- Ⅰ型Na^+/H^+交换器在LPS引起的大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的作用
- 2006年
- 目的探索Ⅰ型Na+/H+交换器(NHE1)在脂多糖(LPS)引起的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤中的作用。方法培养大鼠PMVECs。MTT比色试验检测细胞活力;比色法测试上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力和丙二醛(MDA)浓度;BECEF-AM荧光探针染色细胞,激光共聚焦显微镜下观察细胞内酸碱度,检测NHE1的活性;PT-PCR技术检测NHE1的mRNA表达。结果LPS不仅使细胞活力降低35%(P<0.05),使上清液中LDH和MDA分别升高3倍和2.5倍(P<0.05),而且使NHE1的活性增强,mRNA表达增多(P<0.05)。但是NHE1的抑制剂———环己阿米洛利(HMA)能显著抑制LPS引起的这些变化(P<0.05)。结论NHE1的活性增强和表达增多是LPS引起大鼠PMVECs损伤的重要机制。
- 李志斌李志超闫志强彭利静张齐
- 关键词：脂多糖肺微血管内皮细胞
- rho激酶在缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用
- 研究背景：肺动脉高压是肺循环障碍和肺功能异常性疾病的常见表现，是肺心病发病机制的中心环节。急性和慢性低氧均可导致缺氧性肺动脉高压，其中肺血管收缩反应增强和肺血管结构改建是其主要血管变化特征。肺动脉平滑肌细胞(pasmc)...
- 张齐
- 关键词：慢性缺氧平滑肌细胞细胞增殖RHO激酶CGRP病理生理
- 文献传递网络资源链接
- 慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织P53表达增高被引量：7
- 2006年
- 目的观察P53在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达。方法采用减压低氧方法复制大鼠慢性低氧性肺动脉高压模型;取肺组织,常规SABC免疫组化法染色和Hoechst染色,观察P53表达的变化及细胞凋亡变化。结果P53在慢性肺动脉高压大鼠肺小动脉壁中有少量表达,其中低氧3周组>低氧2周组>正常组。Hoechst染色显示肺组织凋亡细胞增加,其变化趋势与P53的表达变化趋势相同。结论在慢性低氧性肺动脉高压形成过程中,肺小动脉壁发生了增殖和凋亡,程度随低氧时间的延长而增加,同时P53表达增多,提示P53参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小血管重建的调控。
- 彭利静李志超李伟张博刘毅张齐罗颖
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌P53
- 心房钠尿肽对肺泡Ⅱ型上皮细胞的保护作用被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨心房钠尿肽(ANP)对脂多糖(LPS)引起肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)损伤的治疗作用。方法:分离培养AT-Ⅱ,以LPS复制大鼠AT-Ⅱ损伤模型,分别给予10-6、10-7、10-8mol/L等不同剂量的ANP进行治疗,通过观察4h、12h、24h等时点细胞培养上清液中LDH、MDA、AKP、总磷脂(TPL)水平及细胞培养上清液的表面张力(ST)变化,研究ANP对LPS引起的AT-Ⅱ损伤的治疗作用。结果:在不同剂量、不同时点条件下,各ANP组细胞培养上清液LDH、AKP活性及MDA含量均明显低于LPS组,呈明显的剂量依赖性和时间依赖性,以高剂量组(10-6)和12h时点疗效最佳。以12h时点为例,细胞培养上清液中AKP活性为:control(43.5±10.4)U/L,LPS(98.1±16.4)U/L,LPS+ANP(10-6)(46.4±10.5)U/L,LPS+ANP(10-7)(60.7±9.5)U/L,LPS+ANP(10-8)(91.3±13.9)U/L。LPS组细胞培养上清液中TPL含量明显低于对照组、ST水平明显高于对照组,不同剂量、不同时点的各ANP组细胞培养上清液中TPL含量均不同程度地高于对应的LPS组,各ANP组细胞培养上清液中的ST水平均低于对应的LPS组。结论:ANP可显著减轻LPS引起的AT-Ⅱ损伤,促进肺表面活性物质(PS)的合成、分泌,且该作用有明显的剂量依赖性和时间依赖性。
- 闫志强魏敏李志超李志斌刘毅张博张齐彭利静罗颖
- 关键词：心钠素呼吸窘迫综合征肺泡
- Rho激酶在缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用被引量：7
- 2006年
- 目的研究低氧条件下Rho激酶是否参与低氧引起的血管平滑肌细胞增生。方法组织块法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)。应用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法观察细胞增生情况;流式细胞仪观察细胞周期的变化;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Rho激酶的表达。结果缺氧组MTT比色吸光度(A)值显著高于常氧组,缺氧24h+Rho激酶抑制剂Y27632组A值显著低于缺氧24h组;缺氧组细胞周期G2/M期细胞比例显著高于常氧24h组,缺氧24h+Y27632组细胞比例显著低于缺氧24h组。Westernblot结果表明各缺氧组Rho激酶表达均明显高于常氧组,其中以缺氧24h组表达增高最明显;Rho激酶在缺氧24h+Y27632组明显低于缺氧24h组。结论缺氧可诱导PASMCs增殖,缺氧诱导的增生PASMCs中Rho激酶活性水平增加,提示缺氧致PASMCs增殖过程中Rho激酶可能发挥重要作用。
- 张齐李志超罗颖彭利静张博刘毅闫志强李志斌
- 关键词：缺氧肺动脉平滑肌细胞细胞增殖RHO激酶
- VEGF和PCNA在慢性低氧性肺动脉及高压大鼠主动脉、肺动脉平滑肌细胞中表达被引量：10
- 2006年
- 目的研究慢性低氧性肺动脉高压(PAH)发生过程中,血管内皮生长因子(VEGF)及细胞核增殖抗原(PCNA)在体循环血管、肺循环血管平滑肌细胞中的表达。方法利用低压缺氧舱建立大鼠缺氧性肺动脉高压模型。实验分为3组即正常氧组、缺氧2wk组和缺氧3wk组。用免疫组化染色和图像分析,检测主动脉、肺动脉主干及肺内小动脉平滑肌细胞中VEGF及PCNA的表达量。结果VEGF在正常氧组大鼠的主动脉、肺动脉主干及肺内小动脉平滑肌内均有表达;缺氧组大鼠肺动脉主干及肺内小动脉平滑肌细胞内VEGF的表达明显增强并随着缺氧时间的延长而增加;主动脉平滑肌内VEGF的表达量无明显变化。PCNA在正常氧组大鼠的主动脉、肺动脉主干及肺内小动脉平滑肌内均有微弱表达;但缺氧时只有肺小动脉平滑肌内其表达量增加;主动脉、肺动脉主干平滑肌内PCNA的表达量无明显差别。结论在缺氧性肺动脉高压的发生过程中,VEGF在体循环血管、肺循环血管平滑肌细胞中的表达量具有差异性,提示其可能在肺动脉高压形成过程中起重要作用。
- 罗颖李志超张齐张博刘毅彭利静宋祖军
- 关键词：低氧VEGF
- Na^+/H^+交换抑制剂HMA抑制低氧刺激的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖
- 2006年
- 目的:观察低氧培养对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响,以及Na+/H+交换抑制剂HMA对此增殖效应的抑制作用。方法:实验于2004-12/2005-06在第四军医大学病理生理学教研室完成。健康SD大鼠2只,分离培养肺动脉平滑肌细胞,选择3～6代生长良好的细胞在常氧(O2的体积分数为0.21)或低氧(O2的体积分数为0.02)条件下培养,并分别给予0.3,1,3和10μmol/L等不同浓度的HMA(n=8),采用噻唑蓝比色实验和测定细胞总蛋白含量的方法观察细胞增殖情况,同时光镜观察细胞形态并测定培养液上清乳酸脱氢酶活力以反映药物的非特异性细胞毒作用。结果:实验所用细胞样本均进入结果分析。①体积分数为0.02氧浓度较体积分数为0.05氧浓度下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞生长曲线抬高,低氧刺激24h增殖达到高峰。②体积分数为0.05血清培养使此增殖效应更为显著[噻唑蓝光吸收值无血清常氧组(0.238±0.011),无血清低氧组(0.280±0.009),体积分数为0.05血清常氧组(0.313±0.013),体积分数为0.05血清低氧组(0.389±0.011)]。③HMA可以抑制增殖,显著降低噻唑蓝吸光度值[对照组(0.391±0.011),0.3μmol/L组(0.377±0.010),1μmol/L组(0.328±0.012),3μmol/L组(0.289±0.006),10μmol/L组(0.246±0.007)]。④细胞总蛋白含量也显著降低[对照组、0.3μmol/L组、1μmol/L组、3μmol/L组、10μmol/L组分别为(193.30±8.51),(177.63±8.71),(166.84±9.48),(155.72±10.46)和(135.13±10.30)μmol/L]。⑤各浓度处理组细胞形态无改变,培养液上清乳酸脱氢酶活力也无明显变化[对照组、0.3μmol/L组、1μmol/L组、3μmol/L组、10μmol/L组分别为(212.23±8.44),(208.80±6.37),(209.79±7.12),(208.77±7.33),(215.42±7.81)U/L],细胞无明显损伤。结论:0.3～10μmol/L浓度的Na+/H+交换抑制剂HMA可以有效抑制低氧刺激的大鼠肺动脉平滑肌增殖,此作用不是非特异的细胞毒作用所致。
- 刘毅宋祖军李志超张博罗颖彭利静张齐
- 关键词：细胞低氧肌细胞平滑肌
- 慢性低氧对大鼠主动脉与肺动脉平滑肌细胞增殖影响的差异性被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨在整体和细胞水平下慢性低氧对大鼠主动脉及肺动脉平滑肌细胞增殖性是否有影响及其差异性。方法:分别采用整体慢性低氧模型复制及细胞培养的方法获得实验对象,整体动物上分为正常对照组和低氧3周组;细胞水平分为正常对照组及低氧24h组。分别采取HE染色,免疫组化法和图像分析的方法检测主动脉、肺内小动脉及培养的平滑肌细胞中PCNA的表达和含量的变化。MTT测细胞增殖情况。结果:正常组整体及细胞水平下PCNA在主动脉、肺内小动脉平滑肌细胞内均有微弱表达,整体实验低氧时只有肺内小动脉平滑肌细胞内其表达有增强,主动脉平滑肌细胞内PCNA的表达无明显差别。细胞低氧24h组PCNA表达明显增强,主、肺动脉平滑肌细胞之间无明显差别。结论:大鼠的主、肺动脉平滑肌细胞对慢性低氧的反应在整体水平和细胞水平是有差异的。
- 罗颖李志超张齐
- 关键词：细胞低氧
- Rho激酶在缺氧性肺动脉平滑肌细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖及其中Rho激酶表达的影响。方法:分别在常氧和缺氧12、24和48 h条件下体外培养大鼠PASMC,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术测定细胞周期,同时用蛋白印迹杂交(W estern b lot)检测Rho激酶的表达情况。结果:PASMC比色吸光度A值缺氧12 h增大,24 h最高,48 h下降但仍高于常氧对照组;流式细胞术分析细胞周期,G2/M期细胞缺氧组均显著高于常氧组;W estern b lot结果分析各缺氧组Rho激酶表达明显高于常氧组。结论:缺氧诱导PASMC增殖,促使细胞进入有丝分裂期,同时,Rho激酶表达的增强可能是缺氧诱导PASMC增殖的重要机制之一。
- 张齐李志超罗颖彭利静张博刘毅闫志强李志斌宋祖军
- 关键词：缺氧肺动脉平滑肌细胞RHO激酶
- 慢性低氧性肺动脉高压大鼠体内血管活性物质表达的变化及意义被引量：4
- 2006年
- 目的:观察慢性低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠血浆中心房钠尿肽(ANP)和降钙素基因相关肽(CGRP)的表达变化.方法:用低压、低氧的方法复制大鼠慢性HPH模型,放射免疫法检测血浆中血管活性物质ANP和CGRP表达的变化.结果:慢性HPH大鼠血浆中血管活性物质ANP和CGRP的表达均发生了变化,呈现先降低后增高的表现,即低氧3wk>正常>低氧2wk.结论:在慢性HPH形成过程中,随着肺小动脉壁的增厚,血浆中血管活性物质ANP和CGRP的表达先降低后增高.其变化可能与慢性HPH过程中肺动脉压升高和肺小动脉壁的结构重建有一定关系.
- 彭利静李志超李伟李志斌闫志强张齐刘毅罗颖
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌心房钠尿肽降钙素基因相关肽
