李冰
- 作品数：316 被引量：452H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家肉牛牦牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 牛巴贝斯虫DXS基因的克隆和真核表达被引量：1
- 2014年
- 【目的】顶质体是存在于包括疟原虫和巴贝斯虫在内的顶复门寄生虫的一种细胞器,在病原体中,它主要承载类异戊二烯前体和脂肪酸合成途径,异戊二烯五碳结构是有机体合成多种化合物的结构基础,对有机体生命活动至关重要,例如,在哺乳动物中成为胆固醇和类固醇激素的基本结构,在植物中参与合成类胡萝卜素。且存在于顶质体的类异戊二烯前体合成途径对于病原体的生命活动至关重要且不存在于人类和哺乳动物机体,这使其成为近年来人们研究抗原虫药物的焦点。有学者发现利用特异性阻断类异戊二烯代谢途径的药物可治疗疟疾。1-脱氧-5-磷酸D-木酮糖合成酶(DXS)为该途径中的第一个限速酶。因此,针对牛巴贝斯虫的1-脱氧-5-磷酸D-木酮糖合成酶dxs基因进行克隆和序列分析,并对其进行真核表达和活性检测,以期获得具有活性的1-脱氧-5-磷酸D-木酮糖合成酶,为进行针对该酶的特异性抑制剂的筛选奠定基础。【方法】首先采用反转录PCR技术从牛巴贝斯虫陕县株总RNA中扩增出DXS基因的全长cDNA,并对其进行克隆测序,对测序结果进行序列分析,将阳性克隆亚克隆至带荧光标签的真核表达载体,利用脂质体转染法将重组真核表达质粒转染至Hela细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染细胞的表达情况,消化收集转染细胞,通过超声破碎后采用Western blot技术对DXS蛋白的表达情况进行检测,结合G418压力筛选以及有限稀释的方法对转染阳性细胞进行筛选,获得阳性单克隆细胞。在体外建立DXS酶反应体系,并利用液相质谱联用技术对表达产物的体外活性进行检测。【结果】扩增得到的DXS基因全长共2 061 bp,共编码686个氨基酸,与GenBank上T2Bo株相应基因相似性达到98.0%。利用生物信息学方法对该蛋白质的二级结构进行分析发现,该酶具有3个结构域,分别是焦磷酸硫胺素结合区域;�
- 王婧李冰刘翠翠夏吉鹏张继瑜
- 关键词：真核表达
- 反相高效液相色谱法测定盐酸沙拉沙星包合物含量
- [目的]建立测定β--环糊精包合物中盐酸沙拉沙星含量的反高效液相色谱分析方法。[方法]样品经0.1mol/L的氢氧化钠溶解,用紫外分光光度计在200nm-800nm范围内扫描,并在高效液相色谱仪上逐步验证;考察乙腈-磷酸...
- 姜兴粲李冰邱燕华程富胜魏晓娟王玮玮张吉利张继瑜
- 关键词：反相高效液相
- 文献传递
- 复方羟氯扎胺混悬液的制备及含量测定被引量：3
- 2021年
- 本研究旨在制备复方羟氯扎胺混悬液,建立含量测定方法并进行质量评价。以沉降体积比、再分散性作为评价指标,通过单因素试验及响应面法确定最佳处方,建立有效成分含量测定的高效液相色谱法,并对混悬液理化特性以及稳定性进行初步评价。结果显示,复方羟氯扎胺混悬液的最佳处方为每100 mL含羟氯扎胺6 g、盐酸左旋咪唑3 g、羧甲基纤维钠0.36 g、聚山梨酯-802.5 g、柠檬酸钠0.86 g、亚硫酸氢钠0.10 g、对羟基苯甲酸甲酯钠0.18 g和柠檬黄0.01 g;建立的含量测定方法准确度高,精密度良好,羟氯扎胺和盐酸左旋咪唑分别在5~100μg/mL和2.5~50μg/mL浓度范围内与相应峰面积线性关系良好,样品平均回收率分别为98.61%和98.43%;3批小试样品沉降体积比均大于0.9,再分散次数少,粒径小于10μm,在高温及光照条件下稳定。结果表明,本研究制备的复方羟氯扎胺混悬液性状符合要求、稳定性良好、质量可控。
- 申涵露白玉彬张东辉路宁宁李冰周绪正张继瑜
- 关键词：盐酸左旋咪唑
- 一种用于蒸馏烧瓶的保温套
- 本实用新型公开了一种用于蒸馏烧瓶的保温套，包括蒸馏烧瓶，所述蒸馏烧瓶瓶体的上半部以及颈部均包裹有保温套，所述保温套由其内填充有防火棉的防火纯棉布套缝制而成，防火纯棉布套上缝制有长条状的粘扣带，通过粘扣带将保温套裹覆在蒸馏...
- 程富胜张继瑜刘宇周绪正李冰魏小娟牛建荣张霞
- 文献传递
- 一种防治畜禽温热病药物组合物及其制备方法
- 本发明公开一种防治畜禽温热病药物组合物及其制备方法。以1500ml药液计算，药物含各味中药以生药材计算的量以及敷料量的配比为：连翘350～450g，板兰根150～250g，金银花150～250g，黄芩150～250g，黄...
- 李剑勇张继瑜李新圃杨亚军周绪正牛建荣魏小娟李冰陈佳娟
- 文献传递
- 阿苯达唑及其有关物质的高效液相色谱分析被引量：1
- 2022年
- 为了建立原料药及混悬液中阿苯达唑及其有关物质的高效液相色谱(HPLC)定量分析方法,采用AgilentPoroshell EC-C18(4.6 mm×150 mm,2.7μm)色谱柱,检测波长为292 nm,流动相为甲醇-0.1%甲酸10 mmol/L甲酸铵溶液,梯度洗脱,柱温35℃,流速为0.80 m L/min,进样量5μL。结果显示,对阿苯达唑与各有关物质进行HPLC检测时均能到达基线分离,且空白辅料无干扰,各有关物质在质量浓度为0.03~20μg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系,R2≥0.999,回收率在90%~104%之间(RSD≤3%,n=9)。结果表明,所建立的高效液相色谱方法可以用于定性和定量分析阿苯达唑。
- 张东辉陈玲玲董朕白玉彬李冰张继瑜周绪正
- 关键词：阿苯达唑高效液相色谱法
- 一种牛的诊疗保定栏
- 本实用新型涉及一种牛的诊疗保定栏，是由数根竖直钢管、数根纵向钢管和数根横向钢管通过螺丝组合成框架式结构。保定栏左右两面各有垂直于地面的竖直钢管固定于地面，竖直钢管之间相间隔，右方有纵向钢管通过螺丝与平行于右方竖直钢管连接...
- 周绪正张继瑜邢守叶李冰魏小娟牛建荣李金善李剑勇杨亚军刘希望程富胜王玲
- 文献传递
- α-倒捻子素在制备抑制大肠杆菌生物被膜形成制剂中的应用
- 本发明提供了α‑倒捻子素在制备抑制大肠杆菌生物被膜形成制剂中的应用，涉及生物被膜抑制剂筛选技术领域，α‑倒捻子素在制备抑制大肠杆菌生物被膜形成制剂中的应用，所述抑制大肠杆菌生物被膜形成的制剂抑制胞外多糖的生成，α‑倒捻子...
- 张继瑜白玉彬王玮玮杨枭荣白玉婷翟斌涛李冰周绪正魏小娟程富胜
- 一种动物医用脱毛剂及其制备方法
- 本发明提供一种动物医用脱毛剂，按重量百分含量计，由以下原料组成：Na<Sub>2</Sub>S：8%～12.5%；增稠剂：5%～10%；保护剂：5%～10%；增塑剂：2.5%～5%；余量为水。本发明还提供其制备方法。本发...
- 周绪正张继瑜李冰魏小娟程富胜牛建荣王玲
- 文献传递
- 一种用于防治猪附红细胞体病的中药组合物及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种用于防治猪附红细胞体病的中药组合物，所述中药组合物是由按照重量份计的以下原料制备得到的：巴豆3份，甘草2份；并提供了其制备方法和应用。本发明的有益效果为：本发明提供的一种用于防治猪附红细胞体病的中药组合物...
- 苗小楼尚小飞李芸潘虎王瑜王东升李冰
- 文献传递
