戴和平
- 作品数：93 被引量：372H指数：10
- 供职机构：中南大学湘雅医学院医学遗传学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 直接消化法分离单克隆贴壁细胞被引量：1
- 2002年
- 目的 :建立一种高效的贴壁细胞单克隆分离法。方法 :将细胞悬液稀释成 4个密度梯度后接种于分隔开的血纤维蛋白膜层的皿上生长 ,克隆形成后吸 0 .2 5 %的胰酶消化 ,用移液器头直接挑取。结果 :永生细胞系和正常二倍体细胞在 10·cm- 2 ,5·cm- 2 两种接种密度时可分离到较多的单克隆 ,分离的单克隆永生细胞培养 1个月左右 ,细胞总数可达 10 6 个 ;但分离的正常二倍体细胞需培养 1个半月左右 ,细胞总数才达 10 6 个。结论 :细胞接种于被分隔成不同区域的血纤维蛋白膜层的皿上 ,采用直接消化法可有效获得单细胞克隆 ,接种密度以 10·cm- 2 ,5·cm- 2
- 赵迪诚龙志高郑多戴和平夏昆
- 关键词：贴壁细胞细胞培养
- 一例22q和11q部分三体患者家系的高分辨染色体研究被引量：1
- 1990年
- 本文采用染色体高分辨技术完成了一例核型为47,XY,+der(22),t(11;22)(22pter→22q11.2∶∶11q23.3→11qter)患者及其家系的细胞遗传学研究。其母亲核型为46,XX,t(11;22)(q23.3;q11.2)的平衡易位携带者。并通过对患者母亲第二次妊娠胎儿羊水细胞的染色体分析确认胎儿核型为46,XX,t(11;22)(q23;q11)mat,即为一个表型正常的携带者,并经出生后证实。
- 戴和平李麓芸夏家辉
- 关键词：高分辨染色体智力低下部分三体
- 人类染色体11q23→qter区带显微切割及绘画
- 1993年
- 1989年 Lüdecke 首次将 PCR 技术引入显带染色体的微切割、微克隆领域获得成功,开创了在人类染色体上直接获取特异性区带 DNA 探针池,定向克隆基因的新途径.本研究用显微切割、PCR 技术获得了瘤基因 CBL_2所在区段的11q23→qter 专特性 DNA 探针池、并用免疫荧光染色体原位杂交法证实其专特性和完整性.
- 何小轩夏家辉李麓芸戴和平朱亚辉潘乾
- 关键词：染色体显微切割
- 利用核糖体基因区打靶载体靶向表达改造型人凝血因子Ⅷ被引量：4
- 2005年
- 构建了携带改造型hFⅧ(hFⅧ-BDDAK39)的核糖体基因区靶向表达载体pHrneo-BDDAK39,并将其转入人纤维肉瘤细胞(HT1080),检测其定点整合的能力及hFⅧ-BDDAK39的表达情况.结果显示,pHrneo-BDDAK39能够成功地将hFⅧ-BDDAK39靶入到HT1080细胞的核糖体基因区,定点整合效率达到2.0×10^(-5),并且靶入的hFⅧ-BDDAK39能有效表达,表达量为(32±5)ng·10~6细胞^-1·24h^(-1).这为利用此靶向表达载体进行血友病A的基因治疗提供了重要的实验依据.
- 刘雄昊刘慕君佘华文路薛志刚梁德生蔡芳潘乾龙志高邬玲阡戴和平夏昆夏家辉
- 关键词：靶向表达核糖体基因改造型打靶载体纤维肉瘤
- 与Atrophin-1同源的人类新基因的克隆和定位
- 1999年
- 将齿状核红核苍白球路易氏体退行性病变(DRPLA)致病基因(Atrophin-1)cDNA序列对EST数据库进行同源性比较,得到与(Atrophin-1显著相似的EST 25个,依EST间的相互关系构建5个EST重叠群。根据其中的3个EST重叠群设计引物,对cDNA文库扩增,PCR法制备探针,筛选人cDNA和gDNA文库。cDNA克隆经测序,拼接,获得含完整编码区的cDNA序列4.6kb(命名为Atrophin样基因,Atrophinlike gene),其中有一个3036bp的阅读框架。基因编码区由9个外显子构成。基因组DNA克隆,经荧光原位杂交定位于1p36。人、鼠Atrophin-1基因家族各成员的比较分析显示,均为亲水性较强的蛋白质,其C端保守性较强,有2个酸性与碱性氨基酸交替区。DRPLA,Haw River综合征与Atrophin-1中CAG的过度重复相关,而人类Atrophin样蛋白中不含长的多聚谷氨酰胺残基(其基因中只有3次CAG的重复)。
- 夏家辉刘春宇王德安阮庆国崔峰谢微潘乾廖晓东戴和平邓汉湘
- 关键词：致病基因基因克隆基因家族
- 结肠腺瘤性息肉病蛋白通过与SMAP/KAP3相互作用与微管结合被引量：2
- 2002年
- 结肠腺瘤性息肉病基因 (adenomatouspolyposiscoli,APC)的突变导致家族性结肠息肉腺瘤病和散发性结肠癌 ,APC基因编码一个具有多个结构域、多种磷酸化状态的大分子蛋白质 .APC蛋白可通过C段直接或间接与微管结合 ,同时还可以通过中段与微管结合 ,但其结合的机制目前还不清楚 .为进一步研究APC与其他蛋白质的相互作用 ,利用酵母双杂交技术运用APC中段 (15 0 0bp～ 4 80 0bp)构建诱饵质粒 ,筛选人胎脑cDNA文库 ,得到一个与APC相互作用的蛋白SMAP/KAP3,SMAP/KAP3是驱动蛋白KIF3A/ 3B的相关蛋白 .通过免疫共沉淀和双色免疫荧光共定位的方法 ,证实了APC与SMAP/KAP3在体内的相互作用 ,提示APC可能通过SMAP/KAP3
- 王成郑多钟向阳夏昆黄亮群戴和平陈玉祥夏家辉
- 关键词：相互作用微管酵母双杂交
- 角膜环状皮样瘤等人类重要疾病家系收集、致病基因定位与克隆
- 夏昆唐北沙张宝荣胡正茂冯永杨一峰邬玲仟戴和平潘乾龙志高梁德生沈璐江泓张灼华夏家辉
- 本研究工作是在“863”计划、“973”计划、国家自然科学基金和教育部课题支持下开展的。 目的与意义：抢救和保藏我国宝贵的遗传资源，利用其克隆致病基因，从根本上弄清遗传病的发病机理，更好的服务人类健康。取得的主要成果及...
- 关键词：
- 关键词：腓骨肌萎缩症
- 1例7p21.2→pter部分三体综合征患者及其表型定位研究被引量：3
- 2005年
- 采用人类染色体G显带技术、高分辨显带技术、荧光原位杂交技术 (FISH) ,对一例 7p2 1 .2→pter部分三体综合征患者的染色体进行研究 ,并综合文献报道的 1 4例 7p部分三体综合征的临床资料 ,就 7p部分三体综合征患者的核型与表型的相关关系、核型与疾病基因的相关关系等问题进行探讨。通过 1例染色体 7p2 1 .2→pter部分三体患者的染色体分析、表型定位研究和相关文献复习比较 ,探索染色体区带与表型的关系。结果表明 ,7p2 1 .2→p2 2是 7p部分三体综合征的关键片段 ,生殖器畸形、髋关节脱位与 7p1 5重复有关 ,心脏畸形与 7p多个基因作用有关 ,颅缝早闭基因可能位于 7p2 1 .2→p2 1 .3。
- 梁德生邬玲仟蔡芳夏昆龙志高潘乾戴和平夏家辉
- 人皮肤角质形成细胞的分离与原代无血清培养被引量：6
- 2003年
- 目的 :建立一种体外人皮肤角质形成细胞分离与原代培养的方法。方法 :采用两步消化法对皮肤进行消化 ,获取角质形成细胞进行体外无血清培养基培养 ,进行细胞形态学观察、免疫组织化学、透射电镜鉴定及生长曲线的绘制与分析。结果 :该方法可获取较多高纯度的角质形成细胞 ,且在体外可快速稳定增殖。结论
- 陈勇戴和平龙志高文娟潘乾陈玉祥夏昆夏家辉
- 关键词：皮肤角质形成细胞原代培养无血清
- 一个中国耳聋家系的SLC26A4基因分析(英文)被引量：5
- 2005年
- 目的确定一个非综合征型耳聋家系的致病基因。方法应用聚合酶链反应直接测序方法,对溶质转运蛋白家族26,成员4(solutecarrierfamily26,member4;SLC26A4)基因的所有外显子及其与内含子交界处进行测序寻找突变。结果在该家系先证者发现SLC26A4基因的N392Y、S448X复合杂合突变,其父亲为S448X的杂合突变,其母亲为N392Y的杂合突变。结论SLC26A4基因的N392Y、S448X复合杂合突变是导致该先证者耳聋发生的原因。
- 胡浩梁德生邬玲仟冯永蔡芳夏昆潘乾龙志高戴和平夏家辉
- 关键词：耳聋家系疾病SLC26A4基因
