曾季平
- 作品数：34 被引量：105H指数：6
- 供职机构：山东大学医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转染NEP基因对Aβ_(25-35)诱导神经元凋亡的保护作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究转染NEP基因对神经毒物质Aβ25-35诱导神经元凋亡的保护作用。方法培养大鼠脑皮层神经元,用Aβ25-35作用神经元制备凋亡模型,NEP基因转染神经元。通过MTT法及流式细胞分析法观察NEP基因过表达对Aβ诱导神经元凋亡的保护作用。通过RT-PCR检测目的基因NEP,APP,以及凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达,Western-Blot测定APP和Aβ的蛋白表达。结果MTT和流式细胞分析法观察,发现在Aβ25-35作用下转染NEP组神经元活,性显著增高(P<0.05),凋亡率降低。RT-PCR及Western Blot结果显示,转染NEP组神经元APP基因的表达明显减少,Aβ的生成减少;同时促凋亡基因Bax表达降低,Bcl-2基因表达增高。结论转染NEP基因能保护Aβ所致的神经元凋亡。
- 张亚伦丁岩邵世滨杨玲玲任凯段珊曾季平崔行
- 关键词：神经元原代培养中性内肽酶
- p35基因对MnCl_2诱导PC12细胞凋亡的作用被引量：6
- 2004年
- 目的:探讨p35基因对氯化锰(MnCl2)诱导的PC12细胞凋亡的作用。方法:将p35基因转染PC12细胞得到可稳定表达p35基因的PC12/p35细胞株,使用相差显微镜观察、MTT染色和流式细胞分析等方法检测p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞凋亡的作用。结果:p35基因在PC12细胞中的稳定表达可以有效地抑制MnCl2诱导的PC12细胞凋亡。结论:p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞具有保护作用。
- 曾季平王立祥胡晓燕秦文孔峰杨玲玲崔行刘新垣
- 关键词：氯化锰PC12细胞细胞凋亡
- 褪黑素对氧自由基诱导的PC12细胞凋亡的保护作用被引量：2
- 2004年
- 目的:探讨氧自由基在阿尔茨海默病(AlzheimerDisease熏AD)发生中的作用及可能机制,评价褪黑素(Melatonin熏MT)的临床应用价值。方法:采用超氧自由基产生系统黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统(X/XO)作用于PC12细胞,以褪黑素拮抗其作用,观察细胞的形态学变化;MTT法检测细胞存活率,DNA电泳和流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT鄄PCR技术测定凋亡相关基因bcl鄄2、bax的表达。结果:X/XO作用后,PC12细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率增加,电泳呈现DNAladders,凋亡相关基因bax上调;而10-5M褪黑素即能改善凋亡情况。结论:氧自由基可诱导神经元凋亡从而促进AD发生,其机制与促凋亡相关基因Bax表达增高有关;褪黑素可减缓神经元凋亡,可用于临床预防与治疗。
- 杨玲玲付振涛孔峰胡晓燕曾季平崔行
- 关键词：活性氧阿尔茨海默病细胞凋亡
- 氯化钴对PC12细胞的凋亡作用被引量：5
- 2005年
- 目的 确定氯化钴(CoCl2 )对PC12细胞的影响。方法 构建CoCl2 诱导的PC12细胞模型,检测CoCl2 对PC12细胞的毒性作用;将Caspases的抑制基因p3 5转染PC12细胞得到可稳定表达p3 5基因的细胞株PC12 p3 5 ,检测p3 5对CoCl2 诱导的PC12细胞的作用;检测Caspases特异性多肽抑制剂Z VAD FMK对CoCl2 诱导的PC12细胞的作用。结果 分别以10 0、3 0 0、5 0 0、70 0和10 0 0 μmol LCoCl2 诱导PC12细胞2 4h或以5 0 0 μmol LCoCl2 分别诱导PC12细胞12、2 4、3 6、48和60h后,PC12细胞存活率均明显下降(P <0 0 1) ,并与CoCl2 诱导的时间和浓度呈正相关;细胞亚显微结构检测,流式细胞分析和DNA片段化结果也表明5 0 0 μmol LCoCl2 诱导PC12细胞2 4h可使PC12细胞出现明显凋亡特征。构建可稳定表达Caspase蛋白酶抑制基因p3 5的PC12细胞株,或分别加入5 0和10 0 μmol LCaspases多肽抑制剂Z VAD FMK预处理PC12细胞1h后,以5 0 0 μmol LCoCl2 诱导PC12细胞2 4h ,形态学观察结果,细胞存活率检测和流式细胞分析均表明p3 5基因和Z VAD FMK均可有效地抑制CoCl2 诱导的PC12细胞凋亡(P <0 0 1)。结论 CoCl2 可诱导PC12细胞凋亡。
- 曾季平王立祥胡晓燕于清水秦文崔行
- 关键词：氯化钴凋亡作用Z-VAD-FMKPC12细胞株P35基因DNA片段化
- 转染PHGPx基因对Aβ及H_2O_2诱导PC_(12)细胞凋亡的保护作用被引量：1
- 2004年
- 目的 观察转染磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 (PHGPx)基因对神经毒物质Aβ及H2 O2 诱导细胞凋亡的保护作用。方法 通过基因转染和筛选得到稳定高表达PHGPx基因的PC1 2 细胞 ,加入神经毒物质Aβ及H2 O2 ,采用电镜、DNA片段化测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析等方法观察转基因后抗逆变致凋亡的能力。结果 加入神经毒物质Aβ或H2 O2 后 ,未转染PHGPx基因的PC1 2 细胞出现凋亡的特征性形态学改变 ,电泳可见断裂的DNA片段 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率较转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降 (均P <0 0 1 )。结论 Aβ及H2 O2 能够诱导神经细胞凋亡。转染PHGPx基因能对抗Aβ、H2 O2 的神经毒性 ,保护Aβ、H2 O2 所致的神经细胞损伤凋亡 。
- 付振涛杨玲玲郝建荣曾季平孔峰钟华崔行
- 关键词：AΒX基因转染PC12细胞DNA片段
- 氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制被引量：7
- 2005年
- 目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。
- 曾季平王立祥胡晓燕杨玲玲孔峰吴伟芳陈蔚文崔行
- 关键词：氯化钴PCI2细胞细胞凋亡活性氧
- 新型有丝分裂转录因子FoxM1和组蛋白去甲基化酶RBP2在胃癌发生中的作用及相关分子机制
- 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，在全世界所有与癌症相关的死亡当中，胃癌居于第二位。研究者们已证明幽门螺杆菌感染与胃癌发生之间的密切关系，现一般认为，幽门螺杆菌感染首先引起慢性胃炎的发生，而慢性胃炎是胃组织向癌症转化的病理生理...
- 曾季平
- 关键词：胃癌组蛋白去甲基化酶细胞衰老发病机制
- 文献传递
- 新型大气污染物MMT诱导人SK-N-SH细胞凋亡的分子机制被引量：1
- 2008年
- 目的研究甲基环戊二烯羰基锰(MMT)诱导人SK-N-SH细胞凋亡的分子机制。方法MMT诱导SK-N-SH细胞后,MTT法检测细胞存活率,分光光度法检测活性氧(ROS)生成;化学发光法检测Caspase-3活性;Western blot法检测p38 MAPK磷酸化程度。结果在MMT诱导SK-N-SH细胞过程中,细胞ROS生成量为正常组的5.2倍(P<0.01);抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)及二硫苏糖醇(DTT)可有效抑制细胞ROS生成(P<0.01),提高细胞存活率(P<0.01);在这一过程中,Capase-3活性明显增强,为对照组的3.01倍(P<0.01);同时p38 MAPK磷酸化程度加强;p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可提高细胞存活率(P<0.05),抑制Caspase-3的活性(P<0.01)。结论MMT诱导的SK-N-SH细胞凋亡与ROS升高,激活Caspase-3有关,这一过程有p38 MAPK相关信号转导途径参与。
- 秦文王立祥曾季平王姿颖
- 关键词：凋亡分子机制
- 转染过氧化氢酶-过氧化物酶基因对Aβ诱发PC_(12)细胞凋亡的保护作用被引量：2
- 2006年
- 目的观察转染过氧化氢酶-过氧化物酶(CPX)基因对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱发细胞凋亡的保护作用。方法转染并筛选稳定高表达CPX基因的PC12细胞系,用神经毒物质Aβ处理细胞,观察其抗逆变致凋亡的能力。通过电镜、DNA片段化的测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析观察转基因后对Aβ诱发细胞凋亡的保护作用。结果加入神经毒物质Aβ后,未转染CPX基因的PC12细胞出现凋亡的特征性形态学改变,电泳可见断裂的DNA片段,流式细胞仪检测细胞凋亡率较CPX基因转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降(P<0.001)。结论Aβ诱导的神经细胞凋亡与活性氧的产生有关,转染CPX基因能对抗Aβ的神经毒性,保护Aβ所致的神经细胞凋亡。
- 付振涛崔行杨玲玲郝建荣曾季平胡晓燕孔峰
- 关键词：细胞转染细胞凋亡
- 小干扰RNA对人内皮细胞株类表皮生长因子域7基因表达抑制作用的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究小干扰RNA(siRNA)对类表皮生长因子域7(egfl7)基因表达的抑制作用。方法利用Ambion公司设计合成的以egfl7为靶标的siRNA,通过脂质体将siRNA转入人脐静脉内皮细胞株,以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照,利用MTS[3-(4,5-dimethylthiaz-2-yl)- 5(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfopheny)-2H-tetrazolium,inner salt]法检测siRNA对细胞存活率的影响,同时检测乳酸脱氢酶和三磷酸腺苷,观察siRNA对细胞生长的影响,RT-PCB法检测egfl7 mRNA水平的改变,Western blot检测egfl7蛋白表达的变化。结果siRNA各组与对照组细胞存活率差异均有统计学意义(P<0．05),乳酸脱氢酶及三磷酸腺苷释放量差异也存在统计学意义(P< 0．01)。转染24 h后,siRNA组egfl7 mBNA与对照组相比差异有统计学意义(P<0．01),同时egfl7蛋白表达也被明显抑制(P<0．01)。其中siBNA1的抑制效率最高。结论体外转录合成的siRNA可抑制人脐静脉内皮细胞egfl7基因的表达。
- 蒋卫东曾季平秦爱琼鹿庆华徐冬玲葛志明
- 关键词：RNA基因表达细胞
