张淑香 作品数:14 被引量:32 H指数:4 供职机构: 华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室 更多>> 发文基金: 上海市高等学校青年科学基金 上海市青年科技启明星计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 理学 医药卫生 更多>>
底物限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响 被引量:1 2003年 考察了葡萄糖或谷氨酰胺限制的批培养中杂交瘤细胞的生长、代谢和单抗生成。葡萄糖或谷氨酰胺限制时最大活细胞密度基本相同,为(1.0±0.1)×106cells/mL。葡萄糖限制时,乳酸生成减少,YLac/Glc降低,YCell/Glc增加,提示葡萄糖更多地参与三羧酸循环。谷氨酰胺限制时,氨和丙氨酸生成减少,YAmm/Gln增加,YAla/Gln减小,提示谷氨酰胺的能量利用率提高。谷氨酰胺缺失时异亮氨酸、亮氨酸、胱氨酸、缬氨酸、色氨酸、组氨酸等替代谷氨酰胺,维持细胞生长和单抗合成,产物是甘氨酸和天冬氨酸。单抗生成与细胞生长关联,并且细胞停止生长后单抗仍生成。细胞死亡阶段的qMAb约是生长阶段的一半。葡萄糖和谷氨酰胺共限制下细胞对单抗的生产能力比葡萄糖和谷氨酰胺单独限制时小。 张淑香 李东晓 朱明龙 谭文松 张嗣良关键词:杂交瘤细胞 细胞生长 代谢 葡萄糖限制的流加培养中杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成 2003年 研究了葡萄糖限制的流加培养和批培养中杂交瘤细胞的生长、代谢和单抗生成。与批培养相比,流加培养的培养周期长,细胞密度、单抗浓度高。随着葡萄糖浓度的下降,葡萄糖比消耗速率和乳酸比生成速率也下降,葡萄糖转化成乳酸的比例从60%~70%下降到0,葡萄糖更多地参与三羧酸循环,提高了葡萄糖的有效利用率和ATP的生成效率。 张淑香 李东晓 朱明龙 谭文松 张嗣良关键词:流加培养 杂交瘤细胞 代谢 谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生产的影响 被引量:8 2008年 利用批培养和流加培养方式以及不同的流加培养成分,考察了谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响。谷氨酰胺限制降低了最大细胞密度和单抗比生产速率,说明谷氨酰胺限制阻碍了细胞生长和单抗生产。谷氨酰胺限制流加培养的YLac/Gluc和YLac/Cells高于批培养和谷氨酰胺非限制流加培养的,说明谷氨酰胺限制促进了葡萄糖向乳酸的生成,增强了葡萄糖的溢流代谢。与批培养和谷氨酰胺非限制流加培养相比,谷氨酰胺限制流加培养的氨和丙氨酸浓度及其比生成速率较低,而且YAmm/Gln高,YAla/Gln和YAla/Cells低,说明谷氨酰胺限制使得较多的谷氨酰胺参与脱氢反应,提高了谷氨酰胺的利用率,降低了细胞对氨和丙氨酸的生成,从而削弱了氨对细胞生长和单抗生产的毒害。在流加培养中应严格控制谷氨酰胺的流加浓度及与葡萄糖的配比,要避免谷氨酰胺过分限制导致的葡萄糖溢流代谢和对细胞生长和单抗产率的不利效应。 张淑香 李东晓 朱明龙 谭文松 张嗣良关键词:流加培养 杂交瘤细胞 葡萄糖 锥底生物反应器的动物细胞培养 被引量:4 2008年 宫颈癌细胞(HELA)、人胚肾细胞(HEK293)和中华仓鼠卵巢细胞(CHO)3种细胞系在用于哺乳动物细胞悬浮培养的锥底生物反应器(FCB)、平底生物反应器(FB)和常规机械搅拌式生物反应器(STR)中进行培养和冷模实验。结果表明:FCB中HELA细胞的最高密度比FB高27%,HEK293和CHO细胞的最高密度分别比STR高38%和43%。FCB的混合时间平均比FB短27%,比STR长35%;kLa比FB和STR分别高83%和97%。 白力 张淑香 唐寅 郭美锦 张嗣良关键词:生物反应器 氧传递系数 葡萄糖和谷氨酰胺浓度对杂交瘤细胞生长代谢的影响 被引量:4 2003年 在生物反应器的批培养过程中考察了葡萄糖及谷氨酰胺浓度对杂交瘤细胞生长及代谢的影响。当葡萄糖浓度降至1~4mmol/L,谷氨酰胺浓度降至0.4~2mmol/L时,细胞生长并未受到明显影响,但细胞代谢途径发生转换,乳酸及氨的生成显著减少。葡萄糖和谷氨酰胺浓度的比例对杂交瘤细胞的生长及代谢也有影响,葡萄糖相对较多时,其细胞得率小,乳酸得率大;而当谷氨酰胺相对较多时,其细胞得率小,氨得率大。实验结果表明谷氨酰胺与葡萄糖的能量代谢在某种程度上可进行相互补充。 李东晓 张淑香 朱明龙 周燕 谭文松关键词:杂交瘤细胞 葡萄糖 谷氨酰胺 代谢调控 流加培养过程中杂交瘤细胞的摄氧率与生长代谢之间的关联 2012年 摄氧率(OUR)不仅易于在线检测而且可以快速反映细胞的物质和能量代谢状况。为此,利用2 L B.Braun反应器的恒速流加培养工艺,考察了杂交瘤细胞的摄氧率与生长、代谢之间的关系。OUR与活细胞密度成良好的正相关性,但由于氧比消耗速率不是常数,所以二者不呈线性关系,从而利用OUR只能估测,而不能准确计算细胞密度。随着葡萄糖浓度降至低水平,氧比消耗速率、ATP比生成速率下降,而氧与葡萄糖的消耗计量比、细胞对氧的消耗逐增,由氧化磷酸化生成的ATP比例上升,说明葡萄糖代谢途径逐渐从糖酵解途径迁移到三羧酸循环,被氧化程度提高,能量利用率增强。 张淑香 谭文松 张嗣良关键词:流加培养 细胞生长 能量代谢 杂交瘤细胞的无血清低蛋白培养 被引量:1 2003年 实现了杂交瘤细胞的体外无血清低蛋白培养。考察了血清浓度、基础培养基和接种密度对细胞生长的影响。在含5%血清培养基、1%血清培养基和无血清低蛋白培养基中适应生长的细胞,μ分别为0.68、0.45、0.44d-1,qGlc分别为13.4×10-9、13.1×10-9、19.2×10-9mmol/(cell·分别为39.4×10-9、44.1×10-9、37.7×10-9mg/(cell·d),YMAb/Xv分别为52.6×10-9、d),qMAb57.8×10-9、54.4×10-9mg/cell,YLac/Glc分别为2.0、1.95、2.0mmol/mmol。无血清培养中葡萄糖代谢途径不变,参与细胞维持代谢的葡萄糖比例增大。血清浓度降低,延迟期变长,最大活细胞密度下降。基础培养基影响细胞的最大活细胞密度,不影响生长速率。无血清培养基中细胞的接种密度选择在0.2×106~0.3×106cells/mL。 张淑香 李东晓 朱明龙 谭文松 张嗣良关键词:杂交瘤细胞 比生长速率 代谢 小鼠睾丸支持细胞体外培养特性 2009年 支持细胞是睾丸的重要组成部分,其主要功能是为生精细胞提供适宜的生长环境。从幼鼠睾丸中分离得到支持细胞,并通过苏木精-伊红和Fas-L免疫组化染色对分离得到的细胞进行了鉴定。通过对原代小鼠睾丸支持细胞的贴壁、生长和培养液中葡萄糖、谷氨酰胺、氨基酸等营养底物及其副产物乳酸、铵根离子等的代谢以及培养液渗透压和pH的研究,发现支持细胞的贴壁时间主要集中在接种后2~4h;当培养液中氨根离子浓度高于2.3mmol/L,渗透压高于326mosm/kg,pH≤6.8时支持细胞生长进入衰亡期;在氨基酸代谢方面,发现培养过程中丙氨酸和谷氨酸浓度迅速增加,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸浓度略有降低,丝氨酸、精氨酸和甘氨酸浓度基本保持不变。因此培养液中铵根离子浓度的过量积累、渗透压和pH的异常和贴壁面积不足是限制支持细胞静态生长的主要因素。研究结果为支持细胞大规模培养及工艺优化奠定了基础。 师冰洋 张淑香 郭美锦 王永红 张嗣良 史小林关键词:支持细胞 体外培养 AQC柱前衍生高效液相色谱法测定动物细胞培养基中氨基酸 被引量:2 2007年 以α-氨基丁酸为内标,6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生试剂,用高效Nova-PakC18柱,乙酸钠溶液(pH5.70)和60%乙腈为流动相,采用二元梯度洗脱,紫外检测器在248nm波长检测,建立了一种新的柱前衍生反相HPLC法同时测定动物细胞培养基中谷氨酰胺在内19种氨基酸。方法重现性好,精密度高。氨基酸的峰面积—浓度线性范围为20~500μmol/L,线性相关系数均大于0.99,峰面积的精密度为1.55~10.8%。在该色谱条件下获得了良好的商用细胞培养基DMEM和F12中氨基酸的色谱图,为动物细胞生长代谢研究提供了有利的实验手段。 张淑香 谭文松 张嗣良关键词:柱前衍生 动物细胞 培养基 杂交瘤细胞流加培养中葡萄糖和谷氨酰胺的代谢控制 被引量:5 2004年 对底物限制的流加培养中杂交瘤细胞HB 5 8的生长、代谢和单抗生成进行了研究。葡萄糖或谷氨酰胺限制引起比生长速率下降。葡萄糖限制时 ,乳酸生成减少 ,细胞对葡萄糖的得率增加 ,乳酸对葡萄糖的得率降低 ,说明葡萄糖更多地参与三羧酸循环。谷氨酰胺限制时 ,氨和丙氨酸生成减少 ,细胞和氨对谷氨酰胺的得率增加 ,丙氨酸对谷氨酰胺的得率减小 ,说明谷氨酰胺更多地参与脱氢反应 ,其有效利用率得到提高。 张淑香 李东晓 朱明龙 周燕 谭文松 张嗣良关键词:杂交瘤细胞 流加培养