廖玮
- 作品数：13 被引量：17H指数：3
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学自动化与计算机技术理学一般工业技术更多>>
- 蛋白质微阵列SPR实时相位检测被引量：5
- 2005年
- 将表面等离子体共振(surfaceplasmonresonance,SPR)与空间相位调制检测结合,用一束准直的平行光照射传感芯片,在反射光路中引入渥拉斯顿棱镜,使光束中的p光和s光产生偏振光干涉形成条纹,生化反应的有关信息从干涉条纹的相位变化中得出.选择金膜厚度为30nm和40nm的两种芯片,分别用浓度为50%和20%的酒精-水溶液进行实验,得到SPR阵列图谱;选择金膜厚度为30nm,兔IgG作为阳性对照,牛血清白蛋白(BSA)作为阴性对照,与0.2mL的羊抗兔IgG、1.8mL水的混合溶液反应,得到阵列反应图谱.实验结果表明,这种方法具有抗干扰能力强,灵敏度高,无需标记和可实时检测等优点,能满足蛋白质芯片检测的要求.
- 余兴龙魏星王鼎新定翔廖玮赵新生
- 关键词：蛋白质微阵列SPR相位检测偏振光干涉
- 基于SPHD及FRET技术的蛋白质传感器被引量：2
- 2006年
- 蛋白质传感器作为一种分析蛋白质与其他分子之间作用力的有效手段已经越来越显示出其优点,但是蛋白质在基底表面的变性问题对于研究者来说仍然是一个挑战.作者介绍了一种具有高灵敏度的蛋白质传感器,即利用DNA引导固定(DDI)方法,将DNA-蛋白质复合物通过DNA双链特异性杂交固定在硅基底表面,从而有效保持了蛋白质的活性,并且引入荧光共振能量传递(FRET)技术以及电势扫描发卡去杂交(SPHD)技术降低非特异性吸附带来的荧光信号.这种蛋白质传感器在蛋白质识别以及DNA杂交方面具有显著区分不同体系荧光信号的能力.
- 郭素廖玮魏芳钱民协赵新生
- 关键词：蛋白质传感器FRET微阵列
- 基于荧光光谱及高活性固定方法的蛋白质芯片研究
- 2003年
- 随着后基因组时代的来临,蛋白质芯片——作为高通量蛋白检测和筛选的重要手段——的研究变得越来越重要。蛋白分子在固体表面的固定,一直是蛋白质芯片研究的核心问题之一。影响蛋白质分子在固体表面性质及行为的因素主要有:疏水相互作用,静电相互作用,表面微环境。我们通过表面荧光光谱表征了 Si-COOH 和 Si-ssDNA 表面固定蛋白的情况。为考察 Si-COOH 和 Si-ssDNA 在固定蛋白效率上的差异,另一方面为了解蛋白质在表面的物理吸附程度,分别将 Si-COOH 和 Si-ssDNA 浸泡于含有和没含有活化剂的蛋白质溶液中进行固定反应,然后清洗检测荧光。结果如图1所示,活化后固定在 Si-ssDNA 表面的蛋白比 Si-COOH 表面固定的稍多,而物理吸附的量在两种表面却有较大的差别。Si-ssD-NA 表面吸附的蛋白却明显少于 Si-COOH 表面吸附的蛋白数量。为了考察不同方法固定蛋白在表面上活性差异,我们先在 Si-COOH 和 Si-ssDNA 表面固定 rIgG,然后分别与不同浓度的 FITC-GAR IgG 反应,清洗后检测荧光。得到的数据用 Langmuir 吸附等温式进行拟合,得到平衡常数分别是:K(Si-COOH)=1.97±0.04×10~6M^(-1),K(Si-ssDNA)=3.20±0.01×10~6M^(-1)。有特异性识别和无特异相互作用的蛋白对之间的信号比较,也是衡量表面蛋白活性和生物传感器优劣的一个重要标准。我们选取了血浆中含量最大的三种蛋白作为测试模型分子,即兔 IgG(rabbit-IgG),牛血清白蛋白(BSA),纤维蛋白原(Fibrino-gen)。将这三种分子分别固定在 Si-COOH 和 Si-ssDNA 表面,最后与含有活化剂的 FTTC-羊抗兔 IgG 溶液反应,清洗后检测荧光。得到了如图3所示的结果。无论是 Si-COOH 还是 Si-ssDNA 表面,特异识别的分子对兔 IgG 和 FITC-羊抗兔 IgG 信号都远大于其他两种无特异相互作用的蛋白质分子对。以上实验可以证明 Si-COOH 和 Si-ssDNA 都可以用来进行高活性蛋白质芯片
- 廖玮赵新生
- 关键词：蛋白质芯片荧光光谱
- 基于FRET以及SPHD的蛋白质传感器研究
- ＜正＞蛋白质在基底表面的变性问题是制约蛋白质传感器技术发展的重要原因之一。DDI（DNA-Directed Immobilization）方法可以比较显著地改善上述问题,但也存在着由于DNA错配及蛋白质误识别引起的不可忽...
- 郭素廖玮魏芳赵新生
- 文献传递
- 一种蛋白质芯片
- 本发明公开了一种蛋白质芯片。该蛋白质芯片，是由基片和表面展示有用作分子检测器的蛋白质的重组噬菌体组成，所述表面展示有用作分子检测器的蛋白质的重组噬菌体以微阵列固定在基片上。本发明将制作芯片的蛋白质展示于噬菌体上，使蛋白质...
- 朱圣庚赵新生毕群黄仪秀洪龙廖玮岑晓东谭涛超
- 文献传递
- 用于识别不同细胞蛋白质组的噬菌体抗体芯片被引量：6
- 2004年
- 将4个鼠源噬菌体抗体克隆和1个人源噬菌体抗体克隆偶联到羧基终止的硅片表面,制成分析型模型芯片.挑选健康人体淋巴细胞为正常细胞的代表,HeLa细胞为肿瘤细胞的代表,提取细胞的全部蛋白质并用荧光染料Cy3标记,与制成的分析芯片反应,得到了不同的结合图谱.实验结果表明,以噬菌体抗体为分子感受器的分析芯片可用于识别不同细胞的蛋白质组.
- 洪龙廖玮魏芳赵新生朱圣庚
- 关键词：细胞蛋白质组噬菌体抗体库生物传感器
- 寡聚核苷酸嵌入染料荧光共振能量传递分子检测方法
- 本发明将荧光共振能量传递(FRET)的技术引入到蛋白质芯片的制备和检测中。通过设计，使特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子，与目标分子上标记的荧光分子形成FRET的给体和受体。通过引入FRET，大大提高了蛋白芯片的特异...
- 赵新生廖玮郭素
- 文献传递
- 溶液识别、表面寻址蛋白质芯片及其制备和检测方法
- 本发明提供一种溶液识别、表面寻址的蛋白质芯片，根据本发明的蛋白质芯片包括芯片基底和固化在其上的发卡型寡聚核苷酸，探针分子包括蛋白质以及与其相连的寡聚核苷酸，荧光标记的目标蛋白分子，和特异嵌入寡聚核苷酸双链而发光的染料分子...
- 赵新生廖玮郭素
- 文献传递
- 利用pⅧ展示系统改进噬菌体抗体芯片被引量：6
- 2005年
- 将展示单链抗体的重组噬菌体与羧基终止的硅片偶联,制成噬菌体抗体芯片,可用于检测多类蛋白质和蛋白质组.通常抗体被展示于噬菌体外壳蛋白pⅢ上,由此制备的芯片灵敏度和信噪比较低.我们选用凝血酶特异的单链抗体为代表,比较了pⅢ展示系统和pⅧ展示系统制成芯片的检测效果.由于pⅧ展示系统的融合蛋白拷贝数多,所受空间位阻小,大幅度提高了噬菌体抗体芯片的灵敏度和信噪比,有望用于制备新型蛋白质芯片.
- 廖玮洪龙魏芳朱圣庚赵新生
- 关键词：蛋白质芯片
- 全反射红外逐层检测含重氮高分子薄膜的生长
- 2004年
- 运用全反射红外技术对逐层组装的含重氮高分子薄膜进行了分步定量分析.利用-CH2-峰的逐层变化规律,确认了在组装过程中每层吸附高分子的量是一致的.通过重氮基一N=N+特征的吸收峰,定量计算了在特定实验条件下,-N=N+分解生成共价键的比例.这些结果为认识重氮高分子薄膜的生长提供了更为直接和细致的信息.
- 廖玮魏芳曹维孝赵新生
- 关键词：共价键高分子材料
