徐理华
- 作品数：10 被引量：12H指数：3
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人鼻咽癌顺铂耐药细胞株的建立及其生物学特性
- 2012年
- 目的建立人鼻咽癌顺铂耐药细胞株并探讨其生物学特性。方法采用药物大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法建立人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,MTS法检测顺铂对CNE2和CNE2/DDP的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),观察CNE2、CNE2/DDP细胞形态,绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及Western blot法检测细胞MDR1表达水平。结果 MTS法检测DDP对CNE2的IC50为1.28μg/mL,CNE2/DDP的IC50为20.49μg/mL,RI达16。CNE2细胞形态饱满,长满时呈铺路石样紧密排列,CNE2/DDP细胞呈长梭形,CNE2/DDP较敏感细胞CNE2生长缓慢,倍增时间为39.0 h,流式细胞仪检测显示当DDP浓度大于1.0μg/mL时,CNE2的凋亡率明显高于CNE2/DDP细胞(P<0.05);进一步研究显示CNE2/DDP细胞中MDR1蛋白表达水平明显高于CNE2细胞。结论成功建立了稳定的人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,且耐药性能显著,可作为深入研究鼻咽癌顺铂耐药机制较为理想的模型。
- 袁太泽徐理华李新建张欢欢张秀萍
- 关键词：鼻咽癌顺铂抗药性
- 肾癌组织中APC、CXR32、TIMP-3基因启动子的甲基化研究
- 2010年
- 肾癌是泌尿系统最常见的肿瘤之一，除手术治疗外，放疗、化疗及激素治疗均不敏感，生物靶向治疗有一定的作用。本研究旨在探讨肾肿瘤组织中APC基因、CXR32基因、TIMP-3基因启动子的甲基化状况，观察其在肾脏肿瘤发生中的可能作用。
- 郑伏甫戴宇平徐理华邓春华郑克立
- 关键词：TIMP-3基因启动子APC基因甲基化状况肾癌组织生物靶向治疗
- 肾癌组织中BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子的甲基化研究被引量：2
- 2010年
- 目的:检测肾癌组织中伯特-霍格-杜贝(BHD)、Ras相关结构域家族(RASSF)1A、丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPINT)2基因启动子的甲基化状态,探讨其在肾癌发病中的可能作用。方法:收集肾肿瘤组织标本24份,其中透明细胞癌19份、错构瘤2份、癌旁组织3份,应用甲基化特异性聚合酶链反应法分别检测其BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果:19例透明细胞癌同时检出3种抑癌基因甲基化3例,2种抑癌基因甲基化9例,1种抑癌基因甲基化7例。2例错构瘤中检出1种抑癌基因甲基化1例,3例癌旁组织中检出2种抑癌基因甲基化1例。检出BHD基因甲基化9例,均为透明细胞癌。检出RASSF1A基因甲基化8例,其中透明细胞癌7例,癌旁组织1例。检出SPINT2基因甲基化20例,其中透明细胞癌18例,错构瘤1例,癌旁组织1例。结论:肾癌组织中BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子区存在甲基化状态,抑癌基因甲基化可能在肾癌的发病机制中起重要作用。
- 郑伏甫戴宇平徐理华邓春华郑克立
- 关键词：肾癌甲基化
- 小分子HIF-1α干扰RNA逆转鼻咽癌细胞耐药的实验被引量：3
- 2012年
- 目的探讨小分子HIF-1α干扰RNA对人鼻咽癌耐药细胞株CNE2/DDP耐药性的影响。方法采用药物大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法建立人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,瞬时转染法将HIF-1α小片段RNA导入CNE2/DDP细胞沉默HIF-1α基因,MTS法及流式细胞仪分别检测顺铂对CNE2/DDP细胞增殖、凋亡的影响,Western blot法分析细胞HIF-1α及MDR1表达水平。结果成功建立了人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,耐药系数达16。当顺铂≥1.0μg/ml时,CNE2组与siHIF-1αsiRNA组细胞抑制率均明显高于CNE2/DDP组与siCtrl-siRNA组(P<0.05);同样,CNE2组与siHIF-1αsiRNA组细胞凋亡率也明显高于CNE2/DDP组与siCtrl-siRNA组(P<0.05);Westernblot显示siHIF-1αsiRNA组HIF-1α及MDR1蛋白的表达低于CNE2/DDP组。结论小分子HIF-1α干扰RNA沉默HIF-1α提高了人鼻咽癌顺铂耐药细胞CNE2/DDP对顺铂的敏感度,逆转了CNE2/DDP对顺铂的耐药性。
- 袁太泽钱朝南徐理华李新建张欢欢张秀萍
- 关键词：鼻咽癌乏氧诱导因子-1Α多药耐药
- 西妥昔单抗联合电离辐射对鼻咽癌细胞的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨西妥昔单抗(Cetuximab)联合电离辐射对鼻咽癌细胞的放射敏感度、凋亡及细胞周期的影响。方法人鼻咽癌细胞CNE2经Cetuximab、电离辐射或两者联合处理,采用细胞克隆形成方法检测Cetuximab对CNE2放射敏感度的影响,利用Sigmaplot 10.0软件按单击多靶模型和线性二次模型拟合细胞存活曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期情况。结果 Cetuximab增强了鼻咽癌细胞CNE2的放射敏感度,放射增敏比为1.157。Cetuximab联合电离辐射明显增强了放射诱导的细胞凋亡(P<0.05)。经Cetuximab处理后的CNE2细胞出现G2/M期阻滞,且Cetuximab联合电离辐射可明显增强CNE2细胞G2/M期阻滞。结论 Cetuximab联合电离辐射促进了辐射诱导的鼻咽癌细胞凋亡,细胞周期G2/M期阻滞,从而增强了鼻咽癌细胞的放射敏感度。
- 袁太泽徐理华曾木圣曾奇曹素梅张秀萍郭翔
- 关键词：鼻咽癌西妥昔单抗电离辐射表皮生长因子受体
- 乳腺正常上皮细胞原代培养及不同时期乳腺癌变细胞三维培养模型的建立
- 背景与目的:跟常规的单层细胞平面培养相比较,三维培养更能模拟体内细胞的微环境,在三维培养体系中,细胞的生物学特性更接近于活体组织,本研究在建立了体外原代乳腺上皮细胞培养的基础上,建立了能反映乳腺癌变过程不同时期的乳腺上皮...
- 徐理华李满枝孔庆丽曾木圣翁桂香
- 关键词：乳腺肿瘤原代培养
- 文献传递
- ET-1通过上调CXCR4表达促进鼻咽癌低转移细胞株6-10B的迁徙被引量：1
- 2011年
- 【目的】探讨内皮素-1(ET-1)上调CXCR4表达促进鼻咽癌低转移细胞株6-10B迁徙的机制。【方法】加入不同浓度的ET-1以及同时加入SDF-1α处理6-10B细胞,趋化实验检测ET-1对6-10B细胞迁徙能力的影响。分别采用Real-time PCR以及Western Blot方法检测ET-1上调后CXCR4在基因以及蛋白水平的变化。Western Blot方法检测用特异性的ETAR抑制剂或者PI3K/AKT/mTOR或MARK1/ERK1/2抑制剂预处理6-10细胞后,ET-1对CXCR4表达水平的变化;并探讨ET-1处理后,PI3K/AKT/mTOR以及MARK1/ERK1/2信号通路中蛋白磷酸化水平的改变。【结果】趋化实验显示6-10B细胞丧失对SDF-1α的趋化能力,但不同浓度的ET-1刺激后6-10B细胞对SDF-1α的迁徙能力明显增强(P<0.05),10 nmol/L ET-1的作用最明显。Real-time PCR以及Western Blot结果显示,不同浓度的ET-1处理6-10B细胞后,ET-1在基因以及蛋白的水平可以呈剂量依赖性及时间依赖性地上调CXCR4的表达。用特异性的内皮素受体A(ETAR)抑制剂或者PI3K/AKT/mTOR或MARK1/ERK1/2通路的抑制剂,能够明显抑制ET-1对CXCR4表达的上调。Western blot检测显示ET-1能激活PI3K/AKT/mTOR及MAPK1/ERK1/2信号通路。【结论】ET-1能上调6-10B细胞功能性CXCR4的mRNA和蛋白表达,并能明显增强6-10B细胞对SDF-1α的迁徙能力。CXCR4的上调主要是通过ETAR介导,激活PI3K/AKT/mTOR和MAPK1/ERK1/2信号通路。
- 麦海强徐理华刘怀莫浩元黄培钰唐林泉陈秋燕
- 关键词：鼻咽癌ET-1CXCR4迁徙
- Bmi-1诱导p16阳性的乳腺上皮细胞永生化及其机制
- Bmi-1(B-cell-specific moloney leukemia virus insert site 1)基因为一种属于PcG(Polycomb group)家族成员的致癌基因，1991年在鼠淋巴瘤中被发现，...
- 徐理华
- 关键词：原代培养永生化MSP
- 文献传递
- 癌基因Bmi-1引起中心体扩增的可能机制被引量：3
- 2008年
- 【目的】探讨Bmi-1引起中心体扩增的可能机制。【方法】体外建立Bmi-1稳定高表达和Bmi-1-RNAi稳定起作用的细胞株,采用免疫荧光染色法计数中心体(Microtub)异常复制的比率及定位细胞周期素蛋白D1(cyclinD1)和P27的表达,同时进行Westernblot检测cyclinD1和p27在核中的表达量。【结果】Microtub染色计数发现与对照细胞相比,中心体异常复制的比率在6-10B/Bmi-1细胞中升高,而在CNE2/Bmi-1-RNAi细胞中下降;免疫荧光染色和Westernblot检测均发现cyclinD1蛋白在6-10B/Bmi-1细胞核内表达升高,而在CNE2/Bmi-1-RNAi细胞核内表达降低,P27蛋白则在两株细胞株中均呈现相反的变化。【结论】Bmi-1可能通过调控cyclinD1-P27途径引起中心体扩增。
- 翁桂香徐理华冯艳俞春萍宋立兵李隽曾木圣张玲
- 关键词：癌基因BMI-1中心体扩增基因表达
- Cetuximab联合电离辐射抑制鼻咽癌细胞表皮生长因子受体磷酸化被引量：1
- 2010年
- 目的探讨Cetuximab联合电离辐射对鼻咽癌细胞表皮生长因子受体(EGFR)及其磷酸化形式(p-EGFR)的影响。方法采用Western blot法分别检测鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2在不同剂量电离辐射联合不同浓度Cetuximab作用48 h后细胞株EGFR及p-EGFR蛋白的表达。结果不同浓度的Cetuximab联合不同剂量的电离辐射作用于鼻咽癌细胞株CNE1及CNE2后,EGFR蛋白表达无明显变化;随着Cetuximab浓度的增加,p-EGFR蛋白表达逐步下降;且Cetuximab浓度不变时,辐射剂量的增加,p-EGFR蛋白表达逐渐下降,至Cetuximab浓度为5μg/mL同时放射剂量为4 Gy时,几乎无p-EGFR蛋白表达。结论 Cetuximab联合电离辐射主要是抑制鼻咽癌细胞株EGFR磷酸化,降低p-EGFR蛋白水平,且呈剂量相关性,而对EGFR蛋白本身表达并无影响。
- 袁太泽孔庆丽曾木圣徐理华曹素梅郭翔张秀萍
- 关键词：鼻咽肿瘤表皮生长因子受体电离辐射CETUXIMAB
