李国惠
- 作品数：10 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Rock2对紫外线诱导肝癌细胞DNA损伤的保护作用及调节机制被引量：1
- 2012年
- 背景与目的:Rock2基因在肝癌等多种恶性肿瘤中呈现高表达,本研究利用紫外线(ultraviolet,UV)诱导DNA损伤,观察Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coilforming protein kinase 2,Rock2)基因对肝癌细胞生存的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将特异性抑制Rock2表达的干扰质粒shRock2转染到人肝癌细胞Huh-7和HepG2中,用荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测Rock2 mRNA及蛋白的表达。通过UV照射造成肝癌细胞DNA损伤模型,用MTT比色法检测肝癌细胞增殖的变化,Western blot检测细胞分裂周期素25A(cell division cycle 25A,Cdc25A)蛋白表达的变化,并用能量共振转移法检测Cdk2/Cyclin E活性的改变。结果:shRock2转染到肝癌细胞后,其mRNA及蛋白的表达均明显降低;经过UV诱导肝癌细胞DNA损伤时,Rock2低表达组肝癌细胞较Rock2正常组肝癌细胞增殖受到抑制。Western blot检测发现,UV诱导DNA损伤时抑制Rock2表达可导致肝癌细胞中Cdc25A表达进一步下降,并且Cdk2/CyclinE活性也随Cdc25A的降低而降低。结论:UV诱导肝癌细胞DNA损伤时,Rock2通过调节Cdc25A对肝癌细胞的生存起保护作用,可能为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。
- 李国惠刘天德余新刘秀霞袁荣发蒋成行邵江华
- 关键词：ROCK2肝细胞癌紫外线
- 紫外线诱导DNA损伤时ROCK2对Cdc25A调控作用的实验研究
- 目的：探讨Rock2对原发性肝癌细胞周期蛋白Cdc25A调控机制，并研究其对肿瘤细胞生长的影响。
方法：在肝癌细胞株Huh-7、HepG2细胞中siRNA Rock2后利用流式细胞仪，MTT法了解肿瘤细胞的周期变化...
- 李国惠
- 关键词：紫外线诱导肝细胞癌DNA损伤细胞周期蛋白
- 酵母双杂交技术鉴定FAT10新的结合蛋白:eEF1A1被引量：2
- 2012年
- 目的:利用酵母双杂交技术筛选类泛素蛋白FAT10(HLA-F adjacent transcript 10)在肝癌细胞Hep3B中相互作用的蛋白,为探讨FAT10蛋白在肝癌发生中的作用机制提供依据。方法:利用Clontech GAL4酵母双杂交系统筛选人肝癌细胞系Hep3B的cDNA文库,以获得与FAT10相互作用的蛋白分子;通过回交实验、免疫共沉淀和激光共聚焦细胞内共定位实验验证两者之间的相互作用;通过RNA干扰降低FAT10表达观察真核翻译延伸因子1α1(eEF1A1)的表达情况。结果:酵母双杂交筛选得到相互作用蛋白eEF1A1,激光共聚焦细胞内共定位确定FAT10和eEF1A1均位于细胞质内,存在共定位;回交实验和免疫共沉淀实验再次确认eEF1A1能够与FAT10相互作用;FAT10表达降低伴随着eEF1A1的表达下调。结论:FAT10能够与eEF1A1相互作用;FAT10可能通过eEF1A1来实现其部分功能。
- 余新刘天德袁荣发王庆诺李国惠邵江华
- 关键词：RNA干扰
- PTEN基因多态性与乙肝相关肝细胞癌的关系探讨被引量：2
- 2012年
- 目的探讨第10号染色体同源丢失性磷酸酶—张力蛋白(PTEN)基因突变及多态性与乙肝相关肝细胞癌(HCC)易感性的关系。方法对60例乙肝相关肝细胞癌(HCC组)、70例乙肝病毒携带者(CHB组)及135例健康体检者(正常对照组)进行PTEN基因DNA测序及序列分析。结果 HCC组未发现PTEN基因突变,但发现4个多态性,即Ala34Cys、Leu57Phe、IVS8+G32T、T2281G。常见的PTEN基因多态性(频率>5%)且可能影响PTEN基因表达的Ala34Cys和IVS8+G32T位点各基因型频率及等位基因频率在各组之间相比,P均>0.05;单体型构建发现GCG、GCT、TGT、TGG等4种单体型,HCC组和正常对照组的GCG单体型分布相比,P<0.05,GCG单体型携带者发生肝癌的风险明显减小(OR=0.62,95%CI为0.40～0.95)。结论 PTEN基因突变可能与乙肝相关HCC无关,但携带GCG单体型者发生HCC的风险可能较小。
- 洪波余新刘天德李国惠邵江华
- 关键词：基因突变单核苷酸多态性乙型肝炎病毒肝细胞癌
- 全腹腔镜下急诊巨脾切除和断流术治疗重度肥胖的门脉高压症
- 门静脉高压症病死率较高,食管静脉破裂出血是门静脉高压症最严重的并发症[1],可以直接影响患者的生命。自1991年Delaitive等[2]报道首例腹腔镜脾切除(Laparoscopic Video Splenctomy,...
- 张家敏俞世安厉学民许龙堂庄波李国惠
- 文献传递
- 肝移植术后再发噬血细胞综合征的个体化药物治疗实践
- 2022年
- 目的在非移植噬血细胞综合征(HPS)治疗方案基础上,为肝移植术后再发HPS患者建立特定的个体化药物治疗策略。方法临床药师通过参与本中心1例肝移植术后再发HPS患者的诊治过程,与医生通力协作,整合治疗药物监测,药物药动学特征以及血浆置换药物清除特点,制定免疫抑制和免疫调节策略,调整抗感染方案,利用血液制品并采用血液净化手段,有效进行对因及支持治疗。结果该患者一般情况恢复良好后出院,随访至今近1年,健康生存。结论临床药师应积极参与罕见疑难重症的诊疗,积极评估药物疗效,协助临床制定个体化用药方案,提升药学服务水平,促进临床用药有效安全。
- 何佳珂马景胜马景胜杨文涛杜文鹏吴观胜尹成龙尹成龙刘海浪姜正尧李国惠李国惠饶美英李齐根钟林
- 关键词：肝移植术后噬血细胞综合征个体化用药
- 冠心病并发室性心动过速与KCNQ1-P448R的研究被引量：1
- 2019年
- 目的探索冠心病并发室速与KCNQ1的相关性研究。方法收集冠心病并发室性心动过速患者的血样标本,通过候选基因筛查的方式,使用DNA直接测序法对KCNQ1进行筛查。结果 KCNQ1基因第10号外显子的第1343位点上C碱基突变为G碱基,导致编码的第448位氨基酸由脯氨酸突变为精氨酸,即KCNQ1-P448R,100例健康体检对照组中未发现该基因位点改变,提示可能是突变。结论本实验发现1例基因突变的可能,即KCNQ1-P448R,但需进一步的功能学分析研究。
- 周素贞李国惠吴阿平胡金柱
- 关键词：室性心动过速冠状动脉粥样硬化性心脏病基因KCNQ1
- FAT10真核质粒的构建、转染及其蛋白的表达
- 2010年
- 目的构建类泛素基因FAT10的真核表达质粒,观察其蛋白在转染人胚肾细胞系293T中的表达。方法采用RT-PCR法扩增FAT10全长基因片段后,克隆至pMD18-T载体进行测序分析,将FAT10克隆至pcDNA5-FRT表达载体并行酶切鉴定;用脂质体LipofectamineTM2000分别介导空质粒(空载组)及重组质粒(FAT10质粒组)转染293T细胞,以脂质体混合PBS(PBS组)及未加入脂质体(未转染组)作为对照。转染48 h后,收集细胞。采用Western blot法检测293T细胞中的FAT10蛋白。结果 pMD18-FAT10重组质粒经双酶切获得498 bp片段,对PCR产物及498 bp片段进行测序,结果与GenBank报道序列完全一致。FAT10质粒组、未转染组、空载体组和PBS组FAT10蛋白表达量分别为1.556±0.072、0.334±0.051、0.425±0.095、0.382±0.063,FAT10质粒组与未转染组、空载体组和PBS组比较,P均<0.05。结论成功构建了FAT10的真核表达质粒pcDNA5-FRT-FAT10,FAT10蛋白在293T细胞中高表达。
- 余新刘天德洪波李国惠邵江华
- 关键词：基因转染
- 类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B酵母双杂交cDNA文库的构建
- 2011年
- 目的:构建类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B的酵母双杂交用cDNA文库.方法:从肝癌细胞Hep3B中提取总RNA,分离mRNA.利用反转录酶M-MLV与Oligo(dT)AnchorPrimer合成1stStrandcDNA,用E.coliDNAPolymerase与E.coliDNALigase将RNA链置换成DNA链,合成2ndStrandcDNA.将双链cDNA与EcoRⅠAdaptor连接,然后用EcoRⅠ/XhoⅠ进行酶切.使用SpinColumn除去短链cDNA与pGADT7载体连接,转化入E.coliDH10B,建成原始文库.然后对其进行扩增并随机挑取单菌落,酶切鉴定重组子插入片段大小.结果:提取的总RNA降解少且分子完整;RNA纯度高,相对分子质量为400-5000bp;成功合成双链cDNA,均符合建库要求;库容量达到1.03×106克隆,原始文库滴度为2.50×109cfu/L,扩增后的文库滴度为3.60×1012cfu/L.插入片段大小分布为0.5-3.5kb,平均长度约为2.0kb.结论:所构建文库的各项指标均达到要求,为筛选FAT10作用蛋白奠定了重要基础.
- 余新刘天德洪波李国惠邵江华
- 关键词：FAT10
- ROCK2与肿瘤侵袭转移的相关性被引量：1
- 2010年
- 李国惠刘天德邵江华
- 关键词：肿瘤
