张玉梅 作品数:44 被引量:144 H指数:6 供职机构: 滨州医学院 更多>> 发文基金: 山东省高等学校科技计划项目 山东省自然科学基金 山东省医药卫生科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 农业科学 更多>>
与细菌抗原检测相关的虚拟仿真综合实验建设与应用 2023年 目的 设计与细菌抗原检测相关的虚拟仿真综合实验,评估其在临床医学专业本科教学中的应用效果。方法 以细菌抗原与抗体特异免疫反应为核心内容,把细菌分离培养、细菌O抗原和H抗原制备、玻片凝集与肥达试验融合为一个虚拟仿真综合实验。对照组采用传统实验教学模式,实验组采用传统实验操作与虚拟仿真综合实验相结合的教学模式,通过问卷调查和病原知识小测试比较两组教学效果。结果 两组各项指标比较存在差异,实验组高于对照组(P<0.05)。结论 虚拟仿真综合实验有利于学生系统掌握病原生物学、免疫学相关知识,加深对细菌生物学特性的理解,增强解决临床问题的能力。 张珍 乔媛媛 季晓飞 张玉梅 杜镇镇关键词:病原生物学 免疫学 细粒棘球蚴感染小鼠腹腔巨噬细胞表型及吞噬功能的变化 被引量:3 2016年 目的 研究细粒棘球蚴感染小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)的表型及吞噬功能变化,探索Mφ在宿主应答寄生虫感染中的作用。 方法 将24只6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和感染组,每组12只。感染组每只小鼠腹腔注射2 000个原头节。对照组注射等体积PBS。于感染后5个月,收集对照组和感染组小鼠腹腔单核细胞,采用流式细胞术检测Mφ比例及其表面分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达情况;采用中性红吞噬实验检测Mφ密度为1×10^6、5×10^5、1×10^5时的吸光度(A490值),评价其吞噬能力。 结果 对照组和感染组Mφ占单核细胞的比例分别为(20.75±5.91)%和(30.40±3.15)%,感染组高于对照组(P〈0.05)。感染组Mφ表面表达CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的比例分别为(45.33±5.51)%、(61.00±10.61)%、(56.88±10.66)%和(27.00±3.82)%,较对照组的(41.43±6.19)%、(59.23±8.65)%、(10.91±1.82)%和(13.67±3.01)%均明显升高(P〈0.05)。感染组Mφ密度为1×10^6、5×10^5、1×10^5时的A490值分别为0.41±0.03、0.24±0.05和0.16±0.01,低于对照组的0.61±0.15、0.47±0.07和0.18±0.01,差异均有统计学意义(P〈0.01)。 结论 感染致小鼠腹腔Mφ吞噬能力下降,但其活化相关表面分子表达上调。 潘伟 张玉梅 孙芬芬 曹建平 沈玉娟关键词:细粒棘球绦虫 原头节 巨噬细胞 表型 分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析 被引量:2 2016年 目的检测并分析幽门螺杆菌(Hp)尿素酶β亚基(UreB)与Hsp60之间的相互作用。方法克隆Hp 26695的尿素酶β亚基基因(UreB)融合GST标签和Hsp60基因融合His标签,分别在大肠埃希菌中进行异源表达。提取两种蛋白,采用pull-down方法检测两者间的相互作用。利用Modeller 9v2软件,以E.coli的GroEL为基础模建Hp Hsp60的三维结构,再与已知的UreB结构利用AutoDock 4.2软件进行分子共模拟,分析二者的相互作用面和关键氨基酸。结果构建了Hp Hsp60和尿素酶β亚基(UreB)的大肠埃希菌异源表达体系并获得纯化蛋白;Pull-down试验显示部分未融合GST标签的Hsp60出现在GST-UreB的洗脱液中,表明Hsp60与GST-UreB之间存在相互作用;以E.coli的GroEL为基础模建了Hp Hsp60的三维结构,利用docking技术构建UreB与Hp Hsp60的相互作用模型,发现其主要的相互作用面位于Hsp60的α9与UreB的α2之间,其可能形成氢键的关键位点为UreB的α2上的T147氨基酸与Hsp60的α9上的E237、K238。结论 Hp Hsp60能直接与尿素酶β亚基(UreB)相互作用,Hsp60可能通过这种相互作用在UreB成熟过程中发挥分子伴侣功能。这为阐明Hp尿素酶的组装与成熟机制奠定了基础。 赵慧琳 季晓飞 张艳丽 柏雪莲 李娇娇 陈醒醒 张玉梅 李波清关键词:幽门螺杆菌 尿素酶 HSP60 分子伴侣 相互作用 糖尿病患者肠道定植肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征 2023年 目的 了解糖尿病患者肠道肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)定植率、耐药性以及分子流行病学特征。方法收集烟台某医院内分泌科就诊的糖尿病患者粪便,分离培养和鉴定KP,使用拉丝试验测定其黏液表型,使用K-B纸片扩散法测定其耐药性,通过全基因组测序分析其荚膜血清型、毒力基因和多位点序列分型。结果 收集145份糖尿病患者的粪便标本,检出50株KP,检出率为34.48%,检出率在性别、糖尿病病程长短、血糖控制方面差异均无统计学意义。50株KP中高黏液表型菌株18株。检出的KP菌株对大部分常用抗生素耐药率较低。50株KP分析出26种血清型,其中K1血清型(20.00%,10/50)占比最高。K1血清型在高黏液表型KP中的比例(44.44%,8/18)明显高于非高黏液表型KP(6.25%,2/32)。高黏液表型KP在毒力基因all、arc、clb、fdr、fyu、glc、glx、hyi、iro、irp、iuc、iut、mce、rmpA、rmpA2、ybb、ybt和ylb的携带率高于非高黏液表型KP。多位点序列分型中分析出34种ST型,ST23检出率最高(14.00%,7/50),且均为K1血清型。结论 烟台地区糖尿病患者肠道中肺炎克雷伯菌当前定植率较高,耐药率较低,高黏液表型KP携带更多的毒力基因,K1-ST23菌株已初步占优势。 薛兆平 伊茂礼 徐卫皓 张玉梅关键词:糖尿病 肺炎克雷伯菌 耐药性 分子流行病学 临床腹泻患者贾第虫感染和分子特征研究 被引量:10 2015年 目的初步了解临床腹泻患者贾第虫的感染情况及分子特征。方法以2014年5-7月上海市某医院临床腹泻患者为研究对象,收集粪便样本95份,进行卢戈氏碘液染色,用光学显微镜检查贾第虫包囊。采用巢式PCR法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(tpi),扩增产物测序后用BLAST、Clustal X 1.83和MEGA6.0软件进行同源性和系统发育分析。结果形态学观察发现1例腹泻患者感染贾第虫,阳性检出率为1.05%。其粪便样本经卢戈氏碘液染色后显微镜下可见清晰的包囊。对样本进行PCR检测,扩增片段大小约为530 bp,测序结果显示为贾第虫。经序列比对分析,并以tpi基因构建系统发育树,分析鉴定该分离株为集聚体B,与已报道的人源贾第虫分离株(KF271445)同源性为100%。结论临床腹泻患者中存在贾第虫感染,本研究结果可为了解贾第虫基因型特点及贾第虫病流行病学研究提供参考。 刘华 沈玉娟 张玉梅 王斌 刘晖 曹建平关键词:腹泻 贾第虫 形态学 分子特征 巢式PCR 系统进化树 CRM197修饰的肿瘤细胞裂解物疫苗抗肝癌作用研究 2015年 [目的]探讨CRM197能否增强H22肝癌细胞裂解物疫苗的抗肿瘤活性。[方法]反复冻融H22细胞制备裂解物,与CRM197偶联,制备H22-CRM197疫苗,以小鼠皮下移植瘤模型考察疫苗抗肿瘤活性,并对免疫学机制进行探讨。[结果]与PBS组相比,H22-CRM197免疫显著降低了荷瘤小鼠肿瘤重量(0.53±0.20 g VS 2.04±0.43 g,p<0.01);与PBS组比较,H22-CRM197组小鼠免疫血清中检测到高滴度的抗-H22抗体(p<0.01);H22-CRM197免疫能够有效地刺激脾淋巴细胞的增殖并诱导产生了明显靶向H22细胞的细胞毒性T淋巴细胞杀伤作用。[结论]CRM197可以显著增强H22肝癌细胞裂解物疫苗的抗肿瘤活性。 张艳丽 司春枫 张玉梅 赵慧琳 徐茂磊 李波清关键词:肝癌 Ipr1对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染免疫相关基因表达的影响 被引量:2 2011年 目的应用基因芯片技术检测Ipr1的表达对巨噬细胞感染分枝杆菌H37Ra后参与免疫应答的相关基因的表达差异。方法实验组与对照组细胞分别感染分枝杆菌H37Ra,基因芯片检测实验组和对照组细胞感染H37Ra 96h后免疫相关基因表达差异。定量PCR反应检测芯片结果中上调的3个基因的表达差异用以验证芯片结果的可靠性。结果基因芯片检测结果显示Ipr1基因的表达上调了11个固有免疫机制中相关基因表达,其中与MΦ抗Mtb感染关系密切的基因有:TLR2、TLR4I、rak1、Traf6、Ifngr1、Tnfrsf1a,而参与调节适应性免疫应答的相关基因如:IL-1,IL-12无明显表达差异。结论 Ipr1增强MΦ抗Mtb感染的机制可能主要是通过上调MΦ抗感染固有免疫机制的有关基因的表达从而发挥抗菌作用。本实验为进一步研究Ipr1促进MΦ的活化及杀伤胞内吞噬的Mtb的作用机制奠定了基础。 李娜 刘鹏飞 李波清 乔媛媛 张玉梅关键词:结核分枝杆菌 巨噬细胞 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及耐药性研究 2012年 目的研究滨州某医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因型分布特点及耐药状况。方法应用多重聚合酶链式反应(PCR)技术对临床分离的65株MRSA进行SCCmec基因分型;普通PCR对MRSA进行4种耐药基因扩增;应用K-B纸片扩散法对19种抗生素进行药敏试验。结果 SCCmec分型显示58株为SCCmecⅢ型的MRSA;5株为Ⅱ型;另外2株不能分型。65株MRSA临床株对多种抗生素均耐药。4种耐药基因的阳性率分别为aac(6')/aph(2″)93.85%,aph(3')Ⅲ为52.31%,tetM基因的阳性率为92.31%,ant(4')为9.23%。结论研究结果显示医院分离的MRSA对氨基糖苷类、四环素类耐药基因有较高的携带率,且具有多重耐药的特征,SCCmec基因型以Ⅲ型为主,多重PCR法可以有效的用于临床分离的MRSA的SCCmec分型研究。 王爱玲 纪冰 刘永云 王健 安帅 张玉梅关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 华支睾吸虫parkin蛋白的分子生物学特征研究 被引量:3 2016年 目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsParkin,纯化后免疫Blab/c小鼠,获得多克隆抗体,采用Western blot鉴定天然CsParkin;采用qRT-PCR测定CsParkin基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsParkin蛋白含有5个结构域,分别是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白结构;该蛋白与人及各种动物的Parkin有很高的相似度,与其他吸虫有更近的进化关系;Western blot显示原核表达的重组CsParkin,与天然CsParkin分子质量相同,均为45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表达量高于成虫;免疫组化显示CsParkin主要分布于成虫受精囊中的精子及口吸盘和睾丸,在囊蚴中广泛分布。结论肝吸虫CsParkin属蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素连接酶3的功能结构,推测其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在华支睾吸虫的生长过程中发挥作用。 柏雪莲 李波清 张玉梅 张艳丽 耿丽 杜镇镇 赵慧琳关键词:华支睾吸虫 PARKIN 泛素连接酶 电子显微镜观察抗菌肽抗菌机理 被引量:2 2010年 电子显微镜观察正常生长的大肠杆菌在受到抗菌肽作用后,在不同时间里,被作用的大肠杆菌形态有很大的差异.大肠杆菌被抗菌肽作用30 min后在形态上看不到明显的变化,而作用过夜后(约12 h)细菌内部电子密度增强,质壁出现分离,细胞壁出现空泡并且界限模糊.作用16 h以上电子密度进一步增强,细菌走向老化死亡趋势.说明抗菌肽使细菌细胞膜的通透性发生了改变. 乔媛媛 曹卫友 张玉梅 李娜 彭建新关键词:离体细胞 抗菌肽 SDS PAGE 电子显微镜