-8、Bcl-2的表达有关。
- 宋玉国李文珠李迎陈彩霞庄国洪
- 关键词：FASL肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体凋亡
- 诱骗受体3在胃癌组织中的表达
- 2010年
- 本研究旨在观察诱骗受体3（DcR3）在胃癌组织中的表达，现报道如下。
- 杨东海刘忠臣李文珠刘瑞振庄国洪
- 关键词：诱骗受体3胃癌组织
- 诱骗受体3的基因构建表达纯化和特异性鉴定方法
- 诱骗受体3基因构建表达纯化和特异性鉴定方法，涉及一种基因，提供诱骗受体3基因的构建、表达、纯化和特异性鉴定方法。诱骗受体3基因的构建方法为设计引物：从GenBank(AY358279查得DcR3 cDNA全序列，获取编码...
- 庄国洪李文珠苟立新颜江华
- 文献传递
