李凯芹
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 供职机构：南方医科大学中西医结合医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 噬菌体随机十二肽库淘选三水白虎汤作用于类风湿关节炎滑膜细胞的靶点研究被引量：8
- 2014年
- 目的:利用噬菌体随机十二肽库淘选出与三水白虎汤(SSBH)作用的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)特异性结合的多肽,寻找SSBH治疗类风湿关节炎的蛋白靶点。方法:以SSBH处理过的RASFs为靶细胞,生理盐水(NS)处理的RASFs为吸附细胞,全细胞差减筛选法对噬菌体十二肽库进行3轮淘选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体,并初步鉴定噬菌体克隆的亲和力,阳性克隆测序后进行生物学分析。结果:3轮淘选后,随机挑选32个噬菌体克隆进行DNA序列分析,展示SGVYKVAYDWQH十二肽的噬菌体被富集约为56%(18/32)。结论:从噬菌体肽库筛选到SSBH作用RASFs的特异性结合短肽,并分析出相关作用蛋白。
- 潘超肖长虹高燕赵晓峰李凯芹毕亚男
- 关键词：类风湿关节炎
- 三水白虎汤含药血清抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞迁移的初步研究
- 2015年
- 目的初步探讨三水白虎汤（SSBH）对类风湿关节炎（RA）滑膜成纤维细胞（SFs）侵袭迁移的影响和可能的机制,为后续研究奠定基础。方法组织块培养法获得类风湿关节炎患者膝关节SFs并传代,培养3~5代进行实验。实验设置3组,即：生理盐水（NS）空白血清对照组,10%三水白虎汤含药血清组,sp600125（c-Jun氨基末端激酶信号通路抑制剂）药物血清组。细胞划痕实验观察RASFs在不同时间点的迁移状况并计算迁移率,Transwell实验分不同时间点观察侵袭情况并统计RASFs对小室膜的穿透数量;Western blot检测各组细胞整合素-β1（integrin-β1）的表达水平。结果划痕实验显示10%三水白虎汤组、sp600125组划痕后细胞迁移率较生理盐水组明显下降（P〈0.05）,且sp600125组的抑制作用强于三水白虎汤组（P〈0.05）;Transwell实验显示药物组穿过小室膜的细胞数明显减少（P〈0.05）,sp600125组的透膜细胞数明显少于三水白虎汤组（P〈0.05）;三水白虎汤组integrins-β1表达量明显下调（P〈0.05）,sp600125组与生理盐水组相比差异无显著性（P〉0.05）。结论三水白虎汤对RASFs的浸润迁移有一定的抑制作用,机制可能与下调细胞迁移相关蛋白和抑制JNK信号通路有关。
- 赵晓峰肖长虹潘超崔明珠李凯芹陈恩生
- 关键词：类风湿关节炎成纤维细胞迁移
- 三水白虎汤治疗类风湿关节炎临床与实验研究
- 三水白虎汤由《千金要方》犀角散和《广济总录》疗白虎方化裁而成,具有清热透毒,除湿消肿,通络止痛之功效。我们用之于类风湿关节炎活动期的治疗已有近20年的历史,取得了较好的疗效。现将新近的临床观察和部分药理实验结果报道如下:
- 肖长虹吴启富杨敏陈德超李凯芹
- 文献传递
- 三水白虎汤对滑膜成纤维细胞增殖及IL-6、IL-17分泌的影响被引量：12
- 2013年
- 目的观察三水白虎汤含药血清对体外培养的类风湿关节炎（RA）、骨关节炎（OA）滑膜成纤维细胞（FLS）增殖及分泌白细胞介素-6（IL-6）、IL-17的影响，探讨三水白虎汤的作用机制。方法组织块培养法收集RA、OA患者的关节FLS，体外培养传代，取3～6代细胞，加入20％三水白虎汤含药血清培养72h，M丌法连续检测FLS的增殖率，ELISA法检测上清液中IL-6、IL-17的水平，以来氟米特和生理盐水含药血清作对照。结果三水白虎汤含药血清对RA、OAFLS增殖有显著抑制作用，同时还能显著抑制RA—FLS分泌IL-17，抑制效率与来氟米特相当；但对RA—FLS的IL-6分泌无影响。对OA-FLS的IL-17、IL-6的分泌均无显著影响。结论复方中药三水白虎汤能抑制FLS的增殖，并能抑制RA-FLS分泌IL-17，这可能是该方治疗RA的药理机制之一。
- 高燕肖长虹潘超左芳芳李凯芹
- 关键词：滑膜成纤维细胞增殖白细胞介素-17
- 人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞-软骨-重度联合免疫缺陷鼠模型的研制
- 2012年
- 目的建立人类风湿关节炎（RA）滑膜成纤维细胞（SFs）．软骨．重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠模型，以骨关节炎滑膜成纤维细胞（OASFs）作对照，探讨RASFs在RA发病中的作用及机制。方法将培养传代至第4代的RASFs／OASFs经5-澳脱氧尿嘧啶核苷体（5-Brdu）标记后注入可吸收明胶海绵，与人的正常软骨一起移植入SCID小鼠背部皮下，第30天处死模型，剪取移植物和鼠双膝关节作组织学观察，免疫组织化学检测5-Brdu和Vimehtin阳性细胞，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中人基质金属蛋白酶（MMP）-3和人白细胞介素（IL）-6含量。统计学方法采用两独立样本秩和检验。结果①2组血清中均可检测出人MMP-3，仅在RASFs组检测到1例IL-6。②RASFs组移植的软骨侵蚀程度（0-6±0．7与O．3±0．5）和软骨降解程度（2．3±0．8与1．7±1．0）较OASFs组有增高趋势，但差异均无统计学意义（P〉0．05）。③RASFs组鼠膝关节的滑膜增生程度（3．1±0．8与1．7±1．0，P〈O．01）和软骨侵蚀程度（1-6±1．7与0-6±1．4，P〈O．05）均显著高于OASFs组。④在SCID鼠皮下、移植软骨处、鼠膝关节滑膜及骨髓中检测出5-Brdu及Vimentin阳性的SFs。结论传代培养的RASFs在SCID鼠皮下存活并保持其侵袭性生长的特点，且能迁移至远处关节中诱发关节炎症。
- 左芳芳肖长虹胡文陈育尧黄梅李凯芹许琴笑陈恩生
- 关键词：关节炎滑膜软骨SCID
