易明林
- 作品数：53 被引量：545H指数：13
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理环境科学与工程更多>>
- 高质量花生根尖细胞染色体制片方法研究被引量：16
- 2013年
- 为了能快速获得用于染色体分带或者荧光原位杂交的高质量花生根尖细胞染色体制片,通过选择适当粗细的花生侧根,经过对二氯苯浸泡预处理,卡诺氏固定液固定后,直接用45%醋酸烘烤压片,得到了细胞平整、染色体分散的根尖细胞染色体制片。与HCl解离压片的方法相比,该方法中试剂对染色体影响微小。与酶解去壁低渗法相比,该方法没有酶解去壁低渗的过程,不需要用果胶酶和纤维素酶等较贵重试剂,节约了时间和成本,提高了制片效率。该方法不仅适用于花生,也适用于芝麻、水稻、玉米、大豆、青豆、番茄等多种植物。
- 杜培张新友李丽娜黄冰艳易明林董文召汤丰收
- 关键词：根尖细胞染色体制片方法DAPI染色
- 鸡Igλ轻链基因克隆、序列分析及其在COS7细胞膜上的定位表达被引量：1
- 2009年
- 为了研究鸡B细胞膜免疫球蛋白(mIg)的功能,深入了解鸡免疫系统抗体基因的特点,从鸡法氏囊B细胞cDNA中扩增出Igλ轻链基因,对其核苷酸序列和氨基酸序列进行了分析和比较。该基因cDNA全长873bp,编码含226个氨基酸的Igλ轻链,N-端21个氨基酸构成轻链信号肽,随后是2个Ig样结构域。运用融合PCR的方法将该基因与牛IgG Fc受体γRⅡ跨膜区序列嵌合形成重组跨膜分子,构建真核表达载体pcDNA-λR2T,转染COS7细胞,荧光抗体染色及流式细胞术检测到重组鸡Igλ轻链在细胞膜上的表达。所扩增的鸡Igλ轻链基因以及构建表达于细胞膜上的重组鸡Igλ轻链跨膜分子,为研究鸡免疫系统中的抗体轻链基因,探索Igλ轻链和B细胞膜免疫球蛋白的功能奠定技术基础。
- 张红王健王丽席俊易明林张改平章金刚
- 关键词：COS7细胞
- 重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
- 2008年
- 目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ。重组载体转染COS7细胞后,SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达。用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆。结果:成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体,SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达。杂交瘤细胞经筛选与鉴定,获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株,Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性。结论:构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链。并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb。为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础。
- 张红张改平章金刚杨艳艳易明林李姣韩鸿鹏
- 关键词：COS7细胞单克隆抗体
- 麦套花生播种设备
- 本实用新型涉及麦套花生播种设备，有效的解决了在先技术中人工播种效率低下、设备播种效率提升较小且肥料和种子无法分开的问题；其解决的技术方案是包括机架，机架上固定连接有肥料仓，肥料仓一侧设置有两个固定连接在机架上的内花生仓，...
- 高伟臧秀旺郝西刘娟张俊汤丰收卜莉洁袁新社王庆航易明林刘兵崔亚男张曼张朋磊
- 文献传递
- 花生FAD2基因RNAi载体转化及转基因籽粒脂肪酸分析被引量：19
- 2008年
- 在构建了以花生△12脂肪酸去饱和酶(FAD2)基因自身启动子驱动、有内含子间隔的该基因编码序列反向重复片段的RNA干扰载体的基础上,对上述干扰载体进行了农杆菌介导的花生胚小叶的遗传转化,以期特异调控花生籽粒中油酸、亚油酸含量。在2个受体品种中获得105株抗性再生植株,用两对引物对其进行了PCR扩增,其中32株初步证实为转基因植株。采用近红外分析仪对转基因T1籽粒油酸和亚油酸含量的检测结果表明,转基因株系内油酸/亚油酸比值的变异高于对照,多数转基因株系油酸亚油酸比值平均数也显著高于对照。
- 黄冰艳张新友苗利娟严玫海燕易明林徐静陈占宽
- 关键词：花生FAD2基因油酸亚油酸
- 软枣猕猴桃原生质体培养与细胞团再生的初步研究被引量：22
- 2001年
- 以软猕猴桃叶片、叶片愈伤组织为材料 ,研究了影响原生质体分离和培养的因素 结果表明 ,原生质体分离 ,酶液配方 2优于配方 1,成龄叶片优于幼龄叶片 ;培养方法以浅层培养法最好 ;改良MS液体培养基培养愈伤组织原生质体 ,5～ 7d出现第 1次细胞分裂 ,14d出现第 2次细胞分裂 ,30d形成多细胞团 ,5
- 朱道圩秦永华郅玉宝易明林陈占宽胡湛
- 关键词：软枣猕猴桃原生质体猕猴桃
- 烟草促熟基因的构建及表达的研究
- 陈新建刘国顺陈占宽郅玉保时向东符云鹏易明林陈军营籍越王德王春丽张百让陈峥马红旗刘红振
- 本研究采用基因工程的方法，较好地解决了乙烯催熟烟叶存在的问题。将与衰老有关的启动子（来自拟南芥）与乙烯生物合成的关键酶——ACC合成酶（来自兰花）重组，并将重组的基因转入烟草，使之表达，得到成熟度好，品质优良的烟草转基因...
- 关键词：
- 关键词：烟草
- 新城疫病毒HN基因在毕赤酵母中的表达及其表达产物的免疫原性被引量：1
- 2008年
- 应用RT-PCR获得新城疫病毒(NDV)La Sota株的血凝素-神经氨酸酶(HN)基因片段,将HN基因片段定向插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建了分泌型表达载体pPICZαA-HN,将其用SacⅠ线性化后电转化入P. pastorisX-33。经高抗性及阳性转化子筛选得到重组菌株X-33/pPICZαA-HN,甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE、Western-blot和血凝活性检测,结果约在97 ku处有目的条带,比预期分子质量大,占总蛋白的53%,与NDV阳性血清发生特异性免疫反应,并具有较高的血凝活性。表明,HN基因在毕赤酵母中成功地进行了表达且表达产物具有良好的免疫原性。
- 刘一尘张春杰程安春程相朝李银聚吴庭才易明林
- 关键词：新城疫病毒毕赤酵母SDSPAGE免疫原性
- 中国石斛属一新种被引量：2
- 1992年
- 本文发表了石斛属一新种,即伏牛石斛Dendrobium funiushanenseT.B.Chan,Z.X.Chen et Z.K.Chen,sp.nov.
- 赵无榜陈志秀陈占宽易明林
- 关键词：石斛属
- 一种用于农作物根构型生长观测装置
- 本实用新型提供一种用于农作物根构型生长观测装置，解决了无法直观的对观察箱中部的幼苗根系进行观测，需将幼苗取出的单独观测；取出多个幼苗进行对比时，单人操作较为繁琐的问题；包括观察箱，观察箱中部固定有内部中空的隔板，观察箱底...
- 张俊臧秀旺高伟郝西刘娟张曼张朋磊崔亚男刘梦雅易明林刘兵
