廖国宁
- 作品数：23 被引量：165H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- T淋巴瘤侵袭诱导基因在卵巢癌细胞株的表达及其意义被引量：8
- 2003年
- 目的研究T淋巴瘤侵袭诱导基因1(Tiam1)在卵巢癌侵袭转移方面的作用。方法RT-PCR检测Tiam1和Rac1mRNA的表达;Westernblot法检测Tiam1蛋白质的表达;Boyden小室体外侵袭实验测定癌细胞迁移能力。结果Tiam1mRNA和蛋白质及Rac1mRNA在4株卵巢癌细胞A2780、Caov3、Skov3及SW626中均呈中高度表达;癌细胞平均迁移百分数分别为(27.67±3.2)%、(10±1.0)%、(22.67±2.5)%及(47.67±1.52)%。Tiam1及Rac1表达水平与癌细胞迁移潜能间均呈显著性相关,r分别为0.874和0.814,P=0.003和0.042。结论Tiam1/Rac1信号转导通路在卵巢癌细胞的侵袭和转移过程中起重要作用,为卵巢癌的基因治疗提供了新的靶点。
- 吴明富奚玲陈刚李静徐茜李辅军卢运萍王世宣廖国宁马丁
- 关键词：RACL卵巢癌细胞
- 人前列腺癌高低转移细胞株差异表达基因的筛选被引量：2
- 2007年
- 目的:筛选高低转移能力人前列腺癌细胞株PC3M-1E8和PC3M-2B4间差异表达基因。方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术,对高转移能力人前列腺癌细胞株PC3M-1E8及其同源低转移细胞株PC3M-2B4进行2次消减杂交,第1次SSH实验,以PC3M-2B4细胞株为实验方,PC3M-1E8株为驱动方,构建正向消减文库。第2次实验则以PC3M-1E8株为实验方,PC3M-2B4为驱动方,构建反向消减文库。筛选出来的阳性克隆进行测序,并在GeneBank数据库中进行同源性比较后从中选取若干序列进行实时定量PCR验证。结果:2个消减文库共得到238个阳性克隆,从中各随机选取8个克隆测序并进行同源性分析,发现其中12条序列来自于11个已知基因,另外4条序列为新的未知功能的基因序列标签(EST)。结论:成功构建了高低转移力人前列腺癌细胞株的双向消减杂交文库。
- 宋安萍廖国宁吴明富卢运萍马丁
- 关键词：前列腺肿瘤肿瘤转移克隆
- 卵巢癌细胞拓扑替康耐药机制的探讨被引量：8
- 2004年
- 目的 探讨人卵巢癌细胞对拓扑替康 (TPT)的耐药机制。方法 流式细胞仪检测卵巢癌TPT耐药细胞与亲本细胞的胞内罗丹明 (Rh12 3)荧光强度 ,RT PCR法检测各膜转运蛋白 (P gp、MRP、BCRP)的基因表达。将包含BCRPmRNA翻译起始位点的反义寡核苷酸 (ASODN)片段转染进耐药细胞 ,分别检测耐药细胞经体外转染后 ,BCRP的基因表达及胞内Rh12 3荧光强度的改变。结果 耐药株的胞内Rh12 3荧光强度是亲本细胞的 31.19% (P <0 .0 1)。耐药株中无P 糖蛋白 (P gp)的基因表达 ;多药耐药相关蛋白 (MRP)基因有极微弱表达 ,相对表达值为 0 .0 5 7;而BCRP基因在耐药株中高表达 ,相对表达值为 0 .6 6 ,亲本细胞不表达BCRP基因。将ASODN转染进耐药细胞后 ,BCRP的基因表达显著下降了 5 9.4 2 % (P <0 .0 5 ) ,胞内Rh12 3荧光强度由 5 .4 2增加到 16 .6 3(P <0 .0 5 )。结论 BCRP的高表达致胞内化疗药物浓度减少 ,是卵巢癌细胞对TPT耐药的主要原因。
- 贾平吴少波李芳徐茜吴明富廖国宁卢运萍马丁
- 关键词：卵巢癌拓扑替康膜转运蛋白耐药蛋白流式细胞仪耐药机制
- 反义寡核苷酸逆转卵巢癌细胞对拓扑替康耐药性的研究被引量：6
- 2003年
- 背景与目的:研究表明乳腺癌耐药蛋白(breastcancerresistanceprotein,BCRP)在卵巢癌拓扑替康(topotecan,TPT)耐药株A2780/TPT中存在高表达,它可能在卵巢癌耐药中起着重要的作用。本研究拟探讨BCRP反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASODN)片段对A2780/TPT细胞耐药的逆转作用。方法:人工合成包含BCRPmRNA翻译起始位点的ASODN片段,并合成相应的正义寡核苷酸(senseoligonucleotide,SODN)片段作为对照。用脂质体Lipofect-2000将ASODN及SODN分别转染进A2780/TPT细胞,分别用RT-PCR法、流式细胞仪及MTT法检测A2780/TPT细胞经体外转染后,BCRPmRNA的表达、胞内罗丹明荧光强度及对TPT耐药指数的改变。结果:将ASODN/Lipofect-2000转染进A2780/TPT耐药细胞后,细胞内BCRPmRNA的表达较未转染细胞下降了59.42%(P<0.05),胞内罗丹明荧光强度由转染前的5.42增加到16.63(P<0.05),耐药指数由25降到5。而转染SODN/Lipofect-2000的A2780/TPT细胞中,上述指标无显著性变化。结论:转染ASODN/Lipofect-2000可部分逆转BCRP介导的卵巢癌细胞耐药。
- 贾平吴少波徐茜吴明富高庆蕾廖国宁卢运萍马丁
- 关键词：反义寡核苷酸逆转拓扑替康耐药性乳腺肿瘤
- 趋化因子受体及配体在卵巢癌细胞迁移中的作用被引量：28
- 2005年
- 背景与目的:研究表明许多肿瘤细胞表达趋化因子受体,与肿瘤细胞的迁移与转移有密切关系。本研究拟探讨趋化因子受体CXCR4[chemokine(C.X.C)receptor4]及配体CXCL12[chemokine(C.X.Cmotif)ligand12]在上皮性卵巢癌细胞中的表达及在肿瘤细胞迁移中的作用。方法:采用RT鄄PCR和Westernblot检测15例上皮性卵巢癌组织、卵巢癌细胞株CAOV3、血管内皮细胞株HUVEC和10例正常卵巢组织中CXCR4的表达以及卵巢癌患者腹膜后淋巴结组织和输卵管平滑肌组织中CXCL12的表达。ELISA检测15例上皮性卵巢癌患者腹水中趋化因子CXCL12的含量。以Boyden小室检测重组人CXCL12、上皮性卵巢癌癌性腹水对CAOV3和HUVEC细胞的趋化活性的影响。结果:(1)在上皮性卵巢癌组织、CAOV3及HUVEC细胞中,CXCR4在mRNA及蛋白水平的相对表达量分别为2.30±1.12、1.89±1.20、1.68±1.11及1.35±0.14、1.86±0.34、1.96±0.23,正常卵巢组织在mRNA及蛋白水平均未检测到CXCR4表达;(2)卵巢癌癌性腹水定量检查结果显示,CXCL12含量为632～9326pg/ml(中位数为6237pg/ml)。卵巢癌患者腹膜后淋巴结组织中,CXCL12mRNA表达量的平均值为1.14±0.87,卵巢癌患者输卵管平滑肌组织未检测出CXCL12表达;(3)重组人CXCL12可诱导CAOV3及HUVEC细胞的迁移,其趋化指数分别为3.
- 李芳朱怀仕韩志强陈刚高庆蕾贾平张阿丽奚玲徐茜廖国宁王世宣卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤趋化因子受体细胞迁移
- u-PAR反义核酸载体对高侵袭人前列腺癌细胞PC-3M亚系侵袭能力的抑制效应
- 2001年
- 目的 :观察u PAR反义核酸载体对高侵袭力PC 3M亚系侵袭能力的抑制效应。方法 :利用单层细胞侵袭和软琼脂克隆形成实验 ,对比观察u PAR反义核酸对高侵袭亚系体外侵袭能力的影响 ;应用RT PCR和明胶酶谱法 ,分析u PAR反义核酸对高侵袭亚系MMP 9活性的影响 ,并且观察u PAR反义核酸载体转染前后的细胞亚系在裸鼠体内成瘤率及转移情况。结果 :转染u PAR反义核酸的高侵袭亚系体外侵袭能力和非贴壁依赖性生长能力均明显降低 ,抑制率分别为 79%和6 0 % ;u PAR反义核酸虽不影响高侵袭亚系MMP 9mRNA的转录 ,但对MMP 9酶原的激活有抑制作用 ;且转染u PAR反义核酸载体亚系的体内成瘤率和移植瘤的生长明显受到抑制 ,与对照组之间差异具有极显著性 (P <0 .0 1)。结论 :u PAR反义核酸对高侵袭亚系体外侵袭能力有较强抑制作用 ,并可显著抑制高侵袭亚系的体内生长能力。
- 廖国宁李清芬李卓娅龚非力邓耀祖冯友梅
- 关键词：肿瘤侵袭前列腺癌反义核酸U-PARMMP-9
- 上皮性卵巢癌组织中金属硫蛋白与肺耐药蛋白的表达及意义被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨上皮性卵巢癌中金属硫蛋白 (MT)及肺耐药蛋白 (LRP)的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化SP法及半定量分析方法 ,检测 1995～ 2 0 0 1年上皮性卵巢癌 6 4例 ,复发后二次手术癌组织 17例 ,卵巢良性上皮性肿瘤 16例及正常卵巢组织 14例中MT及LRP的表达 ,并进行相关临床病理因素分析。结果 MT在上皮性卵巢癌中的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织 (P <0 0 1) ,MT表达与细胞分级和腹水相关 ;在上皮性卵巢癌中LRP的阳性率为 78 1% ,与卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织相比差异有显著性意义(P <0 0 1) ;化疗后癌组织中MT的阳性表达率和LRP的强阳性表达率与初治卵巢癌组织中相应的表达率差异有显著性意义 ;MT与LRP表达存在相关性 ,两者同时表达者术后生存时间短 ,易于复发。结论 MT、LRP在上皮性卵巢癌中较恒定表达 ,化疗可以增加癌组织中MT、LRP的表达。联合检测MT、LRP可预测卵巢癌的铂类联合化疗疗效 。
- 王薇高庆蕾邬素芳胡余昌李辅军廖国宁王世宣周剑峰卢运萍马丁
- 关键词：上皮性卵巢癌癌组织金属硫蛋白肺耐药蛋白LRP
- 卵巢癌细胞PCDGF的表达与意义被引量：4
- 2004年
- 目的 研究人卵巢癌细胞PCDGF的表达 ,探讨其与卵巢癌恶性表型的关系。方法 应用半定量RT PCR和Westernblot分别检测 3株卵巢癌细胞中PCDGFmRNA和蛋白表达水平。单层细胞增殖实验测定 3株卵巢癌细胞的增殖能力 ;Boy den小室体外侵袭实验测定不同细胞株的侵袭能力。结果 3株卵巢癌细胞PCDGF转录和翻译水平呈同步变化 (P <0 .0 5 ) ,均为SW 6 2 6最高 ,A2 780稍低 ,Skov 3最低。而其增殖、侵袭能力亦为SW 6 2 6最强 ,A2 780次之 ,Skov 3最弱。结论 3株卵巢癌细胞PCDGFmRNA和蛋白表达水平与其增殖、侵袭能力呈正相关 (前者r1=0 .97,r2 =0 .89,后者r1=0 .85 ,r2 =0 .84 ) ,提示PCDGF在卵巢癌发生演进中可能作为独立因素起多种作用 ,有望成为治疗的新靶点。
- 刘玉兰廖国宁韩志强吴明富李辅军卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤畸胎瘤细胞源性生长因子基因表达
- 卵巢癌拓扑替康耐药细胞株的建立及其生物学特性被引量：4
- 2004年
- 目的 :建立卵巢癌拓扑替康 (TPT)耐药细胞株 ,研究其生物学特性。方法 :用浓度梯度递增法建立卵巢癌TPT耐药细胞株。用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测此耐药株对多种化疗药物的耐药指数 ;用细胞计数法描绘两株细胞的生长曲线并计算群体倍增时间 ;用流式细胞仪检测两株细胞的凋亡率及周期分布 ;荧光显微镜及透射电镜下观察亲本细胞、敏感细胞及耐药细胞的超微结构。结果 :历时 6个月建立了卵巢癌TPT耐药细胞株A2 780 /TPT。此细胞株对TPT及米托蒽醌 (MX)耐药 ,耐药指数分别为 2 5及 19,对喜树碱 (CPT)轻微耐药 ,耐药指数为 3,对其他多种化疗药物不交叉耐药。耐药细胞的生长速度比亲本细胞慢 (P <0 .0 5 ) ,且细胞凋亡率及G2 M期细胞比例较亲本细胞高 (P <0 .0 5 )。敏感细胞呈典型的凋亡形态特征 ,而耐药细胞凋亡核的数量明显减少 ,凋亡程度明显减轻 ,且仍有较多的细胞核形态正常。结论 :所建立的卵巢癌TPT耐药株具有耐药细胞的基本生物学特征 ,且该耐药模型稳定。
- 贾平李芳吴明富廖国宁卢运萍马丁
- 关键词：卵巢肿瘤拓扑替康耐药细胞流式细胞术
- 人前列腺癌细胞PC-3M亚系u-PAR基因表达的分析(英文)
- 2004年
- 目的 为研究与人前列腺癌细胞(PC-3M)侵袭能力相关的靶分子。方法 采用有限稀释法分离单克隆细胞株，并应用单层细胞侵袭等实验鉴定各亚系的体外侵袭能力；借助RT-PCR和免疫组化的方法，分别在转录和翻译水平检测5株侵袭能力不同的PC-3M亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)的表达。结果 高侵袭亚系u-PAR基因mRNA的表达和蛋白质水平均明显高于低侵袭亚系。结论 PC-3M亚系u-PAR的高表达与其较强的侵袭能力密切相关，而u-PAR可能是抑制高侵袭亚系侵袭效应的一个重要靶分子。
- 廖国宁李清芬冯友梅邓耀祖马丁
- 关键词：前列腺癌基因表达靶分子
